ABI 7500与TL 988实时荧光PCR仪的性能评价

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[摘要] 目的 探讨abi 7500与tl 988荧光定量PCR仪之间的性能差异。 方法 参照EP9-A2文件中的评价标准，两台仪器分别对5种不同浓度的甲型流感病毒阳性质控品进行检测，每个浓度测量20次，比对两种仪器的精密度、灵敏度，并评价两台仪器结果一致性。 结果 精密度：TL 988的变异系数（CV）从0.68%到1.52%，ABI 7500的CV从1.93%到2.69%。两台仪器在检测高浓度的甲型流感病毒DNA时（107、106、105 copies/mL）差异无统计学意义（P>0.05），检测低浓度的病毒DNA时（104、103 copies/mL）差异有统计学意义（P

[关键词] 荧光定量PCR仪；比对；精密度；灵敏度；一致性

[中图分类号] R446.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）02-0155-02

根据ISO 15189要求，实验室需要定期对使用的仪器进行性能评估，当实验室使用两套及以上检测系统检测同一项目时，应比对数据表明其检测结果一致性。现笔者按EP9-A2文件要求[1-5]，对美国ABI 7500和国产TL 988的主要性能指标进行评估，以了解结果差异性与一致性，从而寻找国产仪器可替代国外产品的可能性。

1材料与方法

1.1材料

（1）主要仪器：ABI 7500和TL 988荧光定量PCR仪、生物安全柜、低温高速离心机、超净工作台等。

（2）试剂：上海之江生物科技有限公司提供的甲型流感病毒荧光定量PCR检测试剂盒。检测标本：阳性定量质控品（含甲型流感病毒DNA的浓度为107 copies/mL），用free H2O准确10倍比稀释成106、105、104、103 copies/mL，充分混匀，分装250 μL到1.5 mL的eppendorf管中备用。

1.2 方法

1.2.1 精密度测定 按NCCLS标准，分别在ABI 7500和TL 988荧光定量PCR仪上同时检测107、106、105、104 copies/mL四种浓度的阳性质控品。各浓度均测定20次，计算其均值、标准差和变异系数。

1.2.2 灵敏度测定 分别取107、106、105、104、103 copies/mL五个浓度标本在两台PCR仪上进行检测，根据阳性检测率分析其灵敏度。

1.2.3相关性检测 通过重复性试验中的数据，分别取107、106、105、104 copies/mL浓度的检测结果的平均值，分析两台仪器的数据相关性。

1.3统计学方法

应用SPSS 17.0统计学软件对数据分析处理。检查是否有离群值，对数据进行初步检查，两变量间线性关系分析采用直线相关及回归分析。P

2 结果

2.1两台仪器精密度结果比较

TL 988 和ABI 7500两台荧光PCR仪器的精密度结果比较，见表1。可以看出TL 988测得各浓度数据的变异系数（CV）从0.68%到1.52%，ABI 7500测得各浓度数据的变异系数（CV）是从1.93%到2.69%，变异系数（CV）均在要求范围内（0.05）。此外，关于相同浓度的标准品检测结果的Ct值和标准差分析，显示两台PCR仪的批内重复性均良好。

表1 两台仪器精密度结果比较

2.2两台仪器灵敏度结果比较

甲型流感病毒DNA的浓度在107、106、105、104 copies/mL时，两台仪器的阳性检出率均为100%，当浓度为103 copies/mL时，TL 988检出率依然为100%，但ABI 7500的检出率为0。灵敏度方面，TL988要比ABI 7500能检测到更低浓度，即灵敏度相对较高（P

2.3 相关性比较

两台仪器对各标本的甲型流感病毒DNA的含量进行测定，结果表明，两台仪器测定值的回归直线方程为：y=1.2364x-5.2097（r=0.998），具有良好的直线相关和回归关系。

3 讨论

在2013年全球高科技产业值中，精密仪器医疗设备约为3万亿美金，占13%。而精密医疗设备基本上被国外所垄断。医疗设备是现代医疗业发展的必备手段，所以需要加快精密仪器的国有化进程，降低成本，推动民族品牌企业不断发展，降低老百姓就医费用成本。

荧光定量PCR技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针对PCR产物进行标记跟踪，实时监控反应过程。与传统的PCR技术相比，实时荧光定量技术具有特异性高等优点[6-8]，在检测甲型流感病毒上具有很好的准确性。

另外实验室中不应使用同一种检测系统进行临床检验，以避免仪器出现系统性的检测错误[9-12]。对样本进行检测时，一般只做一次检验便要发出报告，这便要求仪器检测系统具有良好的可重复性，因此对仪器的精密度具有很高的要求[12-14]。实验室中，当样本在低拷贝状态下也要求有很高的检出率。

两台仪器在试验前，室内质控品的检测结果均可靠，具有较好的重复性，此次试验中，两台仪器未出现故障，稳定性良好，操作方便，检测快速。对 ABI 7500荧光定量pcr仪在重复性、线性、灵敏度上与TL 988进行比较，结果显示两台 PCR仪的批内批间重复性好， CV均在要求范围内，线性良好。ABI 7500在精密度和灵敏度上明显略逊于TL 988，可能与本次试验中所用试剂与国产TL 988更配套，致使TL 988在本次试验中表现优异。两台仪器测定值比较，r=0.998，表明两台仪器具有良好的直线相关和回归关系。说明ABI 7500与TL988测定甲型流感病毒的结果具有可比性，而国产TL 988 PCR仪能较好地服务于临床。

[参考文献]

[1] 张秀明，李炜煊，郑松柏，等. 不同检测系统17项常规生化结果的比对和偏倚评估[J]. 检验医学，2007，22（2）：166-170.

[2] Berger A，Preiser WJ. Viral genome quantification as a tool for improving patient management：The example of HIV，HBV，HCV and CMV[J]. Antimicrob Chemother， 2002，49（5）：713-721.

[3] Strader DB，Wright T，Thomas DL，et al. Diagnosis，management，and treatment of hepatitis C[J]. Hepatology，2004， 39（4）：1147-1171.

[4] Ho SK，Yam WC，Leung ET，et al. Rapid quantification of hepatitis B virus DNA by real-time PCR using fluorescent hybridization probes[J]. J Med Microbio，2003，52（Pt5）：397-402.

[5] The National Committee for Clinical Laboratory Standaeds.EP9-A2：2002 Method comparison and bias estimation using patient samples [S].

[6] 王露楠，邓 巍，申子瑜，等. 乙型肝炎病毒DNA标准物质的研究[J]. 中华肝脏病杂志，2007，15（2）：107-110.

[7] 李金明. 实时荧光PCR技术[M]. 北京：人民军医出版社，2007：198.

[8] 王宁. 定量PCR技术研究进展[J]. 国外医学临床生物化学与检验学分册，2000，21（6）：314-316.

[9] 程刚，何蕴韶，周新宇. 荧光定量聚合酶链式反应检测乙型肝炎病毒[J]. 中华医学检验杂志，1999，22（1）：135-138.

[10] 曾争，刘丹，公维波，等. 三种PCR仪的特异性及灵敏度评价[J]. 医疗卫生装备，2006，27（10）：10.

[11] 杨有业，张秀明. 临床检验方法学评价[M]. 北京：人民卫生出版社，2008：362.

[12] 梁映亮，隋洪，郑文婷，等. ABI prism 7000荧光定量PCR仪性能评价及应用价值[J]. 医药前沿，2012，（2）：337-338.

[13] Sertoz RY，Erensoy S，Pas S et al. Evaluation of the agreement of results obtained from ABI7000 and ABI 7700 sequencers in the quantification of hepatitis B virus DNA[J]. Mikrobiyol Bul，2005，39（2）：175-181.

[14] Hartman LJ，Coyne SR，Norwood DA. Development of a novel internal positive control for Taqman based assays[J].Mol Cell Probes，2005，19（1）：51-59.

（收稿日期：2014-07-17）