T细胞斑点试验检测在肺外结核诊断中的应用价值

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[摘要]目的 探讨肺外结核应用T细胞斑点试验检测的诊断价值。方法 选取我院2013年1月～2016年8月收治的200例疑似肺外结核患者作为研究对象，所有患者均接受结核抗体检测、T细胞斑点试验，以临床确诊结果作为对照，计算并比较结核抗体检测、T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度。结果 T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度分别为96.45%、93.55%、96.00%，与结核抗体检测的诊断灵敏度（53.85%）、特异度（64.52%）、准确度（55.50%）比较，差异有统计学意义（P

[关键词]肺外结核；诊断；T细胞斑点试验

[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）02（c）-0123-03

Application value of T cell spot test in the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis

GONG Mi1 LU Ying2

1.Hepatology Institute，the Third People′s Hospital of Shenzhen City，Shenzhen 518040，China；2.Department of Clinical Laboratory，the 401st Hospital of PLA，Shandong Province，Qingdao 266071，China

[Abstract]Objective To discuss the diagnostic value of T cell spot test in the diagnosis of pulmonary tuberculosis.Methods 200 cases of suspected pulmonary tuberculosis from January 2013 to August 2016 in our hospital were selected as the object of study review，all patients were detected by T cell spot test and tuberculosis antibody detection，clinical diagnosis result was set as reference，the diagnostic sensitivity，specificity and accuracy of extrapulmonary tuberculosis were calculated and compared between tuberculosis antibody and T cell spot test.Results The diagnostic sensitivity，specificity and accuracy of T cells spot test in extrapulmonary tuberculosis were 96.45%，93.55% and 96.00%，and compared with the sensitivity （53.85%），specificity （64.52%） and accuracy （55.50%） in the diagnosis of tuberculosis antibody detection，the difference was statistically significant（P

[Key words]Pulmonary tuberculosis；Diagnosis；T cell spot testY核病属于临床上最为常见的慢性传染病之一，肺外结核主要是指发生在肺外的结核病变的统称，包括淋巴结核、结核性脑膜炎、结核性腹膜炎等多种类型，其起病较为隐匿，加上发生在肺外部位，临床症状不典型，在临床诊断过程中容易出现漏诊和误诊，对患者的病情控制较为不利[1-2]，因此，临床上应积极寻求对肺外结核可准确、快速诊断的方法。T细胞斑点试验（T-spot.TB试验）是近年来应用于结核病诊断中的一种新型检测手段，本研究对我院的疑似肺外结核患者进行回顾性研究，对其诊断资料进行分析，旨在探讨T细胞斑点试验对肺外结核的诊断价值，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取我院2013年1月～2016年8月收治的200例临床症状疑似肺外结核患者作为研究对象，其中男性125例，女性75例；年龄8～79岁，平均（41.05±16.81）岁。经痰涂片结核杆菌培养、X线胸片、实验室检查，最终确诊为肺外结核的患者共有169例，包括58例淋巴结核、41例结核性胸膜炎、39例结核性腹膜炎、31例结核性脑膜炎。所有患者的临床资料（包括诊断资料）均保存完整，未出现缺失。

1.2方法

所有患者均接受结核抗体检测、T细胞斑点试验，其中，结核抗体检测主要是对血清标本中的38 kD-IgG进行测定，采集患者的清晨空腹静脉血液作为标本，以3500 r/min的速度进行离心处理，取血清，采用结核分枝杆菌抗体胶体金检测试剂盒进行检测，检测步骤严格按照试剂盒说明进行操作，如采用葡萄球菌A蛋白胶体金缀合物标记后，结核IgG显示为红色即为阳性；T细胞斑点试验主要是对外周血抗凝全血中的结核特异抗原活化效应T细胞进行测定；采集患者的外周静脉血液5 ml置于肝素抗凝管中，采用密度梯度离心法对血液标本中的单个核细胞进行分离，采用T-spot.TB试剂盒，分别在4个孔中加入阴性对照、阳性对照、抗原A、抗原B，再分别加入单个核细胞进行孵育，16～20 h后进行PBS洗涤，再分别加入抗干扰素抗体进行2 h孵育，PBS洗涤，显色，对斑点数进行计算，如阴性对照孔内斑点数为0～5个且抗原A和抗原B孔内斑点数超出阴性对照≥7个，或阴性对照孔内斑点数>5个且抗原A和抗原B孔内斑点数至少为阴性对照孔的2倍，即可判定为阳性[3]。

1.3观察指标

对两种检测方法的诊断结果进行分析，以临床确诊结果作为对照，计算并比较结核抗体检测、T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度，其中，灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性），特异度=真阴性/（真阴性+假阳性），准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数；计算结核抗体检测、T细胞斑点试验与肺外结核临床确诊结果之间的一致性。

1.4统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行分析，计数资料以百分数表示，采用χ2检验，诊断结果之间采用Kappa一致性检验，Kappa0.7表示一致性良好，以P

2结果

2.1结核抗体检测、T细胞斑点试验对肺外结核诊断结果的比较

T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度分别为96.45%、93.55%、96.00%，与结核抗体检测的诊断灵敏度（53.85%）、特异度（64.52%）、准确度（55.50%）比较，差异有y计学意义（P

2.2结核抗体检测、T细胞斑点试验与肺外结核临床确诊结果之间的一致性分析

T细胞斑点试验诊断肺外结核的结果与临床确诊结果之间的一致性Kappa=0.725，而结核抗体检测与临床确诊结果之间的一致性Kappa=0.435。

3讨论

结核病是临床上十分常见的一种慢性传染病，主要由结核分枝杆菌感染所致，病变多位于肺内，同时，也可累及全身各个系统和器官，临床上根据结核病患者的病灶分布位置，将结核病分为肺结核、肺外结核[4-6]。肺外结核主要包括淋巴结核、结核性胸膜炎、结核性腹膜炎、结核性脑膜炎等，其起病相对较为隐匿，发病时由于分布位置的区别，存在不同的临床症状，且症状不具有典型性，导致肺外结核容易被误诊为其他病变，耽误患者治疗结核病的最佳时机，治疗效果欠佳，对患者病情控制十分不利[7-8]，因此，临床上应对肺外结核的早期诊断方法进行积极研究和探讨。

目前，临床上诊断肺外结核的方法主要为痰涂片结核杆菌培养，但由于痰涂片结核杆菌培养的灵敏度较低，对结核分枝杆菌的检出率较低，无法对活菌、死菌以及非结核分枝杆菌进行区分，往往需要结合临床病史、影像学检查、实验室检查进行综合诊断，部分患者由于缺乏警惕性，其病史收集并不全面，诊断较为困难，同时，痰涂片结核杆菌培养所需时间较长，不利于及时对患者进行诊断[9-10]。结核抗体检测是肺外结核的常用血清学检测手段，主要是利用38 kD抗原对结核IgG抗体进行检测，但在发病早期对肺外结核进行诊断，容易出现漏诊，导致部分肺外结核患者未能得到及时的治疗，以至于病情恶化，引发严重后果[11]。

T细胞斑点试验是一种新型的结核分枝杆菌感染检测方法，可对外周血中单个核细胞受到抗原刺激后释放的细胞因子进行有效检测，从而对患者机体内是否存在结核分枝杆菌感染进行判断，是当前临床诊断结核分枝杆菌感染最灵敏的一种方法[12-13]。T细胞斑点试验可在结核分枝杆菌感染早期阶段对结核特异抗原活化效应T细胞进行测定，灵敏度较高，可对肺外结核病变情况予以灵敏反映，减少漏诊，且检测耗时相对较短，通常在24 h内可得到检测结果，有利于对患者病情做出快速诊断，使患者尽早得到较为明确的诊断结果，并及时实施有效治疗，避免病情恶化[14-15]。本研究结果显示，T细胞斑点试验对肺外结核的诊断灵敏度、特异度、准确度分别为96.45%、93.55%、96.00%，均高于结核抗体检测结果（P

综上所述，采用T细胞斑点试验可对肺外结核完成快速、准确的诊断，在肺外结核诊断中具有显著的诊断价值，可作为肺外结核的重要辅助诊断方法。

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（收稿日期：2017-01-18 本文编辑：祁海文）