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抗链球菌溶血素

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据我院临床医师和患者反映,部分有明显症状或体征的患者定性检测ASO总是阴性反应,不支持临床诊断。我科于2007年6月偿试用定量检测取代定性检测,体会如下:

1材料与方法

1.1资料取172例患者静脉血,分别用免疫胶乳法和生化定量(ASO-Latex)法做抗链菌溶血素“O”试验并做比较。

1.2仪器日立7180自动生化分析仪(日本产)。

1.3试剂免疫胶乳试剂,由上海捷门生物技术合作公司提供;抗链体菌溶血素“O”测定试剂盒,由日本电化生研株式会社提供(进口)。

1.4方法①胶乳法是利用由溶血素“O”和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。ASO胶乳灵敏度调整到200IU/ml,超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒的原理进行测定,操作方法按其说明书进行。②生化定量法(ASO-Latex)采用样品中ASO与吸附链球菌溶血素“O”的Latex粒子发生特异性的抗原抗体反应,使Latex粒子发生凝集反应,该凝集反应的吸光度变化与样品中抗链球菌溶血素“O”(ASO)效价相关。用已知浓度的标准品制作的工作曲线上即可求得样品中ASO效价。(以下简称胶乳法、定量法)

2结果

172例患者中,临床诊断风湿热14例,风湿性关节炎10例,其他诊断包括急性肾小球肾炎、扁桃体炎、关节痛,待查等148例,其检测结果见表1。

如表1可见,两种方法比较测值在>160 IU/ml已有临床诊断价值,而胶乳法无法测出。

2.1胶乳法灵敏度在200 IU/ml以上,超出此滴度才可出现肉眼可见的凝集。

2.2定量法灵敏度以纯水作样品空白吸光度变化量(E/min)仅0.0003~0.0011Abs之间,当用ASO效价为500IU/ml的质控品作样品测定,吸光度变化速率在0.0471~0.0510Abs(E/min)之间。

2.3定量法精密度:将1份测定为阳性的标本连续测定20次,CV<1.65%。

2.4定量法准确度:用已知浓度的质控品测定,测定范围在已知浓度的-2.2±2.7%之间。

2.5测量范围20~1200IU/ml,超出此范围用生理盐水稀释,结果乘以稀释倍数。

3讨论

定量法测定能得到胶乳凝集试验无法得到的数值,而用定性法已远远不能满足临床需要,目前乃至将来定量法取代定性法这是一种发展趋势。通过我们对上述两种方法的比较,定量法因其准确、精密、敏感、特异操作方便、快捷,结果可靠,试剂效期长等诸多优点而被使用。克服了胶乳法在操作人员技术(手法、加量、温度、时间及结果判断等)方面的人为误差,并可通过定量客观地反应ASO的存在,为临床诊断及疗效观察和预后判断提供了更有力的实验诊断依据,深受医患的广泛认可。