189株金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析

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摘要：目的 探讨金黄色葡萄球菌临床分离株对红霉素和克林霉素的耐药性及红霉素对克林霉素诱导耐药分析。 方法 采用纸片扩散方法测定金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性，并以D-试验法测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型。结果 189株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林135株占71.43%，甲氧西林敏54株占28.57%。红霉素和克林霉素均耐药的105株占55.56%，红霉素和克林霉素均敏感19株占10.05%，红霉素耐药而克林霉素敏感65株占34.39%。对红霉素耐药而克林霉素敏感的MRSA和MSSA诱导耐药发生率分别为62%和66.67%。结论 检测金黄色葡萄球菌中克林霉素诱导性耐药可以指导临床医师合理选用抗菌药物。

关键词：金黄色葡萄球菌；红霉素；克林霉素；耐药率；诱导耐药

金黄色葡萄球菌属（MRSA）已成为引起医院和社区化脓感染的重要病原菌，临床金黄色葡萄球菌感染广泛应用了大环内酯类、林可酰胺类和链阳菌素B类（MLSB）抗菌药物治疗，尤其是组织渗透强、价格低等特点的克林霉素常被作为对青霉素和头孢菌素过敏的替代首选药品。近年来，随着耐药性病原菌的不断增加，大环内酯类药物已呈现较高的耐药性，且红霉素具有诱导克林霉素耐药的作用[1]。本文实验通过D-试验法对金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药作用进行检测，以便指导临床合理用药，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料 本院2012年11月～2013年12月分离收集金黄色葡萄球菌标本189株作为研究对象，其中痰标本78株、分泌物62株、10株为血标本、23株为咽拭子、尿标本及导管标本等。纸片扩散法药敏试验的质控菌株为标准菌株金黄色葡萄球菌。

1.2 方法

1.2.1 仪器及药敏纸片 德灵MicroScan-4细菌鉴定仪以及配套的鉴定卡PC20；MH琼脂、头孢西丁（FOX，30μg/片）、红霉素（15μg/片）、克林霉素（2μg/片）纸片为英国OXOID公司产品。

1.2.2 药敏试验 采用纸片扩散法检测红霉素和克林霉素的耐药性及用头孢西丁确诊MRSA，质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923。

1.2.3 D-试验 按2009年美国临床实验室标准化协会（CLSI）标准操作[2]。红霉素耐药而克林霉素敏感株，用生理盐水成菌0.5个麦氏单位液均匀涂布在4mm厚的MH琼脂平板上。间隔15～20mm贴上红霉素和克林霉素纸片，置孵育箱孵育18～24h（恒温35℃）。若邻近克林霉素抑菌环出现"截平"现象，即D-试验阳性；若克林霉素抑菌环不出现"截平"现象，即D-试验阴性。

1.3统计学处理 数据采用WHONET5.3进行处理，计数资料采用χ2检验并比较二者差异有无统计学意义。

2 结果

2.1 MRSA的检出率 189株金黄色葡萄球菌中MRSA 135株占71.43%，MSSA 54株占28.57%。

2.2 耐药表型 135株MRSA中，红霉素和克林霉素均敏感的7株，红霉素和克林霉素均耐药的78株，红霉素耐药而克林霉素敏感的50株。54株MSSA中，红霉素和克林霉素均敏感的12株，红霉素和克林霉素均耐药的27株，红霉素耐药而克林霉素敏感的15株（见表1）。

注：Er为红霉素；CI为克林霉素；R为耐药；S为敏感

2.3 克林霉素诱导耐药发生率 金黄色葡萄球菌中红霉素耐药克林霉素敏感65株，D-试验阳性41株，诱导耐药发生率为63.08%。其中50株MRSA试验阳性31株发生率为62%；15株MSSA试验阳性10株发生率为66.67%（见表2）。

3 讨论

金黄色葡萄球菌是引起医院和社区化脓感染各种感染的重要病原菌之一，可引起全身不同部位的感染。近年来，MRSA的感染率呈现逐年上升的趋势，其严重的多重耐药性已成为临床上较为棘手的问题[3]。MRSA对大环内酯类抗菌药物的耐药机制主要有两种[4]：前者由msrA基因编码外排蛋白导致对大环内酯类和链阳霉素的耐药，对克林霉素敏感。后者由msr基因编码， 引起对具有相同靶位的大环内酯类、林可霉素类和B型链阳霉素同时耐药（MLSB耐药），耐药可分为结构型（cMLS）和诱导型（iMLS）。

克林霉素由于具有组织渗透性强、价格低等特点，是葡萄球菌感染，特别是皮肤和软组织感染及对青霉素过敏患者的首选药物[5]。常规纸片扩散法药敏试验可鉴别结构型cMLS型耐药的金黄色葡萄球菌，而诱导型iMLS型和MS型耐药菌株则无法鉴别。应在所有临床微生物实验室内推广D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药性。在克林霉素临床治疗中，如果克林霉素敏感而红霉素耐药的表型为诱导耐药，且诱导试验没有做的情况下，会致使治疗失败。故在金黄色葡萄球菌耐药性监测中，开展D-试验可帮助临床合理有效及时的使用正确的抗菌药物。

参考文献：

[1] 俞蕙，吴霞.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制及研究进展[J].实用儿科临床杂志.2012， 27（22）：1704-1706.

[2] National Committee for Clinical Laboratory Standards.Performance standards for anfimierobial susceptibilitytesting[S].M100-S19，CLSI，2009.

[3] 饶荣，，谭东云.我院金黄色葡萄球菌的分布特点、耐药性分析及治疗对策[J].现代中西医结合杂志.2011， 20（7）：874-875.

[4] 孙建文，万新亮，任孔华.金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素诱导耐药分析[J].检验医学.2010， 25（9）：675-677.

[5] 李彦媚，李纯厚，赵喜红，等.金黄色葡萄球菌检测方法的研究进展[J].安徽农业科学.2012， 40（16）：8927-8929.