桑白皮总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用

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[摘要] 目的 研究桑白皮总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用。 方法 采用常规急性肝损伤模型，测定桑白皮总黄酮对小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性和天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性。 结果 桑白皮总黄酮可明显降低四氯化碳（CCl4）（P

[关键词] 桑白皮总黄酮；肝损伤；保肝作用；丙氨酸氨基转移酶；天冬氨酸氨基转移酶

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）12（c）-0028-02

桑白皮（Cortex mori）为桑科落叶灌木或小乔木植物（Morus alba L.MAL）除去粗皮的干燥根皮。桑白皮始载于《神农本草经》，列为中品。现代研究表明，桑白皮中主要含有黄酮类化合物、香豆素类、苯骈呋喃衍生物、多糖类、甾体和萜类、挥发油等多种成分[1]。桑白皮具有泻肺平喘，利水消肿等功效[2]，提取物具有耐缺氧，降低血糖、血脂，抗炎镇痛，抗过敏，舒血管，平喘、利尿的作用[3-15]。现报道桑白皮总黄酮（total flavonoid of Cortex mori，TFCM）对小鼠急性肝损伤的保护作用。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

总黄酮的提取：称取桑白皮200 g，粉碎，加入乙醚500 ml，浸泡4 h。过滤得浸出液，滤渣再次加入同样体积乙醚，重复操作2次，回收乙醚。滤渣加入50%乙醇600 ml，超声萃取30 min，控温在50℃。过滤，滤渣再用600 ml 50%乙醇超声萃取，重复操作2次，以上滤液95℃水浴蒸干得TFCM，冰箱保藏备用。

实验时加数滴吐温-80，用生理盐水配成至所需浓度备用。四氯化碳（CCl4）（上海长江化工厂，批号2004003）；硫代乙酰胺（TAA）（陶湾化工厂，批号20081219）；对乙酰氨基酚[汕头金石制药总厂批号200040304，商品名：扑热息痛（AAP）]。

1.2 动物分组与实验方法

健康成年昆明种小鼠（由江西中医学院实验动物中心提供）每组50只，雌雄各半，体重18～22 g。将每组小鼠随机分为5组[16-18]。①TFCM对CCl4致小鼠肝损伤的影响：给药组即小剂量、中剂量和大剂量TFCM组腹腔注射0.5、1.0、2.0 mg/（kg·d）TFCM，连续给药10 d，末次给药1 h后，给药组和CCl4组按10 ml/kg腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液，花生油（对照）组腹腔注射同体积的花生油溶液，禁食16 h后，摘眼球取血，分离血清，测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性；②TFCM对AAP致小鼠肝损伤的影响：给药组即小剂量、中剂量和大剂量TFCM组腹腔注射0.5、1.0、2.0 mg/（kg·d）TFCM，连续给药10 d，末次给药24 h后，给药组和AAP组按150 mg/kg腹腔注射AAP溶液，对照组腹腔注射同体积的生理盐水，禁食16 h后，摘眼球取血，分离血清，测定ALT和AST的活性；③TFCM对TAA致小鼠肝损伤的影响：给药组即小剂量、中剂量和大剂量TFCM组腹腔注射0.5、1.0、2.0 mg/（kg·d）TFCM，连续给药10 d，末次给药1 h后，给药组和TAA组按50 mg/kg腹腔注射TAA溶液，对照组腹腔注射同体积的生理盐水，禁食16 h后，摘眼球取血，分离血清，测定ALT和AST的活性。

1.3 仪器

7060型全自动生化仪（日本产日立）。

1.4 统计学方法

应用SPSS 13.0统计软件处理数据，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，以P

2 结果

2.1 TFCM对CCl4致小鼠肝损伤的影响

0.5、1.0、2.0 mg/（kg·d）TFCM能显著降低CCl4致血清ALT和AST的活性（表1）。

表1 TFCM对CCl4致小鼠肝损伤的影响（x±s，n=10）

与CCl4组比较，*P

2.2 TFCM对AAP致小鼠肝损伤的影响

1.0、2.0 mg/（kg·d）TFCM可明显降低AAP致小鼠肝损伤血清ALT和AST的活性（表2）。

表2 TFCM对AAP致小鼠肝损伤的影响（x±s，n=10）

与AAP组比较，*P

2.3 TFCM对TAA致小鼠肝损伤的影响

TFCM对TAA致小鼠血清ALT和AST的活性无影响（表3）。

表3 TFCM对TAA致小鼠肝损伤的影响（x±s，n=10）

与TAA组比较，*P>0.05

3 讨论

一般认为，CCl4损伤肝组织的机制是CCl4经肝微粒体细胞色素P450代谢激活后生成自由基三氯甲基（·CCl3），·CCl3可攻击肝细胞膜上磷脂分子引起脂质过氧化，破坏肝细胞膜结构和功能的完整，使蛋白质等物质合成代谢发生障碍。而TAA损伤肝细胞的机制可能是直接损害肝细胞膜结构和功能。AAP是经肝微粒体细胞色素P450代谢后，产成的半醌自由基过多，半醌自由基使肝内还原型谷胱甘肽（SGH）消耗，并与肝细胞蛋白质进行共价结合，引起肝细胞坏死。因此CCl4、AAP、TAA损伤肝脏的生化机制不同。当肝损伤时，细胞通透性增高，血清中ALT、AST增加，且ALT、AST活性的高低变化与肝损伤的程度相一致，因此，测定血清中的ALT、AST是肝损伤的主要指标。本研究采用CCl4、AAP、TAA诱导损伤肝脏，测定血清中的ALT、AST的活性来研究TFCM对小鼠急性肝损伤的保护作用，结果提示，TFCM对CCl4、AAP所诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST活性明显降低（P

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（收稿日期：2013-10-28 本文编辑：郭静娟）