葫芦藓的采集、观察和保存
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文件编号： 1003 - 7586（2016）11 - 0047 - 02
葫芦藓是苔藓植物真藓目葫芦藓属中最常见的一种藓类，其拉丁学名为Funaria hygrometrica Hedw.。植物体小而矮，只有1～3 cm，绿色，无光泽，稀疏或密集群生。它适宜生活在土质肥沃或含氮元素较多背阴潮湿的地方，一般生长在庭院、田园、路旁，遍布于全国。植物体结构独特，雌雄同体异枝，孢子体着生在配子体上，组织分化很不完善。葫芦藓是由水生向陆生过渡的代表植物之一，具有明显的世代交替现象和特殊的繁殖方式，并在植物界的进化中占有重要地位，因而对葫芦藓的学习显得尤为重要。以下是关于葫芦藓的采集、观察和保存的简要介绍。
1 采集
因葫芦藓生活史具有世代交替现象以及特殊的繁殖方式，所以在采集葫芦藓时一定要严格把握采集时期。
1.1 原丝体的采集
采集原丝体时，应在初春（我国北方3月中旬）时进行，留心察看庭院阴湿墙角、田圃背阴处等。待到中春（我国北方4月上旬）以后逐渐看到土表层发绿，就是原丝体。这时就可用采集铲带泥土铲起一薄层，放入培养皿中。
1.2 配子体的采集
中春以后，随着天气逐渐变暖，原丝体生长很快，到4月中、下旬时原来发绿的土表层，绿色变得越来越厚，颜色更深一些，俯下身仔细察看就可发现植物体出现分枝，即是配子体植株。这时便可及时采集。
1.3 孢子体的采集
1.3.1 未成熟孢子体的采集
此类孢子体的采集一般在春末夏初时节进行为好，此时孢子体各部位已生长发育成形，完整孢蒴呈绿色，孢蒴里的孢子还未成熟。一般可以进行采集。
1.3.2 成熟孢子体的采集
采集成熟孢子体时，一般在夏末秋初季节，这时葫芦藓的孢子体大量成熟。完整葫芦形的孢蒴饱满，里面充满了成熟的孢子，是采集成熟孢子体的最佳时期。此时，抓住有利时机便可采集。
以上采集葫芦藓时，无论哪个阶段的类型一定要选取一些形态特征完整、生长健壮、个体大、姿态良好且各部位特征明显的典型株体。此外，还要掌握好采集时机，过早采集的葫芦藓体形小或孢蒴形态不典型，过晚有些类型数量变少或蒴帽脱落，标本不完整，影响教学效果。而且采集时一定要把葫芦藓成片地带泥掘起。
2 观察
2.1 葫芦藓植物体（指配子体）外形的观察
取采集好的葫芦藓配子体一小块放入盛有清水的培养皿中，用软毛刷子轻轻将它们所粘附的泥土在水中刷洗干净，然后进行观察。
2.1.1 根
无色透明，短而细，长约1 cm。在显微镜下可以看到只有单列细胞构成，因此它只有固着作用，无吸收水分和无机盐的功能，是假根。
2.1.2 茎
茎细弱，其上生有叶，高约2 cm，单一或稀疏分支。茎分为雌雄枝，其顶端形成茎卵器和器。显微镜下观察其构造分为三层组织，自外向内依次是表皮、皮层和中轴。表皮、皮层基本是由薄壁细胞组成，中轴部分的细胞纵向延长，但没有形成真正维管输导组织。
2.1.3 叶
叶小而薄，多集生于茎的中上部而呈莲座状，长舌形，全缘，有时内曲。无真正叶脉，叶片中间只有一条相当于叶脉的中肋，不到叶尖便消失。在显微镜下观察整个叶片除中肋外只有一层薄壁细胞构成，细胞内含有叶绿体。因此它能够进行光合作用，又能吸收水分和溶解在水中的无机盐。
2.2 葫芦藓配子体雌雄生殖器官的观察
葫芦藓是雌雄同株的植物，但雌雄生殖器官分别生长在不同枝上，即是雌雄同株异枝。
2.2.1 器的观察
葫芦藓的雄性生殖器官叫器。其器生长在枝端，从外形看，顶端叶形较大而且外张，像一朵小花，叫雄器苞。若欲观察其内部情况，可取器装片，在显微镜下观察，可见在雄器苞内有许多棒状的器，内生诸多。
2.2.2 颈卵器的观察
葫芦藓的雌性生殖器官是颈卵器，产生颈卵器的枝端像一个顶芽，是雌器苞。取颈卵器装片，在显微镜下观察，可见在雌器苞内有多个颈卵器，颈卵器为瓶状，颈部细，腹部膨大。腹部内有一个卵细胞。和卵细胞结合后发育成胚，胚在颈卵器中发育。胚进一步发育，长出一个长柄叫蒴柄。葫芦藓雄器苞内器中的成熟散发后，较长雄枝变萎缩，这时雄枝下面较短雌枝即转成主枝。因不同卵细胞受精时间早晚不一样，所以孢子体有不同发育阶段的各个形态，取颈卵器内有胚的装片进行观察，然后寻找有胚的颈卵器。
2.3 对孢子体的观察
葫芦藓的孢子体着生在配子体上，它是由雌枝颈卵器内卵细胞受精后发育成的胚进一步发育而来。它主要由蒴柄、孢蒴、蒴盖、蒴帽等组成。蒴柄细长约4～5 cm，先端呈弧形弯曲，干燥时扭转。孢蒴为葫芦形，不对称，多垂倾。蒴柄、孢蒴未成熟时均为绿色，成熟时蒴柄变成红褐色，孢蒴变得饱满呈黄绿色。蒴盖微凸，覆孢蒴之上，位于孢蒴和蒴帽结合处。蒴帽呈兜形，有长喙。
2.4 对原丝体的观察
葫芦藓的原丝体是配子体的雏形，其形体较小，呈绿色，覆盖在土层表面。用解剖针从采集的原丝体中分离出一些特征明显且健壮个体，洗干净，放入盛有清水的培养皿中，用扩大10倍的放大镜观察，可看到它由许多分枝交错组成。
3 保存
3.1 浸制
因葫芦藓株体较小，极易用小玻璃瓶或小标本瓶等制作成浸制标本长久保存。取一些采集好的葫芦藓，小心、仔细地将它们所粘附的泥土在清水中洗干净，切不可弄断葫芦藓的某个部分，以保证所制作标本的完整性。
3.1.1 一般浸制
将洗干净的葫芦藓不同时期不同类型标本分别放入10 mL（高约5.5 cm）的医用注射小瓶内，加入体积分数为5%的福尔马林溶液，盖上皮塞，贴上标签，并用石蜡封口保存，但时间久了标本会褪色。
3.1.2 保色浸制
为了使葫芦藓标本色泽自然，形态逼真，永久保持绿色。可以把洗干净的葫芦藓标本，用饱和的硫酸铜溶液浸泡一昼夜，取出后再用清水洗净，放入盛有体积分数为5%的福尔马林溶液医用10 mL（高约5.5 cm）注射小瓶中，盖上皮塞，贴上标签，用石蜡封口保存。
3.2 干制
根据葫芦藓植株株体较小，叶薄、根单、茎细，易干燥，一般不宜发霉腐烂等特点，可制成干制标本保存。
3.2.1 自然干制
把野外采集的带泥土的葫芦藓标本，在培养皿内于阴凉处自然风干（主要指有孢子体的植株）。
3.2.2 清洗干制
将采集的带泥土的葫芦藓标本，用清水洗干净后，放入培养皿中，在阴凉处自然风干。待观察时放入清水中，浸泡几分钟，因吸胀作用，可使株体吸水膨胀恢复原形，用于教学。