HBV―M与定量PCR法检测HBV―DNA相关性探析

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【摘要】 目的：探讨乙肝病毒DNA（hbv-DNA）与其血清学标志物HBV-M之间的相关性。方法：选取本院收治的乙肝患者183例作为研究对象，采集并分离患者的血清标本，分别采用荧光定量pcr法和酶联免疫吸附法对患者的HBV-DNA、HBV-M进行检测，在不同的hbv-M模式下分析其与HBV-dna间的关系。结果：在HBsAg（+）+HBeAg（+）+HBcAb（+）的模式下，HBV-DNA的检测阳性率为97.9%；HBsAg（+）+HBeAg（+）模式下，HBV-DNA的检测阳性率是100%；两者比较差异无统计学意义，但这两种模式下的检测阳性率都显著高于其他模式（P

【关键词】 HBV-M； HBV-DNA； 荧光定量PCR技术； 相关性

【Abstract】 Objective： To discuss the correlation between hepatitis B virus DNA and HBV-M. Method： Five hundred and forty-nine hepatitis B patients were selected in our hospital. Patients’ serum samples were collected， its HBV-DNA and HBV-M were detected by using quantitative PCR and enzyme-linked immunosorbent assay. The correlative between HBV-M and HBV-DNA was analyzed. Result： In HBsAg （+） + HBeAg （+） + HBcAb （+） mode， the positive rate of HBV-DNA was 97.9%. In HBsAg （+） + HBeAg （+） mode， the positive rate of HBV-DNA was 100%. The positive rates were not seen significant difference between the two modes， but they were significantly higher than the other modes（P

【Key words】 HBV-M； HBV-DNA； Fluorescence PCR； Correlative analysis

First-author’s address：The People's Hospital of Guangfeng County， Guangfeng 334600， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.25.042

乙肝是临床上常见的感染性疾病，由乙肝病毒引起，作为乙肝的高发地区，其对我国人民的健康造成了很大的威胁。乙肝病毒血清标志物HBV-M可以反映人体对乙肝病毒的免疫状态，其检测也是是判断患者病情、乙肝病毒传染性的依据之一[1-3]，但无法直接反映乙肝病毒在体内的复制情况，而荧光定量PCR则可以对HBV-DNA进行定量的检测与分析[4]。本文主要探讨HBV-M与HBV-DNA之间的相关性，具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院收治的乙肝患者作为研究对象。患者均经临床诊断确诊为乙肝，并排除甲型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎以及庚型肝炎的叠加感染患者[5-7]。共收治患者183例，其中男118例，女65例，患者年龄6～77岁，平均（37.6±2.3）岁。

1.2 方法 空腹采集患者的静脉血，并离心分离血清，分别采用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法对患者的HBV-DNA、HBV-M进行检测。选择酶联免疫吸附法检测，严格按照ELISA试剂盒上的操作说明检测患者的HBV-M，并使用酶标仪记录结果。荧光定量PCR技术检测：将100 μL的血清标本与等量DNA提取液混合，离心，将上清液去除后再加25 μL处理液，水浴加热10 min后再次离心，将得到的上清液2 μL置于PCR管中，设置循环参数，使血清标本进行PCR反应。同时，使用相同的方法处理其他对照品[8]。反应完全之后，以阳性梯度标准品的Ct值作标准曲线并计算HBV-DNA含量[9-11]。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用 字2检验，P

2 结果

3 讨论

本文分别使用酶联免疫吸附法和荧光定量PCR法对HBV-M和HBV-DNA进行检测，并对不同HBV-M模式下的HBV-DNA检测阳性率进行比较可见，在HBsAg（+）+HBeAg（+）+HBcAb（+）和HBsAg（+）+HBeAg（+）两种模式下，患者的HBV-DNA检测阳性率最高，提示血清HBsAg和HBeAg同时呈阳性的时候，机体内的HBV-DNA复制活跃，患者的病情严重，且传染性高。而在HBsAb（+）+HBeAb（+）+HBcAb（+）、HBsAb（+）+HBcAb（+）、HBcAb（+）等模式下，HBV-DNA的阳性率都不超过10%，甚至为0，传染性低，说明HBsAb在病毒清除过程中发挥作用。

乙肝病毒的血清学标志物的模式不同，HBV-DNA的检测阳性率不同，乙肝患者机体内的病毒含量也有差异，HBV-M和HBV-DNA的检测分别是乙肝感染的间接证据和直接证据[12]，同时对患者进行这两项指标的检测对于乙肝的临床诊断、病情判定、传染性的评估具有重要的意义。

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（收稿日期：2014-03-26） （本文编辑：郎威）