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中药有毒成分检测分析

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摘要:目的:研究以关木通为代表的中药有毒成分和含量。方法:使用高效液相色谱仪对关木通以及其配伍中药的有毒成分进行测定,同时使用了马兜铃酸A对照品进行对比研究。结果:中药关木通以及其配伍生地、当归、大黄等中药材会产生一定的马兜铃酸A,这种有毒成分会对人体造成严重的伤害。结论:研究中药材的有毒成分可以为医疗用药提供科学的标准,不断提高中药治疗疾病的有效性,降低药物对患者的伤害程度。

关键词:中药 有毒成分 关木通

【中图分类号】R-3 【文献标识码】B 【文章编号】1008-1879(2012)12-0418-01

传统理论中西药对人体的毒性要大于中药,但是龙胆泻肝丸事件的发生让人们一度的怀疑中药毒性的高低程度,各大医疗研究机构也投入了更多人力物力来研究中药有毒成分。本文通过使用药材关木通及其配伍中药,在使用高效液相色谱法的基础上研究中药有毒成分。

1 中药有毒成分分析研究的现状

现阶段国内各医疗机构对中药复杂体系有毒成分的研究力度日益上升,为了准确、高效的得出分析结果,对定量分析方法的使用避免了定性分析方式的缺点,使得毛细管电泳法、高酸液相色谱法开始成为分析中药有毒成分的常用方式。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂。选择实验的试剂包括大黄、关木通、当归、甘草、生地,都是色谱专用试剂或分析纯试剂,使用型号为LC-10ATvp的高效液相色谱仪,试剂还包括实验所用的马兜铃酸A对照品。

2.2 色谱条件。选择实验填充剂时尽量使用标准的硅胶和十八烷基硅烷键;使用的流动相为甲醇溶液,甲醇和水的配比为35∶65,保持1.1mL/min的流速、12的进样量和28℃的柱温,使波长维持在285nm。

2.3 溶液的配备。将准备好的马兜铃酸A对照品作为做成浓度为0.029g/L的对照品溶液,放置备用。首先称取好重量为0.7g的关木通药材,使用烘干机和粉碎机将其进行烘干和粉碎,在规格为200mL的烧杯里放入关木通粉末,倒入125mL蒸馏水后进行煎煮,经过35min的煎煮后将溶液过滤,把过滤液放在烧杯里备用,继而在煎煮后残留药渣的烧杯里放入剂量为85mL的蒸馏水,对残渣进行35min的二次煎煮,同样将滤液征集起来,对两次煎煮的滤液进行浓缩至干。在最终浓缩干的烧杯中加入无水乙醇,将其放置在容量为10mL的容量瓶中,保证加入无水乙醇的量正好和刻度相平,在均匀溶解后放在实验冰箱里静置冷藏。等待第二天早上将容量瓶取出,将瓶内的上清液抽出,采取针头式的过滤器将上清液过滤好,把初次过滤的液体倒掉,使用二次过滤的上清液放入容量为1mL的塑料离心管中,并且标识为供试液1。对药材生地、大黄、当归、甘草溶液的配备方式和关木通的流程一样,它们分别标识为供试液2、3、4、5号。与此同时在关木通样品溶液中抽取出0.5mL,使用无水乙醇溶液对其进行稀释,放入5mL的容量瓶中,标识为6号供试液。

2.4 实验方法与结果。

(1)分析线性关系。抽取对照品溶液,从1mL—6mL递增,递增幅度为1mL,相继将这六份溶液注入实验所用的液相色谱仪中,根据色谱条件来进行准确的检验,0.06~0.41g是马兜铃酸A的线性活动空间,维持相关系数r为0.992,分析发现进样量和峰面积之间的线性关系正常,校正曲线显示为Y=4.9×106X-34001。

(2)检测精密度。在6号供试液中吸取12μl的剂量,经过5次的试验来获得对照品马兜铃酸A的峰面积,计算出0.32%的RSD,该试验仪器的精密度完全符合实验标准。

(3)研究稳定性。在6号供试液中吸取12μl的剂量,在前8h内每隔2h测定一次,测定4次后在24h后进行第5次测试,最后得到RSD的值为1.49%,数据显示样品在8h内的稳定性符合试验标准。

(4)获得加样回收率。在样品中称取6份重量0.35g的关木通粉末,分别往里面加入同等剂量(7mL)的马兜铃酸A对照品备用液,在2.3项中溶液制备流程的指导下完成供试液的制取,在制备液中分别移取出0.2mL,使用无水乙醇溶液进行稀释,在容量瓶中进行摇匀静置,保持刻度为1mL,吸取12μl为进样品,计算峰面积,最终得出的加样回收率为98.87±0.71。

(5)测定样品。在1-5号供试液中移取相同剂量的液体,按照标准的色谱条件进行测定,结果如表1所示。

关木通+大黄0.60180.60436.36224106731.502 关木通及其配伍中药马兜铃酸A的测定结果显示,当有毒成分马兜铃酸A和当归、甘草等药材进行配伍后有毒含量会出现一定的减少。

3 讨论

药材关木通在医疗上经常运用在肾病治疗的案例上,但是近些年来发生的患者服用关木通类药物中毒事件导致《中国药典》将其取消的结果。经过科学研究显示,关木通本身含有一种马兜铃酸A的有毒成分,患者服用后可以导致很强的肾毒性,严重者会致死。为了分析关木通的毒性机制,深入研究关木通及其配伍中药的有毒成分很有必要,引导大众了解中药的毒副作用,为患者健康提供保障。

参考文献

[1]姚新生.中药活性成分研究与中药现代化[J].中药新药与临床药理,2003,14(2):73-75