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白接骨丹体外抑菌试验研究

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摘 要 本文应用体外抑菌法对白接骨丹进行了抑菌范围和敏感度的试验。结果表明白接骨丹对金黄色葡萄球菌等外伤性感染有较好的治疗效果。

关键词 白接骨丹 抑菌圈范围 敏感度 外伤性感染 葡萄球菌等

资料与方法

供试品的来源及供试液制备:①自接骨丹为多年生草木植物秋季采收,经晾晒后放置1年的全草干品。②取本品100g,置500ml蒸馏水中,浸饱20分钟煎煮30分钟,倒出药液,在药渣中再加入500ml蒸馏水,煎煮20分钟。将2次药液混合,浓缩至1∶[KG-*2]1即为供试液。

供试菌及菌液的制备:选取普通化脓及创伤感染中常见的细菌。即金黄色葡萄球菌、链球菌、八叠球菌、破伤风杆菌、绿脓杆菌 、变形杆菌、大肝杆菌、枯草杆菌、短小芽胞杆菌等。上述菌种均由陕西省药品检验所生测室提供。

以上各细菌临用前各取新鲜菌苔-白金耳于1ml肉汤培养基中,置培养箱37℃培养6小时,作为原液。此时,菌液浓度相当每毫升9亿个。取上述6小时培养物1ml于9ml灭菌肉汤培养基中稀释1∶[KG-*2]1000备用。

培养基及器皿:普通琼脂培养基及肉汤培养基均按《中国药典》2005年版及有关资料配备。试管、刻度吸管、滴管、培养皿、8mm打孔器等,灭菌备用。

抑菌圈范围试验:①试验方法:平板圆孔法。以各种试验菌密集划线于普通营养琼脂平板上,用8mm打孔器打孔,每孔加入无菌试液0.2ml,置37℃环境中培养18小时。②试验结果见表1。

敏感度试验:试验菌液,供试验菌只选用表1中呈较强抑菌作用的菌株。制备方法同上。供试品稀释及接种见表2。

试验方法:试管法:将供试品按等倍稀释为试液1/4、1/8、1/16……等不同浓度,于每管中接种一定量的试验菌液,充分摇匀,置37℃环境中培养18小时,观察结果见表3。

平板法:先将供试品按试管法等倍称释为原液1/2、1/4、1/8……等不同浓度。将各稀释度供试品取1ml分别注入无菌平板内,然后各加已溶化的普通营养琼脂培养基9ml,迅速与供试品混匀、待冷、凝固。对照则用1ml肉汤代替供试品。此时,供试液的稀释度分别为1/10、1/20、1/40、1/80、1/160、1/320等。将已知各菌以划线法分别接种于平板内,置37℃环境中培养18小时(见表3)。

讨 论

中药白接骨丹通过体外对其有代表性的革兰阳性球菌、杆菌和革兰阴性杆菌等抑菌试验,表明该中药对能引起外伤化脓的金黄色葡萄球菌有高度的抑菌作用(见表1);对革兰阳性、阴性杆菌基本无抑菌作用。为此,本试验为该药用于外伤性感染提供了选择应用的依据。

由表1看出,该中药的提出液的抗菌作用随浓度增高而增强。提出液对金黄色葡萄球菌的抑菌表现为高度敏感,而稀释为50%供试品对金黄色葡萄球菌的抑菌表现为中度敏感。这就为该药用于临床提出了一定的参考依据。

通过试管法、平板法体外抑菌试验,试管法中该药对金黄色葡萄球菌的敏感度为1∶[KG-*2]64,而平板法则为1∶[KG-*2]80,两种试验方法其结果均在极度范围内,结果基本一致,表明本试验具有一定的可靠性。

由于该试品是经过直接加热浓缩而得,受热温度高、时间长,有可能对其抑菌成分有所影响,所以,如果采用薄

膜蒸发等手段所得供试液,其抑菌效果可能更强。

参考文献

1 周佛靖.常见中药的抑菌作用及测定方法