天然寡糖的研究进展
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇天然寡糖的研究进展范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
摘要：寡糖及其衍生物因具有诱导植物抗病性、促进双歧杆菌生长、高保湿、抗氧化、抗肿瘤、增强机体免疫力等生物活性，已在生物农药、饲料工业、食品工业、营养保健等行业中广泛应用，成为近几年的研究热点。随着食用菌食药用价值不断被发掘，其寡糖的研究越来越受到重视。为更好地指导食药用菌天然寡糖开发应用，本文综述了寡糖的分布、分类、提取工艺、分离纯化工艺及活性等方面的研究新进展。
关键词：寡糖；提取；纯化；应用
中图分类号：S646.099文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）07-0141-05
寡糖又称低聚糖，由不同的五碳糖和六碳糖通过糖苷键连接形成。科学界对“寡”的数目并没有严格的规定。1959年，Jhone建议将9个以下的单糖残基低聚物称为寡糖[1]。寡糖及其衍生物是一类重要的生物活性物质，能促进双歧杆菌生长，激活植物的自我防卫系统，还具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用。寡糖类物质可通过天然提取、降解和人工合成等方法获得，其中天然提取的方法具有方法简单、能耗小、污染低等优点。玄参科、菊科植物和食药用菌因其含有较多的功能性寡糖和未知寡糖，已成为天然寡糖的主要研究对象。食药用菌含有的聚糖类物质尤为丰富，继活性多糖后食药用菌寡糖的研究将成为糖工程研究的又一热点。
1寡糖的分布
寡糖类物质的分布广泛，多数植物的根茎、果实和种子中均含量丰富。王照波等[2]、王江浪等[3]从雪莲果、苹果中提取出大量寡糖类物质，陈[4]采用水提醇沉去多糖法从洋根中提取的低聚果糖含量高达53.72%。生地黄中已知的寡糖种类有水苏糖、棉子糖、甘露三糖、毛蕊四糖等[5，6]。据报道，营养丰富的食药用菌也富含寡糖类物质。姜瑞芝等[7，8]从猴头菌浸膏中分离得到猴头菌二糖、三糖和四糖。马红霞等[9]从树舌灵芝中分离得到了非还原性二糖。此外，也有从藻类、菊芋、大豆等[10～12]植物中获得寡糖类物质的报道。
2寡糖的分类
到目前为止已确定的寡糖有上千种。寡糖的分类有以下3种方法[13]：①根据寡糖的单糖组成可分为同寡糖和杂寡糖；②根据寡糖分子中是否存在游离的半缩醛羟基，分为还原性寡糖和非还原性寡糖；③根据生物学功能可分为普通寡糖和功能性寡糖，前者可被机体消化吸收，产生能量，后者具有特殊的生理学功能但不被肠道吸收。此外，寡糖还存在许多经过化学基团修饰生成的衍生物，如糖醛酸、胺基糖、脱氧糖、糖醇等[14]。
3天然寡糖的提取方法
天然提取寡糖与降解或合成寡糖的方法相比，虽不易扩大到工业化生产，但工艺简便，涉及化学药品少，对寡糖的结构及生物学活性影响小，有利于研究未曾发现或认知的新型寡糖。常见的提取方法有以下几种：
3.1水提法
水提法是自天然材料中提取糖类物质的常用方法。为了减少杂质，可先用低极性溶剂去除亲脂性的成分，然后再用水浸提。赵贵兴等[12]以脱脂豆粕为原料，采用水提法制备大豆低聚糖浆，为大豆的综合利用提供了新途径。
3.2有机溶剂抽提法
糖类是多羟基的化合物，极性大，易溶于极性溶剂，因此，可利用相似相容原理，选择合适极性的溶剂反复抽提。赵益斌等[15]对青阳参乙酸乙酯提取物进行研究，分离得到4种新寡糖。信维平[16]分析了乙醇甲醇法和乙醇法两种提取方法对胡萝卜寡糖提取率的影响并确定了最佳提取工艺。
3.3微波提取法
近几年来，微波提取法已广泛应用于药用植物化学成分提取方面。其原理[18，19]是利用微波能的加热效应加速对目标化合物的提取，并利用空间电场和磁场的高频振荡，加速目标化合物的扩散速率，从而提高提取效率。王章存等[19]利用500 W的微波在近中性的条件下处理30 min，可显著提高大豆低聚糖的含量且更利于脱盐。
3.4射频法
与微波加热同属介电加热的射频技术，射频频率在10～300 MHz，由于其波长最多可达微波波长的360倍，穿透深度（几十厘米）远远超过微波[20]。同时由于射频的能量更加集中，不像微波是漫散射，因此设备放大后也不存在泄露问题。高虹等[21]探讨了射频技术在香菇多糖提取中的应用，优化了射频辅助提取工艺，与传统方法相比得率有较大提高。
3.5超声波提取法
超声波法提取糖类化合物的主要原理是由于超声波产生的空化效应能产生强大的冲击波，促使细胞内含物释放到溶剂中，从而加速了整个萃取过程[22]。刘立洋等[23]探究了超声波技术在提取大豆低聚糖工艺中的应用效果，并摸索出一整套提取、检测的方法。
4寡糖的分离和纯化
寡糖的分离和纯化是寡糖研究的关键步骤，是指将不同种类寡糖进行分离，得到单一寡糖的过程。目前，常用的分离技术有以下几种：
4.1层析技术
4.1.1薄层层析薄层层析是在纸层析的基础上发展起来的，在玻璃板上涂一层支持剂，通过流动剂的推动使一端样品得到分离的物理方法。常用的支持剂有硅胶G、氧化铝、纤维素、硅藻土、交联葡聚糖凝胶等[24]。此方法优点是分辨效率高，简便易行，可同时分析多个样品。Betty等[25，26]确定了壳寡糖的薄层色谱分析条件：乙酸乙酯∶乙醇∶水∶氨水（V/V）=5∶4∶4∶0.3，壳寡糖溶液上行展距为8 cm。
4.1.2色谱柱分离法色谱柱分离法是一种便于工业化生产、操作简单的方法。当样品溶液通过色谱柱中的固定相后，不同组分即可得到分离。色谱柱中的填充料以离子交换树脂、大孔树脂和聚酰胺为主。下面简单介绍几种色谱柱分离方法：
①活性炭柱层析：活性炭柱层析是利用样品中各组分在活性炭上的吸附能力不同来进行分离的。活性炭比表面积大，吸附量大，分离效果较高，与等量的天然硅藻土混合使用，是分离寡糖液常用的填充材料。活性炭柱层析方法的优点是分离容量大，分离效率高，适用范围广，并不受洗脱液组成、糖液浓度改变（1%～10%）或无机盐存在的影响[27]。车今智等[28]采用活性炭柱层析对芙蓉菊寡糖进行分离，获得了不同分子量的寡糖片段。
②凝胶柱层析法：凝胶柱层析法已广泛应用在寡糖的分离与纯化过程中，其优点是高效、易操作、重复性好。主要原理是利用立体网状结构的多孔性凝胶作为筛子，如葡聚糖凝胶（商品名为Sephadex G）、聚丙烯酰胺凝胶（商品名为Bio-Gel P系列）等。当糖溶液流经凝胶柱后，洗脱时不同相对分子质量的糖可以得到分离。小分子糖易于扩散，洗脱时路径长，后被洗下。郝林华[29]采用SePhadexG-50葡聚糖凝胶柱层析分离纯化牛蒡寡糖，得率为77.12%。Harry等[30]采用Bio-Gel P-2凝胶柱层析技术分离得到带阿拉伯糖基的低聚木糖。
③离子交换色谱法：在纤维素层析成功分离糖类的基础上，人们将纤维素改性，使离子交换与纤维素层析结合制成一系列的离子交换纤维素，应用于糖类的分离并取得了较满意的效果。常见的阳离子交换纤维素有CM-Cellulose、P-Cellulose等；阴离子纤维素有DEAE- Cellulose、ECTEOLA- Cellulose等，可以分离酸性、中性多糖和黏多糖。用离子交换树脂分离糖类，可有效地除去样液中的酸、碱成分及无机离子，但应注意不宜用强碱性与强酸性树脂[1]。刘元召[31]在研究真菌壁寡糖的过程中，采用强阳离子交换层析介质分离寡糖、蛋白及肽类物质。
4.2膜分离技术
膜分离是利用半透膜作为选择障碍层，依据膜孔径大小达到分离目的的一门新技术，其优点是操作简便、产物活性高和生产过程无污染等。膜分离技术可分为以下几种：反渗透、透析、电渗析、纳滤、超滤、微滤等，其中反渗透和纳膜过滤最有望用于分离纯化功能性寡糖[32]。杜昱光等[33]建立了一种酶解壳聚糖与膜分离偶合生产壳寡糖的方法。陈勉等[34]采用超滤的方法制备出聚合度为6～8的壳寡糖。
4.3其它分离方法
纸色谱、纸电泳、气相色谱、石墨化碳柱高压液相色谱[35]、高效毛细管电泳法[36]等技术也常用于检测和分离寡糖。随着各项分离、分析检测技术的日趋成熟，各种方法间的混合使用已成为研究寡糖的最新趋势。
5寡糖生物活性的应用
5.1寡糖在农作物抗病方面的应用
寡糖既可自身抑菌抗病，又可作为诱导子诱导植物体提高抗病性，与此同时还可作为营养成分调节作物生长发育[37]，从而提高农作物的产量及商品性状。许多报道显示，寡糖类物质对多种真菌性病害均有很好的防治作用[38～42]。徐大明等[43]发现壳寡糖液浓度在0.5×10-5μg/ml以内时，对烟草花叶病毒（TMV）有明显的钝化作用。
5.2寡糖在饲料业中的应用
寡糖类物质具有调节肠道微生态、促进双歧杆菌生长、提高动物的免疫能力及生产性能、避免耐药性等功效[44，45]。凭借独特的生物学活性，寡糖类物质已成为新型饲料添加剂研发的热点。邢广林、李启琳等[46，47]的研究结果显示甘露寡糖能够代替抗生素药物添加到饲料中，提高肉鸡抗氧化能力、成活率和日增重，降低料重比。王彬等[48]研究显示，育肥期基础日粮添加0.1%的半乳甘露寡糖，可以显著促进育肥猪的生长，减少育肥猪的采食量，增强机体的免疫力。陈丽等[49]研究发现褐藻寡糖对嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）、白色念珠菌（Candida albicans）和鳗弧菌（Vibrio anguillarum）3种水产致病菌有很好的抗性，是一种高效、无毒副作用的水产养殖用饲料添加剂。
5.3寡糖在医疗保健方面的应用
5.3.1降血糖、血脂作用寡糖降血糖、血脂的生物活性已成为研发的新方向。据报道[50，51]，地黄寡糖具有降低ALX糖尿病大鼠血糖、增加血清胰岛素浓度及肝糖原含量的作用，昆布寡糖对2型糖尿病大鼠具有明显的治疗作用。张婷婷等[52]试验发现，5～10 ku的甲壳低聚糖对油脂、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠和胆固醇的吸附率分别为5.3%、90.0%、71.1%和87.5%。
5.3.2提高免疫能力寡糖可通过多种途径提高生物体免疫力，如促进细胞免疫和体液免疫。据报道[53，54]，甘露寡糖能够提高大西洋鲇嗜中性粒细胞的吞噬活性，对环磷酰胺制造的免疫低下小鼠也有较好的提高免疫力功效。此外，许多寡糖还具有增强造血功能、抗肿瘤、抗抑郁、治疗心血管疾病的功效[55～57]。
5.4寡糖在果蔬保鲜方面的应用
寡糖类物质在果蔬保鲜上的应用近几年屡见不鲜[58，59]，其主要的作用机理有以下几点：①在果蔬外形成半透膜，减少蒸腾作用造成的水分损失；②起到类似于气调包装的效果，维持较高的CO2、较低的O2和乙烯浓度；③阻止存储果蔬期间糖分和含酸量的下降；④降低存储期间果实的脂氧合酶（LDX）的活力，防止细胞的脂膜过氧化及内容物的渗漏；⑤通过提高果蔬中超氧化物歧化酶（SOD）的活力，延缓细胞衰老；⑥通过诱导一系列防御反应机制阻碍病原菌侵袭，如堵塞皮孔、产生植保素、果实细胞壁加厚等。邓丽莉等[60]研究发现1.5%壳寡糖处理可以有效延长柑桔贮藏时间。
5.5寡糖在食品加工方面的应用
某些寡糖具有低甜度、较好的水活性、保湿性、稳定性以及黏度等特点，已被广泛应用于食品和饮料加工。李晓东等[61]研究表明添加大豆低聚糖可延长点心面包的保质期。金桥等[62]研究发现在传统酸菜腌渍过程中添加壳寡糖可以有效抑制发酵初期腐败菌的生长并且还能提高酸菜的感官质量。此外，寡糖类物质应用于乳品、新鲜奶酪及保健饮料中的报道也不少[63～65]。
6结论与展望
随着人们对寡糖各方面性质和生理功能的不断认识，寡糖的应用已在食品、医药、农业等领域取得了一些成绩。食药用菌卓越的保健功效与其含有丰富的聚糖类物质是分不开的。目前，食药用菌多聚糖已开展了广泛研究，但在寡糖类物质上的研究，尤其是天然寡糖的提取研究还较少。因此食药用菌寡聚糖的研究开发对进一步提高食药用菌的综合开发价值有着重要意义。随着各种自动化分析仪器、现代医学与糖化学研究的紧密结合，寡糖类物质的研究开发具有广阔的前景。
参考文献：
[1]郭振楚. 糖类化学 [M]. 北京：化学工业出版社， 2005.
[2]王照波，周文美，徐子婷，等. 雪莲果水溶性低聚糖的提取工艺 [J]. 贵州农业科学，2010，38（2）：173-176.
[3]王江浪，许增巍，马惠玲，等. 由苹果渣制备果胶低聚糖的工艺 [J]. 农业工程学报，2009，25（S1）：122-128.
[4]陈.洋根中低聚糖的提取 [J]. 安徽农业科学，2007，35（27）：8673-8674.
[5]Kubo M， Asano T， Matsuda H，et al.Studies on rehmanniae radix.II. The relation between changes of constituents and improvable effects on hemorheology with the processing of roots of Rehmannia glutinosa[J]. Yakuzaku Zasshi，1996，116（2）：158-168.
[6]Tomoda M， Kato S， Onuma M， et a1.Water-soluble constituents of Rehmanniae radix.Ⅰ.Cabohydrates and acids of Rehmannia glutinosa f.hueichingensis[J].Chem. Pharm. Bull.，1971，19（7）： 1455-1460.
[7]姜瑞芝，王颖，陈英红，等.猴头菌寡糖的分离及其结构确定 [J]. 高等学校化学学报，2007，28（7）：1313-1315.
[8]姜瑞芝，王颖，陈英红，等. 猴头菌寡糖的化学研究 [J]. 中国药学杂志，2008，43（5）：341-344.
[9]马红霞，周忠波，包海鹰，等.树舌灵芝中分离得到非还原性二糖――海藻糖 [J]. 菌物学报，2008，27（4）：582-586.
[10]姚兴存，商勇，刘芳.紫菜低聚糖的制备技术研究[J].水产科学，2005，24（5）：38-40.
[11]郭洪涛，郭衍银. 菊芋资源开发及利用研究进展[J]. 山东农业科学，2011，11：69-72.
[12]赵贵兴，陈霞，刘忠云.大豆低聚糖制备工艺的研究[J].黑龙江农业科学，2001，2：13-15.
[13]汪建明，赵征，王勇志. 低聚糖的分离与鉴定 [J]. 食品研究与开发，2006，21（3）：3-6.
[14]段文录. 寡糖的分离及结构研究 [J]. 商丘职业技术学院学报，2003，6（2）：35-38.
[15]赵益斌，刘迪，徐贵丽，等. 从青阳参提取的新寡糖 [J]. 西南国防医药，2007，17（4）：385-389.
[16]信维平.胡萝卜寡糖的提取与应用的研究 [J]. 粮油加工，2009，12：178-180.
[17]卢晓江. 中药提取工艺与设备 [M]. 北京： 化学工业出版社， 2004.
[18]邓永智，李文权，袁东星. 海水小球藻中多糖的提取及其单糖组成的气相色谱-质谱分析 [J]. 分析化学研究报告，2006，34（12）：1697-1701.
[19]王章存，刘卫东，王绍锋. 微波法提取大豆低聚糖的研究 [J]. 中国农学通报，2006，22（6）：102-104.
[20]Marra F， Lyng J， Romano V， et al. Radio-frequency heating offoodstuff： solution and validation of a mathematical model[J].Journal of Food Engineering，2007，79（3）：998-1006.
[21]高虹，王易芬，史德芳，等.射频辅助提取香菇柄多糖[J]. 农业工程学报，2009，25（1）：180-184.
[22]张昌军，原方圆，邵红兵. 超声波法在提取多糖类化合物中的应用研究 [J]. 化工时刊，2007， 2（21）：54-56.
[23]刘立洋，金龙国，刘章雄. 微波和超声两种技术提取大豆低聚糖的效果 [J].大豆科学，2008，27（5）：838-844.
[24]陈毓荃. 生物化学实验方法和技术 [M].北京：科学出版社，2002.
[25]Zhu B C R.Laine R A. Depolymerization of chitin with chitinases，European Chitin Society[M].Italy： [s.l.]， 1997，147-151.
[26]Capon B， Foster R L. The preparation of chitin oligosaccharides [J]. J. Chem. Soc.， 1970，12：1654-1655.
[27]董权锋，于荣敏. 寡糖研究新进展 [J]. 食品与药品，2009，11（7）：63-66.
[28]车今智，傅德贤，欧阳藩. 芙蓉菊寡糖的分离纯化及其生物活性的研究 [J]. 天然产物研究与开发，2004，16（5）：458-460.
[29]郝林华.牛蒡寡糖的制备与结构分析及对植物生长和抗病性的研究 [D].青岛：中国海洋大学，2004.
[30]Harry G， Rainer A H ， Felix J M， et al. Characterisation by 1H-NMR spectroscopy of enzymically derived oligosaccharides from alkali-extractable wheat-flour arabinoxylan[J].Carbohydrate Research， 1992，233：45-64.
[31]刘元召. 真菌壁寡糖及外分泌蛋白的分离提取和诱抗活性机理的初步探究 [D]. 大连：辽宁师范大学，2008.
[32]马镝，吴元华，赵秀香. 壳寡糖的制备、分离分析方法及在农业上的应用 [J]. 现代农药，2007，6（2）：1-5.
[33]杜昱光，张铭俊，王毓福，等. 一种酶法降解壳聚糖与膜分离偶合生产壳寡糖的方法：CN，1302809A[P].2000-01-05.
[34]陈勉，朱希强，李志明，等. 聚合度为6～8的壳寡糖的制备 [J]. 食品和药品，2008，10（3）：14-16.
[35]Kawasaki N ， Ohta M ， Hyuga S ， et al . Application of liquid chromatography/mass spectrometry and liquid chromatography with tandem mass spectrometry to the analysis of the site-specific carbohydrate heterogeneity in erythropoietin [J]. Anal. Biochem.，2000，285（1）：82-91.
[36]Shen Z ，Warren C D ，Newburg D S. High-perfor-mance capillary electrophoresis of sialylated oligosaccharides of human milk[J ] . Anal. Biochem.， 2000 ，279（1）：37-45.
[37]黄春燕，万鲁长，张柏松，等. 大球盖菇菌丝生长最佳碳源研究[J]. 山东农业科学， 2012，44（1）：75-76.
[38]赵建明，杨卫，王宣山，等. 氨基寡糖素对棉花病害的防治效果 [J]. 江西棉花，2009，31（3）：41-42.
[39]姚满昌，张明志，丁琴翠，等. 氨基寡糖素对西瓜枯萎病的防治试验 [J]. 长江蔬菜（学术版），2009，8：71-72.
[40]徐俊光，赵小明，白雪芳，等. 氨基寡糖素田间防治辣椒疫病及体外抑菌试验 [J].中国农学通报，2006，22（7）：421-424.
[41]Ben-Shalom N，ArdiR， Pinto R， et al. Controlling gray mould caused by Botrytis cinerea in cucumber plants bymeans of chitosan[J]. Crop Protection， 2003， 22（2）： 285-290.
[42]苏小记. 寡糖素对几种病害的防治技术研究 [D].杨凌：西北农林科技大学，2004.
[43]徐大明，姜华. 壳寡糖的诱导抗性及对TMV的体外钝化研究 [J]. 辽宁农业科学，2008，2：18-20.
[44]Valojerdi M R，Salehnia M. Developmental potential andultrastructural injuries ofmetaphase II （MII） mouse oocytes after slow freezing or vitrification[J].J. Assist. Reprod. Genet.，2005，22（3）：119-127.
[45]Ghetler Y，Yavin S，Shalgi R，et al.The effect of chilling on membrane lipid phase transition in human oocytes and zygotes[J].Hum. Reprod.，2005，20（12）：3385-3389.
[46]邢广林，李同树，刘翠艳，等. 甘露寡糖、中药和微生态制剂对肉鸡抗氧化性能的影响 [J]. 家畜生态学报，2007，28（1）：47-51.
[47]李启琳，李燕鹏，王士长. 甘露寡糖替代抗生素对肉鸡生产性能的影响 [J]. 安徽农业科学，2008，36（6）：2350-2356.
[48]王彬，黄瑞林，印遇龙，等. 半乳甘露寡糖取代金霉素对育肥猪血清生化指标和激素水平的影响 [J]. 华北农学报，2006，21（1）：76-79.
[49]陈丽，王淑军，刘泉，等. 褐藻寡糖对3种水产致病菌抗菌活性研究 [J]. 淮海工学院学报（自然科学版），2009，18（1）：90-92.
[50]王晓莉，张汝学，贾正平. 地黄寡糖灌胃对糖尿病大鼠的降糖作用及对肠道菌群的影响 [J]. 西北国防医学杂志，2003，24（2）：121-123.
[51]侯庆华，宋文东，王浩，等. 昆布寡糖对2型糖尿病大鼠的实验作用 [J]. 广东海洋大学学报，2009，29（4）：46-50.
[52]张婷婷，王茵，刘淑集，等. 不同分子量的甲壳低聚糖对脂质吸附作用研究 [J]. 福建水产，2011，33（1）：21-25.
[53]Yoshida T， Kruger R， Inglis V.Augmentation of nonspecific protection in African catfish，Clarias gariepinus （Burchell），by the long-term oral administration of immunostimulants[J].J. Fish. Dis.，1995，18（2）：195-198.
[54]马志红，张庆波，史相国，等. 甘露寡糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响 [J]. 安徽农业科学，2009，37（16）：7462-7463.
[55]武卫红. 地黄寡糖的制备工艺及其药理活性研究 [D]. 济南：山东大学，2006.
[56]Yuan H ， Song J ， Li X ， et al. Immuno-modulation and antitumor activity of κ-carrageenan oligosaccharides[J].Cancer Lett， 2006， 243（2）：228-234.
[57]Liu H T， LiW M， Xu G，et al. Chitosan oligosaccharides attenuate hydrogen peroxide-induced stress injury in human umbilicalvein endothelial cells [J].Pharmacol. Res.， 2009， 59（3）： 167-175.
[58]聂青玉.壳寡糖在果蔬贮藏方面的研究进展 [J]. 山东省农业管理干部学院学报，2010，27（3）：155-156.
[59]Du J M， Gemma H， Iwahori S. Effect of chitosa-coating on the storage of peach， Japanese pear， and kiwifruit[J].Jap. Soc. Hort. Sci.， 1997， 66 （1）： 15-22.
[60]邓丽莉，黄艳，周玉翔，等. 壳寡糖处理对柑桔果实贮藏品质的影响 [J]. 食品工业科技，2009，30（7）：287-290.
[61]李晓东，马莺，任运宏，等. 国产大豆低聚糖在点心面包中的应用研究 [J]. 东北农业大学学报，2006，37（2）：180-183.
[62]金桥，王鑫，王刚，等. 壳寡糖在传统食品酸菜腌渍过程中的应用 [J]. 大连水产学院学报，2009，24（S1）：198-201.
[63]杨燕萍，彭正芳. 低聚木糖的保健功能及低聚木糖酸乳饮料的研制 [J]. 甘肃农业，2005，10：189-190.
[64]孙万成. 壳聚糖优化制作新鲜奶酪的工艺研究 [J]. 安徽农业科学，2011，39（19）：11928-11929.
[65]崔晓玲，陈洁，刘源，等.低聚糖南瓜保健饮料研究 [J]. 新疆农业科学，2004，41（专刊）：106-107.