山仙颗粒对诱发性肝癌肝功能相关指标影响的实验研究

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摘要：目的：观察山仙颗粒对黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌动物肝功能相关指标的影响,并探讨其对化学诱导性肝癌的药理功效。方法：采用单剂量黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌短期实验模型,动物随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、大剂量山仙颗粒组(C组)、小剂量山仙颗粒组(D组)及对照组(E组),每组10只,于实验第6周末,采血检测肝功能相关指标。结果：C组STD、ALT、ALB、γ-GT与B组相比P均0.05，ALT、ALB与D、E组相比P均

关键词：山仙颗粒；肝癌；肝功能；实验研究

【中图分类号】R735.7 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2012)05-0126-01

山仙颗粒为我院院内制剂,前期的实验及临床研究表明其在抑制肿瘤及提高患者生存质量方面有明显疗效,本研究通过复制化学诱导的大鼠肝癌模型,探讨其对肝功能相关指标的影响作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物：清洁级SD大鼠50只，体重120g~160g,雄性,由第四军医大学实验动物中心提供。

1.1.2 主要试剂及药品：黄曲霉毒素B1(AFB1)、2-乙酰氨基芴(2-AAF)均为美国ACROS公司产品,二甲基亚砜(DMSO)为美国Amresco公司产品；血清总胆红素(STB)测试盒，丙氨酸氨基转移酶(ALT）测试盒，总蛋白（STP）测试盒，白蛋白(ALB)测试盒，γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)测试盒均由南京建成生物工程研究所生产；山仙颗粒：由陕西中医学院附属医院制剂中心提供,批号：20051104。替加氟片：上海医药（集团）有限公司华联制药厂生产,批号：060603。

1.2 方法及步骤

1.2.1 动物模型：采用段小娴等[1]建立的单剂量黄曲霉毒素B1(AFB1)致大鼠肝癌短期实验模型(AFB1+2-AAF+2/3PH)。

1.2.2 动物分组及处理：完全随机分组，每组10只,分别为：空白组(A组)：正常饲养,不做任何处理。模型组(B组)：采用“AFB1+2-AAF+2/3PH”的肝癌模型，每日生理盐水灌胃一次。大剂量山仙颗粒组(C组)：造模同上,每日按山仙颗粒10g/kg配制药液灌胃一次。小剂量山仙颗粒组(D组)：造模同上,每日按山仙颗粒2.5g/kg配制药液灌胃一次。对照组(E组)：造模同上,每日按替加氟200mg/kg配制药液灌胃一次。

1.2.3 检测项目及方法：所有动物每周定期称体重一次,并观察记录进食情况、中毒症状及死亡情况。于实验第6周末各组动物称重后在10%水合氯醛(400mg/kg)麻醉下,心脏采血,2500转/分、15分钟离心,取血清,分装冻存备用。两天内分别采用比色法检测血清总胆红素(STB),赖氏法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),双缩脲法检测血清总蛋白(STP),溴甲酚绿法检测血清白蛋白(ALB),比色法检测血清γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性,具体操作步骤按试剂盒说明书进行。

1.2.4 统计学分析：各组数据以均数±标准差(x±s)表示,采用spss13.0统计软件处理。

2 实验结果

2.1 一般状况：A组动物一般状况良好,活动正常。造模各组动物一般情况较差,在给AFB1后各组动物均有精神差,食量减少现象,给2-AAF饲料期间,各组动物均有食量减少,其中B组与E组较明显,体重增长减慢。C组、D组一般状况较好,体重增长较B组及E组快,其中以C组最明显。实验过程中B组2只、E组1只死于肝大部分切除术(PH)术中出血,D组1只PH后未苏醒,死亡。实验结束时,造模各组个别动物处死时有腹水及肠梗阻现象。

2.2 讨论：STB、ALT是肝脏病变程度的重要指标[2]，TP、ALB反映肝脏代谢状况，γ-GT在小肝癌患者中高表达，对肝癌的诊断有较好特异性[3]，上述指标与AFP等联合检测对肝癌的诊断有意义,也可提高敏感度[4]。本研究显示，C组动物血清STB 、ALT及γ-GT明显低于其余造模各组，白蛋白明显高于其余各组，表明大剂量山仙颗粒对造模状况下的动物肝脏功能有明显的保护作用，对诱发性肝癌的发生发展具有明显抑制作用。

参考文献

[1] 段小娴,覃柳亮,等.单剂量黄曲霉毒素Ｂ1致大鼠肝癌作用的短期实验模型[J].癌症,1996

[2] 门莎莎，董振南，贾兴旺，等. AFP、TBA、GGT和ALT联合检测对原发性肝癌的诊断价值[J]. 标记免疫分析与临床，2011