普济拔毒膏体外抗菌活性的观察

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摘要：目的 观察普济拔毒膏对常见致病菌的体外抗菌活性，初步判定其体外抗菌谱。方法 精密称取普济拔毒膏1000mg，使用10ml DMSO将药物溶解，使其终浓度为100mg/ml，备用。采用琼脂扩散法（打孔法） 观察其对大肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌及化脓性链球菌的体外抗菌活性，同时设置DMSO阴性对照组、热毒宁阳性对照组。 结果 普济拔毒膏体外对大肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌及链球菌具有明显的抗菌活性。结论 体外抗感染是普济拔毒膏治疗疮疡火毒的重要机理之一。

关键词：普济拔毒膏；体外；抗菌活性

普济拔毒膏为王楼五官科门诊部许永贵医师祖传外用秘方，临床常将其制备成黑膏药使用，具有清热解毒、凉血消肿、化腐生肌之效，根据多年临床观察普济拔毒膏对痈疽、疔疮、疖肿、流痰、流注、瘰疬等疮疡相关性疾病及痄腮（流行性腮腺炎）具有良好效果，但对该方却鲜有其现代化研究，为进一步说明其作用机理、促进其开发利用，笔者决定对其药理作用展开研究。而根据现代医学理论，痄腮是由腮腺炎病毒引起呼吸道传染病[1]，火毒疮疡是由细菌感染引起的外科常见病多发病[2]，故笔者首先观察了普济拔毒膏体外对常见致病菌的抗菌活性，现将研究结果报告如下：

1 实验材料

1.1实验试剂及药物 营养琼脂：上海盛恩生化科技有限公司；营养肉汤：杭州微生物试剂有限公司； DMSO：济南世纪通达化工有限公司；NS：哈尔滨同一堂药业有限公司提供；林可霉素注射液：由浙江济民制药有限公司提供；普济拔毒膏：由王楼五官科门诊部提供。

1.2实验仪器 FA1004电子天平：上海天平厂；孵箱：上海分析仪器厂；YXQ-2S-50SⅡ立式压力蒸汽灭菌器：上海博迅实业有限公司医疗设备厂；生物安全柜BSC-1500ⅡA2-x：济南鑫贝亚生物技术有限公司。

1.3实验菌株 大肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌及化脓性链球菌由漯河医学高等专科学校医学检验实训管理中心提供。

2 实验方法

2.1实验用药物配制 100mg/ml普济拔毒膏溶液：精密称取普济拔毒膏1000mg，使用10ml DMSO将药物溶解，使其终浓度为100mg/ml，备用。

林可霉素（30ug/ml）：取盐酸林可霉素注射液一支（2ml：0.6g），无菌条件下取0.01ml，加入10ml蒸馏水中，即为30ug/ml的林可霉素，备用。

2.2增菌培养 取大肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌及链球菌菌株少许，接种于肉汤培养基中，37℃培养24h，取出用NS稀释至比浊度为0.5麦比，即1.5×108CFU/ml，15min内接种于琼脂平板中用于实验。

2.3抗菌活性测定--琼脂扩散法（打孔法）[3] 将琼脂培养基熔化后倾注于平皿制备平板，每平皿20ml，待其凝固。用无菌注射器吸取2.2项下制备的试验菌0.1ml均匀涂布于表面已干的上述肉汤琼脂平板上。待其干燥数分钟后用无菌钢管打四个孔，每孔注入2.1项下所制备药液0.1ml，每种药物4个复孔，每块平板涂布一种试验菌，实验时设置林可霉素阳性对照组和DMSO阴性对照组。37℃孵育24h后用直尺测量抑菌圈直径，取抑菌圈直径平均值，评价普济拔毒膏对常见致病菌的抗菌活性。

3 实验结果

见表1。

由结果可见：普济拔毒膏药液对皮肤及软组织感染常见致病菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、绿脓杆菌具有良好的抗菌作用，其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为18.3mm，对表皮葡萄球菌的抑菌圈直径为18.0mm，对化脓性链球菌抑菌圈直径为11.4mm，对绿脓杆菌抑菌圈直径为13.1mm。普济拔毒膏除对皮肤及软组织感染常见致病菌有良好抗菌活性外，对大肠杆菌及奇异变形杆菌也具有良好的抗菌活性，对大肠杆菌的抑菌圈直径为15.1mm，对奇异变形杆菌的抑菌圈直径为12.8mm。提示普济拔毒膏对常见致病菌具有良好的抗菌活性。

4 讨论

普济拔毒膏为中医外用方剂，临床常将其制备成黑膏药使用，具有凉血消肿、拔毒化腐生肌之效，对疮疡相关性疾病及痄腮（流行性腮腺炎）具有良好效果。其中火毒疮疡属于中医外科常见病群，包括痈、疔、疖、流痰、流注、瘰疬等，根据现代医学机理该类疾病指一切体表外科疾病的总称，狭义上指体表化脓性疾病，其常见致病菌包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、绿脓杆菌等[4]，故该类疾病治疗主要依靠抗菌药物 。但部分患者因细菌毒素、局部炎症等因素的影响，疮口经久不愈，给患者的生活和工作带来巨大的不便，西药对此类疾病作用微弱[5]，而普济拔毒膏在治疗此类疾病时表现出明显的优势，根据临床经验和文献显示中药外治法对此类疾病的治疗是通过多种途径共同产生作用，包括局部抗菌、增强机体全身及局部免疫功能、促进肉芽组织增生、促进疮面血管再生改善疮面微循环、调节疮面分泌、促进上皮细胞生长等[6，7]。

笔者为阐明普济拔毒膏的作用机理，促进其开发利用，初步观察了其体外抗菌作用，根据实验结果可见：普济拔毒膏对皮肤及软组织感染常见致病菌具有良好的抗菌活性，其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为18.3mm，对表皮葡萄球菌的抑菌圈直径为18.0mm，对化脓性链球菌抑菌圈直径为11.4mm，对绿脓杆菌抑菌圈直径为13.1mm、对大肠杆菌的抑菌圈直径为15.1mm，对奇异变形杆菌的抑菌圈直径为12.8mm，提示其体外具有良好的抗菌活性。但因实验条件限制本次仅选取了金葡菌、表葡菌、化脓性链球菌、绿脓杆菌等为观察对象，笔者将在今后工作中继续观察其对其他致病菌的抗菌活性以明确其体外抗菌谱，指导其在临床中的合理应用。

参考文献：

[1]张军育，李晓波.仙方活命饮治疗痄腮的临床体会[J].中医中药指南，2013，11（6）：257.

[2]李晓黎，程春生.中药外治法促进慢性感染性创面愈合机理进展[J].中医正骨，2007，19（4）：74-76.

[3]王勇，种丽君，宫少 波，等.愈溃膏的药效作用研究[J].实用中西医结合临床，2009，9（2）：86-87.

[4]曹育春，徐祖森，陈如，等.皮肤及软组织感染分离菌对抗菌药物的敏感性分析[J].医药导报，2007，21（7）：419-421.

[5]李应全，张萍，马剑峰.生肌愈皮膏的实验与临床研究[J].中国现代应用药学杂志，1998，15（2）：3-5.

[6]岳金换，张秦宏，孙忠人.中药外治疮疡的临床研究现状及分析[J].中医外治杂志，2013，22（4）：55-56

[7]张庚扬，李晓军.疮疡疾病相关的外用中药研究概述[J].环球中医药，2010，3（2）：101-105.