RhD红细胞阴性确认与临床输血的关联

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摘要：目的 研究分析rhd红细胞阴性确认实验结果，探讨RhD抗原在临床输血工作中的重要意义。方法 血站检测实验室217例无偿献血者初筛为阴性的标本用盐水介质法进行复初筛，对复初筛为阴性的标本采用间接抗球蛋白试验检测出弱D和部分D表型。结果 217例初筛阴性的标本检出212例为RhD（-）（97.70%） ，5例确定为弱D或部分D型（2.30%）。结论 RhD抗原呈复杂变异性，RhD红细胞阴性确认与防范输血风险，避免由RhD抗原引起的溶血性输血反应息息相关。

关键词：RhD红细胞阴性 确认实验结果分析 临床输血

Abstract：Objective Research and analysis the results of confirming RhD negative red blood cells，toexplore the significance of RhD antigent in clinical transfusion. Methods By using saline medium method to experiment 217 RhD negative samples from blood donors in blood testing Laboratory again，then by indirect antiglobulin test to detect weak and part D. Results 212 of 217 samples were RhD negative（97.70%），and 5 samples were identified as weak D or part D（2.30%）. Conclusion RhD antigens is complicated and also with a variation of characteristics， the confirm of RhD negative red blood cells and to pvevent the risk of blood transfusion are associated with the hemolytic transfusion reaction which caused by RhD antigen.

Key words：RhD negative red blood cells；Experimental results confirm analysis；Clinical transfusion

Rh血型系统是最复杂和多态的红细胞血型系统，临床输血重要性仅次于ABO血型系统，D抗原是Rh血型系统中50个不同血型抗原[1-2]中免疫原性最强的一个血型抗原，常能引起溶血性输血反应和新生儿溶血症（HDN）而备受关注。D抗原在不同类型红细胞上表达的强度不均一，表型分为RhD（+）、RhD（-）、弱D、部分D和Del，献血者RhD阴性确认试验采用经典间接抗人球蛋白实验（IAT）技术，IAT检测为阴性则判定为RhD（-），检测为阳性则判定为RhD（+）、弱D、部分D型[3]。其中弱D、部分D型对献血者个体判定为RhD（+），对受血者个体则判定为RhD（-）；血站对每一位初筛为RhD阴性的供血者都要作RhD阴性确认，2011～2014年共检测初筛RhD阴性217例，其中5例为弱D、部分D型，确认为RhD（+）；212例确认为RhD（-）。本站在稀有血型临床供应上做到有求必应，很好满足了临床需求，受到社会和临床的一致好评，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料 广元市中心血站2011年1月～2014年12月217例血液检测试验室RhD初筛为阴性的献血者标本。

1.2仪器和试剂

1.2.1仪器 血型专用离心机，恒温水浴箱。

1.2.2试剂

1.2.2.1盐水法抗-D（IgM或IgM+IgG）单克隆试剂[北京金豪医药有限公司，批号：2011093028、2013053011等；上海血液生物医药有限责任公司，批号：20101018、20120420、20130306等）；Millipore（UK）Ltd（IgM+IgG）（上海：密理博贸易有限公司，批号：BMJ1204C等]。

1.2.2.2 IAT法抗-D（IgG）单克隆试剂[上海血液生物医药有限责任公司，批号：20101022、20111212、20120823、20130301、20140303等；Millipore（UK）Ltd（IgM+IgG）（上海：密理博贸易有限公司，批号：BMJ1204C等）；抗人球蛋白试剂（多特异性抗-IgG+C3d）上海血液生物有限责任公司，批号：20100818、20110328、20130418、20140424等]。

1.3 RhD阴性确认 先用盐水凝集法用4种不同批号或生产厂家的单克隆抗-D（IgM或IgM+IgG）进行初筛，再用4种不同批号或生产厂家的单克隆抗-D（IgG或IgM+IgG）采用IAT法检测RhD抗原。

2结果

2.1盐水凝集法（复初筛） 217例初筛阴性的标本经4批不同批号或生产厂家的单克隆抗-D初筛均为阴性。

2.2 IAT法 对上述217例复初筛为阴性的标本采用IAT法检测，212例结果报告为RhD（-），5例确定为弱D或部分D型，结果报告为RhD（+）。

3讨论

3.1 RhD红细胞阴性确认一般须首先通过抗-D（IgM或IgM+IgG）进行初筛，然后对初筛为阴性的标本通过经典IAT法进行确认。其中，1种或1种以上试剂结果为阳性则表明受检红细胞为弱D、部分D型，则该献血者为RhD（+）；结果全为阴性，该献血者为RhD（-）[4]。

3.2在常规血清学初筛（盐水IgM或IgM+IgG）RhD阴性献血者个体中，除了存在真正Rh阴性外，还有D变异体（包括弱D、部分D、Del型）。弱D、部分D与IgM抗-D呈弱反应或阴性，需IgG抗-D IAT法才能检出，但无法区分。弱D、部分D型红细胞抗原性远比正常D的抗原性弱，但具有免疫原性，若将之输给RhD阴性受血者，有可能免疫受血者，使之产生抗-D；输入已有抗-D的受血者，输入红细胞会被加速破坏，从而引起溶血性输血反应。所以对弱D或部分D抗原的检测十分必要，弱D或部分D型个体作为献血者，其血液应视为RhD（+）血液。Del型是1种变异极弱的RhD（+）血型，其极弱的D抗原只能通过敏感的吸收放散试验才可检测出。Del型D抗原表达量极弱，但仍具有一定的免疫原性，可免疫RhD（-）个体[5]，在RhD（-）人群的中国汉族个体中，大约有20%～30%为Del型，所占比例很高[6]。虽然血站系统弱D、部分D型可通过经典IAT法可检出，但不能排除RhD阴性献血者中的Del型，Del表型个体作为RhD（-）献血者，可能会带来一定的安全隐患，值得血站每位血型工作者探讨和重视。随着血型检测手段不断提升，可采用基因分型技术检测Del型献血者，来降低RhD（-）受血者发生同种免疫反应风险。

3.3在临床输血工作中，以输血为目的常规检测不必要使用高效IgM单克隆抗-D试剂检测除极弱反应外的所有D抗原以及对明显为D阴性的标本作确认试验，否则会有不必要的风险，对于受血者RhD抗原初筛试验阴性，RhD抗原结果难以判定或/和先前鉴定不符，均应按RhD（-）血型处理。输注红细胞时，无论有无抗-D，都应首选ABO血型与受血者同型RhD（-）红细胞；RhD（-）且无抗-D的受血者，在血液短缺紧急抢救情况下，可根据"血液相容性输注"原则，须在与受血者主侧交叉配血阴性情况下，首选与受血者ABO血型相容RhD（-）红细胞，次选与受血者ABO同型RhD（+）红细胞，三选O型RhD（+）红细胞输注。输注血浆时，与受血者ABO血型同型的RhD（-）、RhD（+）血浆均可，无法满足可选择AB型RhD（-）和RhD（+）血浆，同时建议对RhD（-）血浆做抗-D筛查。输注血小板时，首选与受血者ABO/RhD血型同型血小板输注；紧急抢救受血者血小板供应短缺时，可输注RhD（+）血小板，应向受血者及其家属告知输注RhD（+）供者血小板后可能被其中残留的红细胞免疫产生抗-D，尤其是生育期妇女（女童受血者成年后）可能发生流产、死胎、新生儿溶血病等风险，对无抗-D的上述受血者可尽快注射抗-D免疫球蛋白来预防抗体产生[7]。

参考文献：

[1]Xu Q，，Zhang J，Wang Q， et al，RHD gane polymorphism among RHD-negative Han Chinese[J].Chin med J，2003（116）：1539-1543.

[2]Dawoud M，Shubair ME，Sharif FA. RHD gene polymorphism a-mong Palestinians of Gaza Strip[J].Ann Alquds Med，2009（5）：18-27.

[3]谢俊杰，邵超鹏.Rh血型D放散型（Del）[J].中国输血杂志，2011，24（1）：3-7.

[4]叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006.

[5]Wagner T，Kǒrmǒczi GF，Buchta C，et al.Anti-D immunization by DEL red blood cells[J].Transfusion，2005，45（4）：520-526.

[6]陆松松，陈静娴.Rh（D）变异体的研究进展[J].临床输血与检验，2010，12（4）：374-376.

[7]中国医师协会输血科医师分会 中华医学会临床输血学分会.特殊情况紧急抢救输血推荐方案[J].中国输血杂志，2014，27（1）：1-3.编辑/张燕