地格达汤的药敏试验
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摘要：文章目的在于寻找治疗奶牛炎的绿色天然药物，保障奶牛养殖业可持续发展，保证乳制品安全。其主要内容是采用微生物分离方法分离出炎致病菌后，通过药敏纸片扩散方法，对地格达汤作药敏试验。本次研究的主要结论如下：地格达汤（蒙药方剂）对分离出的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、无乳链球菌、双球菌、大肠杆菌高度敏感，对腐败梭菌中度敏感。敏感性从强到弱依次为金黄色葡萄球菌、双球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌、腐败梭菌。
关键词：奶牛；炎；地格达汤；药敏试验
中图分类号：R29 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2013）-01-0064-2
1 试验材料
1.1 试验材料
1.1.1 仪器与设备 烘干箱、恒温箱、生化培养箱、电子天平、酸度计、显微镜、载玻片、平皿、试管、试管架、安全柜、无菌室、酒精灯、接种环、石蜡油、75%酒精棉球、5%碘酒棉球、采样管、CMT检验试剂、及试剂。打孔器（Ф6.00mm）、电子天平和其他实验室常规仪器与工具。
1.1.2 药品 蒙药方剂：地格达汤。
蒙药材：泡章-乌布斯（地丁）、巴嘎巴盖-其其格（蒲公英）、都日布勒吉-乌布斯（益母草）、哈敦-斯日给勒格（败酱草）、西茹音-温吉勒嘎（地皮骨）、吉茹戈巴（薄荷）、西黑日-乌布斯（甘草）、汗-铁木尔（防风）、皂角刺。
1.1.3 培养剂及生化反应试剂 培养剂：营养琼脂、麦康凯培养基、三糖铁培养基、尹红美兰培养基、营养肉汤、Hugih―Leisfon0/F培养基、高盐甘露醇培养基、DNAes培养基、55―琼脂、VP半固体琼脂、明胶培养基、硝酸盐蛋白脉水培养基、甲苯胺蓝核酸琼脂。
生化反应试剂：O压发酵试管、甘露醇、葡萄糖发酵试管、胆汁溶菌试管、马尿酸钠水解试管、氧化酶试管、脉酶试管、DNA酶试验、七叶营发酵试管、麦芽糖和蔗糖等。
1.1.4 供试奶样 从诊断出的临床性炎奶牛中根据不同症状采集了98份奶样，非临床性炎奶牛中随机采集了68份奶样，共采集了166份奶样。
1.1.5 试验动物 荷斯坦奶牛。
2 试验方法
2.1 奶牛炎病原菌的分离步骤
准备工作――初步培养――分离培养――初步鉴定――进一步鉴定――鉴别致病性――生化鉴定。
2.2 地格达汤的药敏实验步骤
2.2.1 地格达汤提取物的制备 将地格达汤及其各成分各称取5g，用水蒸馏浸泡1h后，加蒸馏水至中蒙药材及方剂完全浸没，置于电炉上武火煮沸，沸腾时开始计时，文火煎熬30min，后倒出药汁，再加水同样煮沸1次，将两次的煎液混到一起，用纱布过滤后，制成含药量为1g/ml的煎剂，放入4℃冰箱保存待用。
2.2.2 菌种的培养及稀释 先分离致病菌再接种肉汤培养基中37度24小时培养，然后对培养好的细菌用无菌生理盐水5*102稀释备用。
2.2.3 营养培养基制备 将营养培养基和鉴别培养基分别称取置入三角瓶内完全融化后，在高压锅内进行高压灭菌（121℃ 20 min），然后在超净工作台内通过无菌操作方法倒入平皿中备用。
2.2.4 蒙药方剂药敏片的制备 先将滤纸用打孔机打成直径为6mm的小圆片，根据需要将50或100片滤纸包成一纸包后放入带绵塞的试管后置入烘干箱里（126℃ 2h）烘干备用。
药液的配制：蒙药提取液稀释成1：1后烘干的滤纸片上滴加吸收恒温箱里干燥备用。
2.2.5 蒙药方剂药敏试验 根据药物纸片琼脂扩散法，将稀释好的各类菌液，分别均匀涂到对应培养基上培养。将制备好的蒙药方剂药敏片分别贴在涂各类菌液的培养基上，并做好标记后置37℃恒温培养18h～24h。然后取出用卡尺测量抑菌圈的直径（包括药敏纸片直径）。如有生长缓慢的细菌，在37℃恒温箱中培养3～6d。
结果判断标准：如抑菌圈直径0～5mm，该细菌已产生耐药性或药敏片无作用；如抑菌圈直径6～9mm为低度敏感；10～15mm为中度敏感；16mm以上为高度敏感。
3 试验结果
3.1 病原菌分离试验结果
3.2 蒙药方剂及抗生素试验结果
4 结果分析
地格达汤对分离出的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、无乳链球菌、双球菌、大肠杆菌高度敏感，对腐败梭菌中度敏感。敏感性从强到弱依次为金黄色葡萄球菌、双球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌、腐败梭菌。
参考文献
[1] 唐淑珍等.利用体细胞计数监控炎[J].中国奶牛，1999，4：45-46.
[2] 李国江，邹风驰.奶牛隐性炎的检测与评估[J].中国奶业，1998，3：16-172007，（7）：69.
[3] 陈立志，金哲浩.吉林地区奶牛炎常见病原菌的分离及药敏试验的应用.
[4] 王新，张秀英.9种蒙药抗炎作用的实验观察[J].中国兽医杂志，2005，41（1）：35-36.
[5] 宁红梅.吴刚.张丽萍蒙药地格达汤的微量元素分析.中国民族医药杂志，2004.
作者简介：迎春（1975-），女，内蒙古锡林郭勒职业学院讲师，从事兽医专业专任教师工作。