HPLC法测定降压袋泡茶中大黄素含量

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇HPLC法测定降压袋泡茶中大黄素含量范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

摘 要：采用高效液相法测定降压袋泡茶中大黄素含量，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.1%磷酸（85：15）为流动相；检测波长为254nm，柱温30度，流速1.0ml/min。在此色谱条件下线性y=18.432x+3.2931，r=0.9999浓度范围1.19～23.89ug/ml，方法专属性、精密度、耐用性、准确度良好。

关键词：大黄素；高效液相法；分析

1 处方及制法

【处方】 夏枯草217g，决明子356g ，茺蔚子217g，钩藤 178g ，黄178g，茶叶178g。

【制法】 以上六味，取钩藤粉碎成粗粉，与茶叶混匀；其余夏枯草等四味加水煎煮二次，每次2小时，合并滤液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.10-1.20（80℃）的稠膏，与上述粗粉混匀，吸尽浓缩液，低温干燥粉碎，制成450g，分装，即得。

2 方法

2.1 色谱条件与系统适用性试验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.1%磷酸（85：15）为流动相；检测波长为254nm，进样量20ul。理论板数按大黄素峰计算应不低于1500[2]。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取大黄素10mg，置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得[1]。

2.3 供试品溶液的制备

取本品2.0g，精密称定，置50ml锥形瓶中，精密加甲醇25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置50ml圆底烧瓶中，挥去甲醇，加2.5mol/L硫酸溶液10ml，超声处理5分钟，再加氯仿10ml，加热回流1小时，冷却，移置分液漏斗中，用少量氯仿洗涤容器，并入分液漏斗中，分取氯仿层，酸液用氯仿提取2次，每次8ml合并氯仿液，以无水硫酸钠脱水，滤过，用氯仿适量洗涤无水硫酸钠，合并滤液与洗液，挥去氯仿，残渣加甲醇，微热使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得[3]。

2.4实验中使用仪器及标准品如下

3 结果与讨论

3.1 溶液稳定性

取对照品溶液，于不同时间点测定，通过不同时间点的测定结果与0小时的测定结果的比较情况。结果：经测定大黄素在21小时内稳定性良好。

3.2线性

取对照品溶液，分别抽取100、50、20、10、5？l依次注入液相色谱仪中，测定，以考察样品浓度与峰面积的线性，并计算相关系数r值。结果：经测定大黄素在1.19？滋g/ml～23.89？滋g/ml，线性方程：y=18.432x+3.2931，r=0.9999的浓度范围内与响应信号呈线性良好。

3.3专属性

阴性样品的制备：按制剂处方量配置除决明子外的其他组分，并按制法，配置，后按供试品溶液方法制备供试品溶液，并测定，经测定阴性样品不干扰测定。

3.4 重复性

取供试品重复测定6次，考察6次的测定结果的RSD值，测定结果平均值为0.088，RSD%为0.2%，所以重复性良好。

3.5 耐用性试验

通过改变不同的色谱条件流速、柱温、流动相比例、检测波长、色谱柱，比较不同条件下的测定结果，以考察方法的耐受性。结论：经计算不同色谱条件下的测定结果的RSD%值为0.9%，均小于2.0%，所以判定，本方法耐用性良好。

3.6 加样回收率

分别精密量取供试品溶液2.5ml置5ml量瓶中，加入不同体积的对照品溶液（浓度为大黄素4.535？g/ml）并用溶剂稀释至刻度，使其分别为正常样品浓度的80%、100%和120%，各3份，测定其含量，计算对照品回收量，经测定大黄素的加样回收率均在98%～102%之间，所以本方法的准确度良好。

参考文献

[1]高效液相色谱法测定胆清片中大黄素含量[J].云南中医中药，2005（4）.

[2] hplc法测定决明子中大黄素和橙黄决明素[J].中国中药，35（16）.

[3]决明子含量测定方法.[DB/OL].药物分析网，2007-7-24.