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盐霉素发酵工艺优化分析

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摘 要:盐霉素是一种抗生素,这种抗生素不仅对病菌有很好的消灭作用,而且抗生素本身毒性比较低,对动物产生的影响比较小,是现在发展较好的兽药之一。而且盐霉素在生产过程中使用的原料比较简单,生产工艺也不复杂,极易生产的一种兽药,所以本篇文章就对盐霉素的发酵工艺进行研究,提出其生产过程中的优化措施,促进盐霉素生产。

关键词:盐霉素;发酵工艺;优化

盐霉素是一种比较稳定的抗生素,对很多病菌具有很高的杀灭作用,其使用方法可以同过添加道动物的饲料当中,能够有效提高其利用率,盐霉素的使用不但能够杀菌,还能促进动物生长。盐霉素在发酵过程中,需要对其进行优化,这样才能保障盐霉素的质量。

一、对盐霉素进行试验

试验步骤大致就是首先选择合适的培养管,然后将盐霉素进行斜面培养,得到盐霉素母体,再对母体进行培养,进行发酵处理,最后将培养出来的盐霉素进行提取。对盐霉素试验时,在25ml的培养基上进行培养盐霉素母体,一般培养的温度大概是33℃。对盐霉素进行发酵培养时,一定要注意空气流通,还要保证培养基的压强,在培养过程中要注意甘油的补充[1]。最后对培养效果进行测定。测定的方法有六种,分别是还原糖测定法、氨基氮测定法、菌丝浓度测定法、pH浓度测定法、溶氧浓度测定法和发酵效价测定法。这几种测定方法适用的环境不同,应该根据不同的方法选择合适的方法进行测定。

二、测定结果分析

1、温度对盐霉素发酵的影响

温度对盐霉素发酵会产生一定影响,因为温度的高低会影响生物酶的活性,进而影响菌体的生长速度。在实验时,将菌体放入不同温度环境中进行培养,可以发现,不同温度情况下盐霉素发酵水平不同,33℃时盐霉素发酵效价最大,表明在33℃时,盐霉素发酵情况最好。

2、溶氧浓度对盐霉素发酵的影响

对盐霉素进行发酵培养时,还要对发酵液浓度进行调整,因为盐霉素发酵过程中需要氧气,而发酵液浓度对氧气含量又有直接影响,所以调节培养液浓度就是调节含氧浓度[2]。通过调整,将盐霉素菌种放入阶梯氧气含量的培养液中进行培养,实验表明,氧气浓度在40%及以上,盐霉素发酵情况比较好,比较有利于盐霉素培养。

3、不同碳源及用量对盐霉素发酵的影响

碳源对盐霉素的影响也是比较大,在实验中,使用葡萄糖、这蔗糖、淀粉对其进行测试,实验表明,使用蔗糖时,盐霉素的发酵效价最好,但是蔗糖的用量一定要控制好,在15g/L时,是盐霉素最好的发酵环境。

4、不同氮源对盐霉素发酵的影响

不同氮源对盐霉素发酵的影响也是不相同的,所以本篇文章还对不同氮源对盐霉素的影响进行分析,在实验过程中,选用黄豆粉、黄豆饼粉和花生饼粉进行对比试验,然后将对比试验所用的材料划分成不同浓度,最后由实验结果得出,黄豆粉作为有机氮源时,盐霉素发酵的比较好,并且氮源的浓度在40g/L时。在实验过程中,还对硫酸铵进行对比试验,在实验时,硫酸铵的浓度应该和黄豆粉的浓度相同,这样才能起到对比作用。通过实验可以发现,硫酸铵的浓度在1.5g/L时,盐霉素发酵情况比较好,能够最大程度上使盐霉素母体进行繁育。

5、无机盐对盐霉素发酵的影响

钾离子对生物细胞膜的通透性具有很大影响,所以将不同浓度的磷酸二氢钾对盐霉素进行试验,磷酸二氢钾的浓度在0.3到1.8之间依照梯度进行排列,最后得出试验结论,磷酸二氢钾浓度在1.3左右时,盐霉素能够发酵的比较好[3]。同时还研究氯化铁对盐霉素的影响,因为铁离子能够组成细胞色素和其他酶的重要组成,细胞的存在离不开铁离子,在实验时,将铁离子从0.02到0.1进行梯度排列,依次对盐霉素进行培养,培养的结果就是铁离子浓度低于0.04时,盐霉素发酵较为缓慢,当铁离子浓度超过0.06时,盐霉素的发酵又会受到抑制,因此。盐霉素发酵时,铁离子的最佳浓度是0.05左右,这样盐霉素的发酵最为迅速,效率也最大。

6、甘油对盐霉素发酵的影响

甘油是盐霉素分子重要的组成部分,因为甘油能够影响盐霉素分子的新陈代谢速度,所以在实验时选用不同浓度的甘油对盐霉素进行培养,甘油的浓度从2.0到6.0梯度排列。然后将盐霉素放入不同浓度的甘油中进行培养,得到的实验结果就是甘油浓度低于3.5g/L时,盐霉素发酵速度较慢,等甘油浓度超过5.0之后,盐霉素的发酵就会受到限制,因此甘油浓度3.5-5.0g/L时,是盐霉素发酵的最佳浓度。

三、测定总结:

环境对盐霉素发酵有很大的影响作用,环境温度、培养液的含氧情况、有机碳源和氨源、无机盐浓度以及甘油浓度都会对盐霉素造成影响,因此在培养时一定要注意盐霉素的培养环境[4]。盐霉素在培养时,某些盐霉素在发酵时会产生残留的还原糖,指标不明确时就添加甘油,这样就会导致盐霉素不缺乏油的时候添加甘油,从而导致盐霉素发酵受到影响。环境温度要保持在33℃左右,这样最有利于盐霉素的发酵。含氧情况应该在40%以上,碳源和氨源都应在15g/L左右,无机盐的浓度应该在1.3g/L左右较为适宜,只有将盐霉素培养环境进行优化,盐霉素的发酵才能更加顺利的进行。

结束语:

盐霉素对各种球虫有很好的清除作用,而且盐霉素的使用不会使病菌产生抗药性,对动物使用盐霉素之后,残留的药物能够很快在体内排出来,这样能够有效较低药物的残留。盐霉素对动物的腹泻有奇效,最重要的是还能够促进动物生长,提高动物家禽的成活率。实验证明盐霉素能够杀死小白鼠的乳腺癌干细胞,并且还能对癌细胞产生抑制作用,同时还能减缓已经存在的肿瘤的生长速度,对治疗癌症也有很好的效果。但是国内盐霉素的发酵工艺还存在弊端,只有将盐霉素发酵工艺不断优化,盐霉素才会发挥更大的作用。

参考文献

[1] 张鹏伟. 盐霉素发酵过程优化与放大研究[D].华东理工大学,2010.

[2] 张鹏伟,储消和,郭美锦,储炬,庄英萍,张嗣良. 响应面设计优化盐霉素发酵条件[J]. 中国抗生素杂志,2010,02:96-99.

[3] 蒋顺进,汤晓林. 盐霉素发酵工艺的优化研究[J]. 今日药学,2010,10:23-25.

[4] 刘朋. 盐霉素菌种选育和补油发酵工艺的优化[D].华东理工大学,2011.