胰蛋白酶范文精选

作者：黄忠林， 宋九华， 王应红

【摘要】

目的认识苏木素对胰蛋白酶作用活性的影响及苏木素对胰蛋白酶作用的荧光性质。方法用酶活性法观察苏木素对胰蛋白酶活性的影响；用紫外光谱和荧光光谱研究苏木素对胰蛋白酶作用的光谱性质。结果苏木素对胰蛋白酶活性可产生竞争性抑制，抑制剂常数k1=6.13×10-5 mol/l；苏木素对胰蛋白酶的荧光猝灭效应为静态猝灭；苏木素与胰蛋白酶之间的作用力主要表现为氢键和范德华力。结论苏木素可使胰蛋白酶分子中的色氨酸所处环境的疏水性增强，使胰蛋白酶分子构象发生变化。

【关键词】 苏木素 胰蛋白酶 荧光光谱 紫外光谱 酶活性

中药苏木的主要成分苏木素(haematorylin)是组织、病理实验室中最常用的染色剂，可用于细胞核染色［1］。苏木素具有收缩血管、中枢抑制及抗炎等作用，具有行血、破淤、消肿、止痛的功效［2］。胰蛋白酶(trypsin)是人和动物肠道中一种重要的蛋白水解酶，从该酶被发现以来，人们对其进行了一定的研究，如用胰蛋白酶为催化剂对蛋白质进行降解的研究［3～5］。药物对胰蛋白酶作用的性质［6］及苏木素与dna作用的性质的研究已引起重视［7］。本文主要通过紫外和荧光光谱法研究苏木素与胰蛋白酶作用的性质，从而获得苏木素与胰蛋白酶作用时结构变化、所处微环境等信息，探讨苏木素与胰蛋白酶相互作用的机制，并对苏木素与胰蛋白酶作用活性的影响也进行了研究。

1 器材

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【关键词】 胰蛋白酶

Induction of secretion of interleukin8 from lung epithelial cells by trypsin

【Abstract】　AIM: To investigate the actions of trypsin on the secretion of interleukin8 (IL8) from human lung epithelial cells. METHODS: A549 cells were cultured in a 12well culture plate. The challenge was performed by adding various concentrations of trypsin or trypsin inhibitor into each well, respectively. After 2 h, 8 h or 16 h, the reactions were terminated by removing the supernatant from each well. A sandwich ELISA was used to determine the levels of IL8 in supernatants. RESULTS: Following 16 h incubation, trypsin induced the secretion of IL8 in a concentration dependent manner. As low as 1 μg/L trypsin was able to induce IL8 release from epithelial cells and the maximum of accumulated release of IL8 was observed with 3 μg/L trypsin, which was 5fold more than the baseline release. However, when trypsin concentration increased over 3 μg/L, the extent of increased secretion of IL8 decreased. Soybean trypsin inhibitor (SBTI) and α1antitrypsin (α1AT) inhibited trypsin induced secretion of IL8. The time course showed that the actions of trypsin initiated at 2 h and reached their peak at 16 h. CONCLUSION: Trypsin is a potent secretogogue of IL8 release from cultured human lung epithelial cells, indicating that it is likely to be involved in the pathophysiological process of airway inflammation.

【Keywords】 trypsin；epithelial cells; interleukin8; lung

【摘要】 目的： 探讨胰蛋白酶对人上皮细胞白细胞介素8（IL8）分泌的影响. 方法： 人肺上皮细胞系A549细胞分别接种于12孔培养板各孔内，并分别用不同浓度的胰蛋白酶和/或胰蛋白酶抑制剂进行刺激. 刺激时间为2 h、8 h和16 h. 用ELISA方法检测上清液中的IL8水平. 结果： 经过16 h的培养，胰蛋白酶可引起浓度相关性IL8释放，胰蛋白酶在浓度1 μg/L时就可引起IL8的释放量增加，3 μg/L时诱导IL8的释放量达高峰,为基础分泌量的5倍，但随着胰蛋白酶浓度的增加，IL8的释放量反而下降. 胰蛋白酶抑制剂可以抑制胰蛋白酶诱导IL8释放的作用. 时间相关曲线表明，胰蛋白酶从2 h起即可引起IL8释放，16 h达高峰. 结论： 胰蛋白酶可促进人肺上皮细胞分泌IL8，表明它能积极参与呼吸道的炎症过程.

【关键词】 胰蛋白酶；上皮细胞；白细胞介素8；肺

0引言

蛋白酶激活受体（protease activated receptor, PAR）属G蛋白耦联受体家族中的亚类，目前有PAR14 4个成员组成，PAR2可在人呼吸道上皮细胞和多种呼吸道肿瘤上皮细胞系表面表达［1-5］. 胰蛋白酶主要由胰腺分泌，在体内主要参与肠道消化功能. 最近研究表明，胰蛋白酶还是PAR2的激动剂，胰蛋白酶在人PAR2的R34?S35LIGKV处切断受体的N末端暴露系锁配体SLIGKV，从而激活PAR2参与肺部炎症［6］，而PAR2的缺乏可以降低气道炎症反应［7］. 因此，我们利用人肺癌上皮细胞系A549细胞探讨胰蛋白酶对上皮细胞IL8分泌的影响.

［摘要］目的：评价尿胰蛋白酶原2对急性胰腺炎(AP)诊断中的临床意义。方法：对30例AP患者和35例非AP患者进行尿胰蛋白酶原2、血清脂肪酶与血、尿淀粉酶测定，并将其结果进行比较。结果：AP组与非AP组中各项监测指标差异有显著性，尿胰蛋白酶原2对AP的敏感性、特异性、准确度分别为91.17％、87.10％、89.23％。结论：尿胰蛋白酶原2是较好的AP诊断指标，诊断准确度较高，阳性结果很大程度上怀疑胰腺炎。

［关键词］尿胰蛋白酶原2；脂肪酶；淀粉酶；急性胰腺炎

TheClinicalValueofUrinaryTrypsinogen2AssayintheDiagnosisofAcutePancreatitis

Abstract:ObjectiveToaccesstheclinicalvalueofurinarytrypsinogen2assayinthediagnosisofacutepancreatitis.MethodsUrinarytrypsinogen2,serumlipase，serumamylase，urineamylasein30patientswithacutepancreatitisand35patientswithnonacutepancreatitisweredetectedandcompared．ResultsTherewasasignificantdifferenceinalldetectionsbetweenthepatientswithacutepancreatitisandnonacutepancreatitis．Thesensitivity,specificityandaccuracyofurinarytrypsinogen2were91.17％，87.10％and89.23％．ConclusionComparedwithothertests，urinarytrypsinogen2assayismoreaccurate，apositiveresultprovideareliablediagnosismethodtoacutepancreatitistoalargedegree．

Keywords:Urinarytrypsinogen2；Lipase；Amylase；Acutepancreatitis

临床上脂肪酶主要用于胰腺急性疾病及胰腺肿瘤的辅助诊断。尿胰蛋白酶原2可作为诊断和评估急性胰腺炎的一项有效方法［1］，而血、尿淀粉酶是临床上急腹症筛查急性胰腺炎(AP)最为常用的方法。我们对65例急腹症患者分别进行上述项目检测，以评估其在AP诊断中的应用价值。

1材料和方法

1.1材料研究对象:2005年8月至2006年5月以急腹症收入院者65例(男46例、女19例)，年龄(47.9±21)岁。其中确诊为胰腺炎患者30例(男21例、女9例)。AP的诊断标准为1996年中华医学会外科分会推荐的诊断标准。其余35例(男25例、女10例)为其他原因所致的急腹症，其中胆囊炎13例，胆石症8例，急性阑尾炎7例，胃、十二指肠溃疡5例，腹部肿瘤2例。

患者女性，48岁，因发现肝硬化、脾肿大伴双胁胀痛不适半个月入院。双胁胀痛不适无明显诱因，针刺样，无放射痛，与呼吸、变动无关。无乏力、食欲减退、腹胀等伴随症状。发病以来，患者精神、食欲、睡眠尚可，无发热，二便正常，体重无明显变化。5年前诊断有“痒疹”，长期服用多种中西药物。入院查体：慢性病容，面色晦暗，轻度贫血貌，四肢及腹部可见多处红色皮疹及小瘢痕，肝掌可疑阳性，心肺查体无异常，浅表淋巴结无肿大。腹部平软，无压痛、反跳痛，肝脏未触及，脾脏平脐，表面光滑，质地中等，无明显触压痛。移动性浊音阴性。实验室检查：白细胞 2.99×109/L、中性粒细胞 0.28、红细胞 3.66×1012/L、血红蛋白 83g/L、血小板 107×109/L，肝功能、ALP、GGT、AFP、PT均正常，肝炎病毒学、自身抗体系列检查均阴性。血清α1抗胰蛋白酶：2.3g/L。腹部CT：早期肝硬化（请结合临床）、巨脾；肺部CT：纵隔内多发肿大淋巴结；骨穿检查：增生性贫血骨髓像；肝脏穿刺活检：肝细胞浆内易见圆形粉染的透明小球，PAS染色阳性，并不被淀粉酶消化，肝细胞轻度弥漫性水样变性，部分肝细胞浆内见色素颗粒沉积，易见大核、双核肝细胞，散在灶性炎及窦周炎，肝窦局灶性轻度扩张，汇管区稍扩大，少-中量炎细胞浸润，纤维组织轻度增生，小叶界板轻度损伤。病理结论：α1抗胰蛋白酶缺乏症，并考虑重叠慢性药物性肝损伤。最终临床诊断：1. α1抗胰蛋白酶缺乏症；2.药物性肝损害。

讨论：α1抗胰蛋白酶（α1-AT）缺乏症是一种常染色体隐性遗传性疾病，根据蛋白酶抑制系统（PI系统）等位基因不同分为多种类型。其中PIMM型最为多见，PIZZ型最为少见，PIMZ、PIFZ、PIMS等杂合子类型病变发生较晚，发病率亦较低。α1-AT可抑制胰蛋白酶、蛋白溶解酶、弹性硬蛋白酶、纤维蛋白溶酶等。α1-AT缺乏时，肝细胞内堆积较多类α1-AT，不能通过肝细胞膜释放入血，故蛋白质分解破坏作用加强导致肝细胞变性坏死，蛋白溶解酶释放增多进一步损害肝细胞。同理可引起肺部损伤，造成弥漫性肺气肿。临床上多表现为新生儿肝炎，少数变现为幼年性肝硬化、成年性肝硬化及肺气肿。病理上以PAS包涵体为特征，化验血清α1-AT常降低。α1-AT缺乏症多为幼时发病，少有成年患者。与多数病例报导相比，本例患者具有以下几个特点：①发病年龄较大，考虑与等位基因差异有关，成年患者多为PIMZ或PIMS型；②化验血清α1-AT略高于正常水平，考虑与调节肝细胞合成α1-AT反馈机制有关；③脾脏肿大明显，易误诊为血液系统疾病、结缔组织病等；④有明确应用损肝药物史，临床表现符合药物性肝损害，易漏诊其他方面肝病。本例病人提示肝脏穿刺活检对本病诊断有重大意义，临床医务工作者对不明原因肝病患者应考虑到本病可能。目前该病尚无特效疗法，主要以保肝及对症支持治疗为主，肝病进展至晚期可考虑肝移植。

摘要：对棉铃虫（Helicoverpa armigera L.）肠道内7种类胰蛋白酶的氨基酸序列进行了生物信息学分析。

>> 人组蛋白去乙酰化酶11的克隆表达与生物信息学分析 FZ6基因及其蛋白的生物信息学分析 拟南芥和大白菜YABBY蛋白家族的生物信息学分析 斑马鱼TATA结合蛋白的生物信息学分析 黄瓜DVR基因的生物信息学分析 金铁锁糖基转移酶PtT1的克隆与生物信息学分析 黄芩葡萄糖醛酸水解酶基因的克隆、生物信息学分析及表达 蓖麻油体固醇蛋白质的鉴定与生物信息学分析 结核分枝杆菌38kDa蛋白结构与功能的生物信息学分析 新疆细粒棘球绦虫EgAgB8/3蛋白的生物信息学分析及意义 棉铃虫的巧防技术 太子参分解代谢关键酶8′羟化酶基因的克隆及生物信息学分析 红白忍冬SABATH甲基转移酶基因克隆及其生物信息学分析 希金斯炭疽菌腺苷酸环化酶生物信息学分析 丹参类贝壳杉烯氧化酶（SmKOL）基因全长克隆及其生物信息学分析 唇形科植物脚6基脚6基焦磷酸合酶编码基因及其氨基酸序列的生物信息学分析 人ALK－1近端启动子的生物信息学分析 酵母转录因子结合位点保守性的生物信息学分析 玉米谷胱甘肽过氧化物酶的生物信息学分析 欧文氏杆菌铁代谢相关基因的生物信息学分析 常见问题解答 当前所在位置：l）分析棉铃虫类胰蛋白酶氨基酸序列的理化性质；运用DNAMAN软件比对分析氨基酸序列同源性；运用MEGA 5.0中的Fhylogenetic Tree方法构建分子系统发育树；运用在线工具ProtScale （）进行亲、疏水性的分析；运用Psort在线工具（）进行蛋白质二级结构的分析预测；运用NCBI数据库中CDD在线工具（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/cdd/wrpsb.cgi）进行功能结构域的分析。

2 结果与分析

2.1 棉铃虫类胰蛋白酶氨基酸序列理化性质分析

运用ProtParam在线软件分析棉铃虫7种类胰蛋白酶氨基酸序列理化性质，结果见表1。由表1可知，棉铃虫7种类胰蛋白酶在理论等电点、脂溶指数以及氨基酸组成等方面均表现出相似性。其相对分子质量约为70 000，等电点约为5.00，氨基酸数目为253～256，Ala、Cys、Gly和Thr残基含量较高。7种类胰蛋白酶的不稳定系数均较高，其中类胰蛋白酶Ⅲ的不稳定指数最低，为52.08，表明类胰蛋白酶在棉铃虫细胞内的稳定性较差，推测类胰蛋白酶代谢较为活跃，代谢周转的速度较快。棉铃虫7种类胰蛋白酶的脂溶指数均较低，属于亲水性蛋白质。

2.2 棉铃虫类胰蛋白酶氨基酸序列磷酸化位点预测分析

使用NetPhosk 2.0 Server在线工具对棉铃虫7种类胰蛋白酶的氨基酸序列分别进行预测Ser、Thr与Tyr位点处发生磷酸化的概率结果见表2。从表2可见，在氨基酸磷酸化位点中Ser的预测分值最高，表明Ser发生磷酸化的概率最高，并且发现类胰蛋白酶Ⅲ中不具有Thr磷酸化位点；只有类胰蛋白酶Ⅴ具有Tyr磷酸化位点。以类胰蛋白酶Ⅲ为例进行说明：其氨基酸序列在第83位、243位、246位、247位这4个Ser位点处都有可能发生磷酸化，但第247位Ser发生磷酸化的概率最大，为M3=0.973。

2.3 棉铃虫类胰蛋白酶氨基酸序列分子进化树分析

[摘要] 目的 比较吸烟未患慢性阻塞性肺疾病（COPD）者和吸烟患COPD者血清中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）和α1-抗胰蛋白酶（α1-AT）含量有无明显差别，进而明确检测血清酶学有无早期诊断COPD的意义。 方法 入选33例吸烟伴COPD的稳定期住院患者、33例吸烟不伴COPD的健康体检者及20例健康对照者，检测三组对象的血清NE和α1-AT的含量。 结果 血清中NE含量，在吸烟伴COPD者为55.21 ng/mL，明显高于吸烟不伴COPD者（25.76 ng/mL），P值均 0.05）。 结论 检测血清中NE含量有早期诊断COPD的意义。

[关键词] 中性粒细胞弹性蛋白酶；α1-抗胰蛋白酶；慢性阻塞性肺疾病

吸烟能导致全身多种疾病，其中有24%的吸烟者能发生慢性阻塞性肺疾病（COPD）。由于大多数COPD患者早期没有症状，所以不能及早就诊，这些患者只能做肺功能检查才能确诊。对于没有肺功能仪的医院和不适宜做肺功能检查的患者是否可以通过血清酶学检测达到早期诊断的目的呢？我们的研究发现中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）和α1-抗胰蛋白酶（α1-AT）的血清含量在吸烟的COPD患者组、非患者组及健康组有明显不同，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2008年10月～2010年1月在我院体检者和呼吸科住院的COPD患者共86例。将其分成三组：A组33例是有吸烟史的住院治疗后处于稳定期的COPD患者；B组33例是有吸烟史但是没有COPD的健康体检者；C组20例是不吸烟的健康体检者。三组受检者的年龄和性别匹配，具有可比性。吸烟者吸烟指数均≥30包年，均进行吸入支气管扩张剂后的肺功能检查：B组一秒率>70%，排除COPD诊断，A组一秒率

1.2 方法

采集空腹静脉血5 mL，A组出院前采血，B组和C组在体检时留取血样，及时提取血清，每例取1 mL血清分装在2个待测管中，待测血清存于-70℃超低温冰箱保存。使用美国进口的原装试剂盒，用ELISA法检测血清中NE和α1-AT含量，具体步骤根据试剂盒操作说明书逐步进行。每组研究对象检测NE和α1-AT两种酶含量，然后比较每一种酶含量在两组间的差别有无显著性。

摘要：目的认识苏木素对胰蛋白酶作用活性的影响及苏木素对胰蛋白酶作用的荧光性质。方法用酶活性法观察苏木素对胰蛋白酶活性的影响；用紫外光谱和荧光光谱研究苏木素对胰蛋白酶作用的光谱性质。结果苏木素对胰蛋白酶活性可产生竞争性抑制，抑制剂常数K1=6.13×10-5mol/L；苏木素对胰蛋白酶的荧光猝灭效应为静态猝灭；苏木素与胰蛋白酶之间的作用力主要表现为氢键和范德华力。结论苏木素可使胰蛋白酶分子中的色氨酸所处环境的疏水性增强，使胰蛋白酶分子构象发生变化。

关键词：苏木素胰蛋白酶荧光光谱紫外光谱酶活性

中药苏木的主要成分苏木素(Haematorylin)是组织、病理实验室中最常用的染色剂，可用于细胞核染色［1］。苏木素具有收缩血管、中枢抑制及抗炎等作用，具有行血、破淤、消肿、止痛的功效［2］。胰蛋白酶(trypsin)是人和动物肠道中一种重要的蛋白水解酶，从该酶被发现以来，人们对其进行了一定的研究，如用胰蛋白酶为催化剂对蛋白质进行降解的研究［3～5］。药物对胰蛋白酶作用的性质［6］及苏木素与DNA作用的性质的研究已引起重视［7］。本文主要通过紫外和荧光光谱法研究苏木素与胰蛋白酶作用的性质，从而获得苏木素与胰蛋白酶作用时结构变化、所处微环境等信息，探讨苏木素与胰蛋白酶相互作用的机制，并对苏木素与胰蛋白酶作用活性的影响也进行了研究。

1器材

1.1仪器荧光分光光度计，美国CaryEclipse（瓦里安）产品；双光束紫外可见分光光度计TU－1901，北京普析产品；pH－3C型酸度计，上海精密科学仪器有限公司产品。

1.2药品牛胰蛋白酶（生化试剂），上海海洋生物技术有限公司产品；苏木素（生物染色剂BS），成都科龙化工试剂厂产品；硼酸（分析纯），成都科龙化工试剂厂产品。

2方法

2.1苏木素对胰蛋白酶活性影响在恒温水浴箱中将酪蛋白、胰蛋白酶和苏木素预热，按酶活性的测定方法，在胰蛋白酶与酪蛋白的酶解反应体系中加入不同体积的苏木素溶液，测定苏木素对酶活性的影响。胰蛋白酶活性及抑制常数测定参照文献［8］方法操作。

摘要：目的 研究南极磷虾胰蛋白酶基因的全序列，为低温酶的基因工程制备建立基础。方法 以南极磷虾基因组DNA为模板，利用特异性的巢式引物和随机引物，通过交错式热不对称PCR （Thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction， TAIL-PCR） 克隆南极磷虾胰蛋白酶基因序列，并进行序列分析。结果 测序结果表明，南极磷虾胰蛋白酶基因序列全长961bp，其中含有开放阅读框（ORF）长度为798bp，编码266个氨基酸。结论 本实验成功克隆了南极磷虾胰蛋白酶基因，为进一步了解该酶的结构、功能和基因工程制备奠定了基础。

关键词：南极磷虾；TAIL-PCR；胰蛋白酶；基因

胰蛋白酶是动物消化系统中主要的一种碱性蛋白水解酶，属丝氨酸蛋白酶家族，能专一性地水解肽链中赖氨酸和精氨酸的羧基所形成的肽键。南极磷虾因其独特的生活环境，体内的胰蛋白酶具低温高效性，有研究表明，南极磷虾胰蛋白酶在37℃和1～3℃时的活性分别是牛胰蛋白酶活性的12倍和60倍[1]。深入研究该酶对适冷性酶酶学性质的探究、蛋白质工程体系的完善具有极高的价值。目前获得南极磷虾胰蛋白酶的方法主要是组织提取，这不仅步骤繁琐而且成本高昂。本文旨在克隆南极磷虾胰蛋白酶基因，为进一步在工程菌中表达以大量获得南极磷虾低温酶奠定基础。

交错式热不对称PCR （Thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction， TAIL-PCR）是一种快速有效扩增已知DNA序列侧翼未知序列的方法[2-3]，由Liu和Whittier[4]首次报道该技术。目前许多基因的克隆都是通过这个方法获得，马春骥等[5]用TAIL-PCR成功克隆了绵羊肺炎支原体Y98株的未知基因Hsp70 （DnaK） ，张伟涛等[6]利用TAIL-PCR克隆了一种耐盐基因。

1 材料与方法

1.1材料 南极磷虾冰冻样本2012年取自南冰洋水域48.1区，限制性核酸内切酶BamHⅠ、EcoRⅤ、PrimeSTAR Max DNA Polymerase、Genome Walking Kit购自Takala公司，pEASY-Blunt Cloning kit、pEASY-T1 Cloning Kit购自全式金公司，TIANamp Marine Animals DNA Kit购自天根生化科技（北京）有限公司，DNA Engine Dyad PCR仪产自美国Bio-RAD公司，PCR引物由北京华大基因公司合成。

1.2南极磷虾基因组DNA的提取 南极磷虾为本课题组参加南极科考任务所取样品，取其尾节肌肉组织提取DNA，按照动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书进行基因组DNA提取。

1.3南极磷虾胰蛋白酶基因保守片段的克隆 根据文献及GenBank中已报道同源性较高的几种甲壳动物胰蛋白酶的氨基酸序列，得到两条简并引物。上游引物：CCTTACCAGCTCAGCTTCCAG；下游引物：TGCGGTGTTAGTCATAATCC。使用上述简并引物对基因组DNA进行PCR扩增，反应体系：template DNA 200ng，primer1 10pmol，primer2 10pmol，PrimeSTAR Max Premix （2X） 25μl，Sterilized distilled water to 50μl。反应条件：98℃ 10s，55℃ 5s，72℃ 5s，35个循环，72℃延伸5min，扩增产物在1%琼脂糖凝胶中进行电泳，将PCR产物用QuickGel Extraction Kit回收后克隆至pEASY-Blunt Cloning Vector，经酶切鉴定重组质粒测序。

摘　要：目的研究重组人Ⅱ型胰蛋白酶的性质及初步应用。方法用米氏方程和双倒数作图法确定米氏常数Km，Vmax值，BAEE法测定胰蛋白酶活性，将胰蛋白酶用于激活羧肽酶原B及细胞消化。结果重组人II型胰蛋白酶最适反应温度30℃，最适pH 7.6，以BAEE为底物，Km和Vmax分别为12.7μmol／和212.76μmol／min。EDTA~PMSF抑制酶活性，高于50℃条件下易失活。与牛胰蛋白酶相比，重组人胰蛋白酶对羧肽酶原B有更高的激活效率，细胞消化方面二者效果基本相同。结论温度及pH是影响酶稳定性的较大因素，重组人胰蛋白酶可替代牛胰蛋白酶用于激活羧肽酶原B和细胞消化。

关键词：重组人Ⅱ型胰蛋白酶；牛胰蛋白酶：性质；应用

中图分类号：Q55.9　文献标识码：A　文章编号：1672-979X(2010)11-0384-05

盐胰蛋白酶原为胰蛋白酶的前体，在胰脏合成。在Ca2+存在条件下，胰蛋白酶原可通过肠激酶或胰蛋白酶的自身激活，断开肽链N端6位赖氨酸和7位异亮氨酸残基之间的肽键，失去一段6肽，分子构象变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶可激活酶原，成为有活性的酶。商品化胰蛋白酶主要来源于猪或牛的胰腺。

人胰蛋白酶有I型和II型2种类型，根据等电点不同，又分为阳离子型和阴离子型。我们用基因工程方法得到了重组人阴离子型胰蛋白酶原(II型胰蛋白酶)，激活后得到高活性的人源胰蛋白酶。由于胰蛋白酶在溶液中稳定性较差，容易发生自降解，使酶活性下降。本实验研究了重组人II型胰蛋白酶的稳定性及部分性质，并初步研究了酶解激活羧肽酶B酶原及在细胞消化中的应用。

1　材料

1.1　试剂

牛胰蛋白酶(Sigma)；重组人Ⅱ型胰蛋白酶-(本实验室制备)；苯甲酸-L-精氨酸乙酯(BAEE，Sigma)：其余试剂为进口或国产分析纯。

[中图分类号]R445.1

[文献标识码]A

[文章编号]1005-0019(2009)7-0264-01

[摘要]目的:通过对胰腺炎患者尿胰蛋白酶原-2、血尿淀粉酶检查结果与超声检查结果的分析,评价尿胰蛋白酶原-2对急性胰腺炎诊断的敏感性与特异性。方法:对72例胰腺炎患者的声像图及血尿淀粉酶、胰蛋白酶原-2结果进行相关性分析。结果:72例急性胰腺炎患者中有65例尿胰蛋白酶原-2阳性,敏感性90.2%;72例非急性胰腺炎患者3例阳性,69例阴性,特异性为95.8%。经x2检验P

[关键词]胰腺炎;超声;血尿淀粉酶;尿胰蛋白酶原-2

急性胰腺炎(acutepancreatitis,AP)是临床上常见的急腹症,具有发病急、症状重的特点,极大地危害人们的健康,而临床医师对于急性胰腺炎的病程进展及治疗转归的监测尤为关注,及早地诊断与治疗急性胰腺炎具有重要的意义。淀粉酶作为诊断急性胰腺炎常用的检测项目,但敏感性与特异性欠理想。B超可以准确及时对各类型胰腺炎做形态学观察,为临床提供可靠依据。为进一步探讨尿胰蛋白酶原-2对胰腺炎的诊断价值,我们于2008年3月-2009年1月为72例急腹症患者检测尿胰蛋白酶原-2,同时检测血尿淀粉酶和B超,并将结果进行了比较分析。现报道如下。

1资料与方法

1.1对象:我院自2008年3月～2009年1月的住院患者,男性30例,女性42例,年龄16～78岁,平均年龄(53.2±146)岁,全部作超声1次或1次以上检查,尿胰蛋白酶原-2和血、尿淀粉酶检查,均经手术病理或临床各项检查最后确诊。1例因多脏器衰竭、感染性休克、脓毒败血症死亡,其余71例患者经临床治愈。诱发因素有胆囊炎、胆道结石等胆源性感染者49例,主胰管结石1例,胰管蛔虫1例,暴饮暴食、酗酒者12例,外伤后发生的有2例,孕妇发生的有2例,无明显诱因的1例,胆囊切除术后发生胰腺炎的有4例。临床表现为上腹剧痛、恶心、呕吐、发热、上腹部压痛及黄疸等。