炙甘草化学成分及药理作用研究
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1．1炙法对甘草有机成分的影响
1．1．1黄酮类成分
目前，从甘草中已发现多种黄酮及其衍生物［6-7］。这些黄酮类成分经炮制后含量有变化，主要表现为甘草苷含量的增加以及其他黄酮类成分，如芹糖甘草苷、异甘草苷等的变化。有学者采用HPLC-DAD法建立甘草(G．uralensisFisch．)及其炮制品的指纹图谱，比较炮制前后水煎液中甘草苷的含量变化，发现蜜炙可显著增加甘草苷的含量(P＜0．01)［8］，清炒甘草以及蜜润甘草中甘草苷的含量均低于炙甘草［9-10］。不同炮制时间、温度以及加蜜量也会影响甘草黄酮苷类成分的煎出量。研究表明，随加热温度及加热时间的增加，清炒甘草中芹糖甘草苷、甘草苷的煎出量显著降低，异甘草苷增加;加入炼蜜后上述成分的含量、煎出量的变化幅度增强［11］。还有学者对不同产地的甘草(G．uralensisFisch．)生品及炙品总黄酮含量进行测定，发现黄酮含量均有不同程度的提高［12］。
1．1．2三萜类成分
甘草中的三萜类成分与其药理作用直接相关，其中甘草酸是主要药效物质之一［13-15］，也是评价生甘草质量的物质基础，因此甘草炮制后甘草酸的变化是炙甘草的质量标准化研究及炮制工艺规范化研究的科学依据。实验证明清炒甘草水煎液中甘草酸含量有所升高，而炙甘草中甘草酸含量有所下降［9-10，16］，约减少20%左右，甘草次酸的含量相对增高［18］。通过炒制法、烘制法、微波法不同方法制备炙甘草，发现烘制法制得的炙甘草中甘草酸含量高［19］。也有实验表明，传统蜜炙法与机器蜜炙法对甘草中甘草酸含量的影响差异不显著［20］。
1．1．3其他成分
从甘草药材中也提取分离到一些生物碱、香豆素和糖类成分。这些化学成分在炮制的过程中也有一定的变化。清炒和蜜炙所导致的甘草中生物碱变化有所差异［21］，炙甘草水煎液中发现含有补益作用的单糖存在［22］。有学者比较生、炙甘草水煎液指纹图谱，发现甘草经蜜炙后，HPLC共有峰只有20个，很多原有的共有峰消失［23］。还有结果显示在23min时炙甘草的色谱图中两个特征峰消失，但在30min时出现另一个新特征峰［24］。除甘草特征峰数量有变化外，色谱峰峰面积也有变化，清炒甘草中除6个色谱峰外其余色谱峰峰面积均小于炙甘草，说明炮制能够改变主要成分之间的比例［25］。
1．2炙法对无机微量元素的影响
刘利根等［26］测定生甘草、炙甘草和炒甘草水煎液中金属元素的含量，结果表明炙甘草煎出液中锌、铬、钙、钴、镁元素显著减少，铁元素显著上升，铜元素无显著变化，炒甘草煎出液中锌、铜元素则显著减少。
2炙甘草的药理作用研究
2．1镇咳平喘作用
甘草及其提取物具有镇咳、祛痰、平喘以及抗呼吸道病原体等作用。通过灌胃小鼠生甘草和炙甘草水煎液，观察浓氨水所致小鼠咳嗽，发现生、炙甘草均能够显著延长小鼠咳嗽潜伏期，减少咳嗽次数，但生甘草作用强于炙甘草［27］;给小鼠皮下注射酚红，观察甘草的祛痰作用，结果表明甘草炮制后祛痰作用明显减弱［28］。还有研究发现甘草黄酮呈剂量依赖方式抑制辣椒素引起的豚鼠咳嗽反射［29］。
2．2对回肠活动的作用
生甘草水煎液能使肠管自发性收缩活动的张力下降，节律存在，收缩幅度变小，同等量的蜜炙甘草和清炒甘草水煎液也有类似作用但无显著性差异。三种甘草水煎液对乙酰胆碱所引起的肠管收缩作用明显减弱，无明显差异［30］。
2．3抗心律失常作用
炙甘草对多种原因引起的心律失常均有良好的治疗作用。甘草总黄酮等是甘草抗心律失常的主要物质基础，能够拮抗乌头碱、哇巴因等药物引起的心律失常［31］，保护心肌收缩，具有明显的抗心肌缺血活性［32］。炙甘草对缺血再灌注、低钾、低镁等［33-36］引起的心律失常均有良好的治疗作用，能缩短BaCl2诱发大鼠心律失常的时间［37］，显著减慢心率，并随药量增加作用增强［38］。这可能与甘草蜜炙后，黄酮的质量分数略有增加有关。
2．4抗炎作用
甘草的抗炎成分为甘草酸、甘草次酸以及甘草黄酮类。通过比较免疫球蛋白E诱发的小鼠耳肿胀，证实炙甘草水煎液抗炎作用优于生甘草［39］。甘草查尔酮A对二甲苯引起的小鼠耳肿胀也有一定的抑制作用，可能是甘草抗炎作用物质基础之一［40］。Kim等［41］也证实炙甘草对TPA诱导的急性炎症和胶原诱导的关节炎小鼠的抗炎作用强于生甘草。异甘草素通过抑制巨噬细胞产生PEG2和IL-6发挥抗炎作用［42］。另有研究发现，甘草甜素能够抑制HMG1/2生理活性以及磷酸化作用的中断，这可能与甘草酸的抗炎作用相关［43］。
2．5镇痛作用
彭智聪等［44］通过热板法和醋酸扭体法实验观察甘草不同炮制品对小鼠痛阈的影响，结果显示炙甘草有显著的止痛作用。有报道，与生甘草相比炙甘草止痛效果非常显著，说明甘草经炮制后药效物质发生了变化，证明甘草蜜炙后缓急止痛作用增强［45］。同时，蜂蜜也有止痛功效，能与止痛药物起到协调作用。
2．6调节免疫作用
甘草蜜炙后有较强的提高免疫功能的作用。不同浓度甘草多糖对小鼠T细胞E2玫瑰花形成率的影响表明，小鼠接受甘草多糖注射液处理后，细胞免疫功能提高［46］。通过小鼠碳粒廓清法实验发现炙甘草对非特异性免疫功能的改善作用强于生甘草［27］。此外，孙付军等［47］通过比较小鼠碳粒廓清指数、计算肝、脾和胸腺等脏器指数、爬杆时间、负重游泳实验，得到相同结论。上述有关生甘草、炙甘草药理学作用差异的研究均与我国传统中医所记述的“生之则寒，炙之则温”“补中宜炙用，泻火宜生用”相符。可见甘草炮制后，药理作用有所不同。
3小结与展望
近年来对甘草已有深入的研究，无论是药材资源的开发还是临床研究，都取得了长足进展。但是，炙甘草的研究相对薄弱，尤其是炮制原理研究甚少。虽然众多研究表明蜜炙对甘草化学成分产生了显著影响，并证明甘草蜜炙后药理作用发生了显著变化，但与炮制功效变化相关的物质基础尚不清楚。因此，有必要利用现代分析技术，研究蜜炙对甘草中有效成分含量及其体内过程的影响，阐明炮制所致化学成分变化与药理作用之间的相关性，发现蜜炙功效变化的物质基础，阐明蜜炙机制;在此基础上，规范炙甘草炮制工艺，最终建立符合炙甘草特点的现代饮片标准。
作者：张玉龙 单位：上海交通大学药学院