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医学检验检测方法

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医学检验检测方法范文第1篇

关键词:时间分辨荧光免疫法;酶联免疫吸附法;放射免疫法;化学发光法

作为传染科临床较为常见的传染病之一,乙型肝炎的发病率近年来逐渐升高,目前为止,全球大概有20亿左右的人口感染乙肝病毒,因阴性肝炎病毒感染导致死亡的人次大概100万,所以,及时、准确的诊断对于乙型肝炎患者有着非常重要的临床意义[1]。

1资料与方法

1.1一般资料 选取我院传染科2014年1月~12月来我院门诊体检的1343例乙型肝炎患者,其中男性患者709例,女性患者634例,年龄在26~76岁,平均年龄(45.3±8.3)岁,病程(6.3±1.3)年。乙型肝炎患者乙肝五项指标的诊断标准以标准的Abbot药盒的检验结果作为"金标准",4种不同的乙肝五项指标检测法的检验结果分别和标准的Abbot药盒的检验方法相比较,对照其灵敏度、符合率和特异度。

1.2检测方法 对1343例乙型肝炎患者于清晨进行空腹采血,采取5ml静脉血液,自然存放2h后,应用300r/s离心15min,分离血清,放置于零下20℃的环境进行保存。分别应用时间分辨荧光免疫法(SYM-B10型时间分辨荧光仪由上海新波生物技术有限公司生产,试剂由上海新波生物技术有限公司生产)、酶联免疫吸附法(酶免仪由北京普朗新技术公司生产,试剂盒由上海科华生物工程实业有限公司生产)、放射免疫法(FJ-2001型Y-免疫计数器由西安262工厂生产,检验试剂由潍坊3V生物有限公司生产)、化学发光法(Axspm化学发光分析仪和检测试剂均由美国雅培公司生产)对血清进行检测,检测过程中应严格根据试剂盒的说明书执行操作。Abbot标准药盒由美国sigma公司生产。

1.3统计学分析 采用IBM SPSS 19.0统计软件进行数据分析,计量资料用x±s表示,观察组和对照组组内、组间比较采用t检验;计数资料用χ2检验,P

2结果

检验结果如表1所示,将4种乙型肝炎乙肝五项指标的检测方法的检测结果分别与Abbot标准药盒法检验结果相对比,放射免疫检测法与标准药盒的符合率为97.3%,灵敏度为97.3%,特异度为99.1%;酶标检测法与标准药盒的符合率为93.5%,灵敏度为93.5%,特异度为99.1%;时间分辨荧光免疫检测法与标准药盒的符合率为99.6%,灵敏度为99.6%,特异度为99.3%;化学发光检测法与标准药盒的符合率为98.8%,灵敏度为98.8%,特异度为99.2%。

3讨论

相关文献显示,临床对于乙型肝炎患者的诊断通常应用乙肝五项的检测结果进行判定,作为乙肝病毒核心抗原的一部分,e抗原具备可溶性,和乙型肝炎病毒感染的相关性良好,可以作为判定乙型肝炎患者乙肝病毒传染性强弱的标准[2]。乙肝表面抗体对于乙型肝炎病毒感染的患者具备保护的作用,具有定量价值,可以反应患者病情的变化;核心抗体在乙型肝炎患者感染乙肝病毒后最早出现,可以作为乙肝早期检测的特征性抗体[3]。放射免疫检测的精度可以达到10~12mol/L,相对于其他检测方式更为精确,但是由于该检测方式所使用的放射剂会对患者的身体健康造成危害,且操作较为复杂,出检验报告的时间较长,因此难以在临床广泛应用[4]。酶联免疫吸附法可以有效避免对患者的身体健康危害及对环境的污染,而且操作更为简单,在临床应用较为广泛,但酶联免疫吸附法的灵敏度和放射免疫检测法相比较低,容易发生假阳性或漏检[5]。化学发光检测法对于单个血清样本的检测速度较快,比较适合做急诊检验,灵敏度较高,精确度和自动化程度也较高,但化学发光检测法仪器发光的过程比较短,不能对血清样品进行重复检验,所需要的成本较高,不适合在临床广泛应用。时间分辨荧光免疫技术相对于其他三种检测方式特异性最高,可以对样本进行重复检测且稳定性较好,精度更高,虽然时间分辨荧光免疫技术目前为止在临床没有得到广泛应用,但相对于其他三种检测方式,该检测方式对于乙肝五项指标的检测更具有临床意义。本次研究显示,时间分辨荧光免疫检测方法相对于其他三种检测方法对于乙肝五项指标的检验符合率、敏感度和特异度更高,和相关文献研究相似,具有更高的临床应用价值。

参考文献:

[1]杨京民.ELISA法对乙型肝炎"两对半"检测结果影响因素的分析[J].国际检验医学杂志2011,32(21):2251-2252.

[2]杨丽平,姚萃.乙型肝炎五项测定对乙型肝炎诊断的意义[J].当代医学,2015,4(21):86-87.

[3]李军民,冯陆.300例乙肝患者乙肝五项检验结果分析[J].中国医药指南,2012,11(3):121-123.

医学检验检测方法范文第2篇

关键词:TP-PA,TP-ELISA,TRUST,梅毒

梅毒是由苍白(梅毒)螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病,主要通过性途径传播,临床上可表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒(胎传梅毒)等,检测梅毒的方法有:快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、TP-PA和TP-ELISA,以及TRUST[1]。本文主要探讨了TP-PA、TP-ELISA、TRUST三种检测方法在梅毒检测中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

我院与2011年9月至2013年6月期间,共接收80例梅毒患者,男性60例,女性20例,年龄在1岁至61岁间,平均年龄为(31.0±17.8)岁,其中有5例患者属于潜伏梅毒期,10例患者属于一期梅毒,45例患者属于二期梅毒,20例患者属于三期梅毒。回顾性分析,所有患者均采用TP-PA、TP-ELISA、TRUST三种检测方法同时检测,分析和比较三种方法的检测结果。

1.2 方法

所有患者均与早晨空腹抽取静脉血,取血清作为检测标本,所有血清标本均先采用TP-ELISA检测法进行筛查,试剂均由上海科华生物股份有限公司提供;然后再采用上海荣盛生物科技有限公司所提供的试剂进行TRUST检测;最后采用由富士瑞必欧株式会社所提供的试剂进行TP-PA检测[2]。

所有酶标仪均采用型号为芬兰THER-MO-MK3,和型号为THER-MO-PLUS的洗板机进行检测,三种检测方法均严格根据各自试剂盒中的操作说明进行检测。

1.3 统计学方法

所有数据均采用统计学软件SPSS13.0进行分析和处理,计数资料采用X2检验,计量资料采用t检验,当P

3 讨论

梅毒是由苍白(梅毒)螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病,临床上可分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒(胎传梅毒)等,梅毒发病率较多,根据WHO估计,全球每年约有1200万新发病例,主要集中在南亚、东南亚和次撒哈拉非洲,近年来,梅毒在我国也增长较为迅速,已经成为了报告病例数最多的性病,在所报告的梅毒中,其中潜伏梅毒占的例数最多,其次一期梅毒和二期梅毒也较为常见,性接触是梅毒的主要途径。本文主要探讨和分析了TP-PA、TP-ELISA,以及TRUST三种检测方法在梅毒检测中的意义。

本次研究采集了80例梅毒患者的血清作为标本进行研究,将本组血清分别采用TP-PA、TP-ELISA、TRUST三种检测方法进行检测,经研究发现,TP-PA、TP-ELISA、TRUST的检出率分别为98.8%、95%、62.5%,可见TP-PA、TP-ELISA的检出率均明显高于TRUST(P0.05)。同时我们还分析了三种检测方法与不同时期梅毒的关系,发现二期和三期梅毒的检出率都较高,其中TP-PA在潜伏梅毒、一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒的检测率均要高于其他两种检测方法,检测率几乎均高达100%,而TRUST在潜伏梅毒中的检出率却低至0%。笔者分析,TP-ELISA检测方法是通过基因重组合成梅毒特异性抗原包被,利用双抗原夹心法有效的通过仪器检测出患者血清中梅毒特异性抗体;TP-PA是利用梅毒螺旋体抗原包被的纯液滴在患者的血清中,可以有效促进血清红细胞的凝集,从而排除各种非特异性的反应[3]。因此TP-ELISA和TP-PA的检出率高达95%以上。而TRUST是利用一类脂质作为抗原进行检测梅毒,但是在检测的过程中其他破坏机体也会对血清产生梅毒非特异性的抗体,因此经常会出现误诊的现象[4]。

虽然TP-PA与TP-ELISA检测法的准确率均较高,对梅毒均具有很强的敏感性和特异性,但是二者同时也存在一定的利与弊:TP-PA检测法具有很强的敏感性和特异性,根据相关报道研究其敏感性和特异性均高达100%,可以非常准确的检测出患者是否患有梅毒,但是其的检测时间较长,标本与空气的接触时间也较多,如果需要检测大量的血清,那么原始的数据就无法得到保存,检测结果的可靠性也就会相对下降[5]。TP-ELISA检测法操作简单,可以直接采用酶标仪对标本进行数据分析,可以最大程度的降低了人为因素和环境因素而产生误诊的概率,而且对原始数据的保存也较为容易,从而实现了快速、自动化、准确、客观化等目的,可以用于大量标本的筛查,但是其检出的阳性患者只能被诊断为正在感染或者曾经感染,不能作为早期诊断的方法,因此会存在一定的漏诊现象[6]。

综上所述,TP-PA检测法的检出率较高,可用于对梅毒确诊,而TP-ELISA检出率也比较高,但较适合用于大批量的筛查,TRUST则可用于对判断疗效和病情活动程度。

参考文献:

[1]丁莉,任宏新.TRUST、TP-ELISA与TPPA法检测梅毒的临床应用[J].宁夏医学杂志,2010,32(1):87-88.

[2]袁余,李冬冬,王婷婷,等.3种梅毒血清检测方法的应用评价[J].预防医学情报杂志,2013,29(3):242-244.

[3]徐仁根.采用TRUST、TPHA、TP-ELISA、TP-PCR检测梅毒的对比评价[J].现代诊断与治疗,2012,23(11):1925-1926.

[4]花南霞,苏志文.TP-ELISA法与TRUST法同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用[J].检验医学与临床,2012,9(16):2079-2080.

医学检验检测方法范文第3篇

关键词:梅毒;ELISA;TRUST;TPPA;检验效果

梅毒是一种最为严重的性传播疾病,梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)是主要的致病原因。TP会侵犯皮肤黏膜及相关神经、心血管、骨骼等重要组织器官,进而造成慢性病变,严重影响到患者的健康[1]。目前,主要依靠实验室检查结果对梅毒进行筛查与确诊。为合理选择检测方法,本次研究对ELISA、TRUST、TPPA三种检测方式进行对比研究,现将情况报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 从2012年6月~2014年12月本院发现的梅毒患者中选取60例,均满足梅毒检验标准GB15974而确诊。其中,男27例,女33例;年龄在25~53岁,平均年龄为(35.2±2.4)岁。将患者随机分为三组,A组、B组、C组,每组20例。比较分析三组的一般资料,发现差异不大(P>0.05),可进行比较。

1.2方法

1.2.1试剂来源 TRUST试剂为上海荣盛生物技术有限公司生产,ELISA试剂由上海科华生物工程股份有限公司生产,TPPA试剂则是日本富士瑞比欧株式会社生产的产品。上述试剂均通过卫生部部门的批检,确认合格后使用。

1.2.2检验方法 ①A组:本组血清标本严格按照ELISA试剂盒说明书进行操作;②B组:本组采用TRUST试验进行检测,方法是把VDRL抗原与含有特制的甲苯胺红溶液相混合,观察是否出现由痛血清反应素引起的凝集块;③C组:采用TPPA试验进行检测,方法是在室温条件下,在U型板上利用稀释液将血清稀释,并分别加入致敏与未致敏明胶颗粒,再孵育2h后确认结果。

1.3统计学方法 对试验数据运用SPSS16.0统计学软件进行分析,并利用χ2检验相关计量资料。当P

2 结果

2.1对比梅毒检验结果 A组检出17例,阳性率为85.0%;B组检出18例,阳性率为90.0%;C组检出20例,阳性率为100%。由此可见,TPPA对梅毒的阳性检出率明显高于TRUST与ELISA,差异显著,存在统计学意义(P

2.2对比三种方法的敏感性与特异性 TPPA的特异性与敏感性分别是98.3%、98.9%;而TRUST的特异性与敏感性均较低,分别为88.2%、85.6%;ELISA的特异性与敏感性位于二者之间,分别为95.3%、96.4%。因此,TPPA和另两种检测法在特异性与敏感性方面存在明显差异,具有一定的统计学意义(P0.05)。

3 讨论

近年来我国梅毒发病率有明显的升高趋势,究其原因可能与城市流动人口增多、观念的转变以及血液制品的大量使用有关。梅毒的常见传播途径包括性传播与血液传播,也可通过哺乳、输血、接吻、意外伤害等途径染病。梅毒螺旋体(TP)是引发该病的主要致病原因。当TP侵入人体后,人体会产生特异抗螺旋体类抗体(TP-Ab)与一些非特异的抗类脂质性抗体。特异性梅毒螺旋体抗体主要有IgM与IgG两种,一般在感染TP后3~6周后出现[1]。IgM抗体会伴随着疾病的发展而逐渐消失,但IgG抗体会长时间留在体内,甚至终生存在。医学界也把TP-Ab作为诊断梅毒的主要检测手段,目前,临床上诊断梅毒的血清学检验方法种类较多,各有优劣,下面主要介绍临床上常用的三种检测方法。

3.1 ELISA梅毒血清学检测方法 伴随着血液检测技术的发展,形成了很多新的血清学检测方法,包括ELISA。该检测方法是在微孔板上包被梅毒螺旋体抗原,采用双抗原夹心法,从而提升了对TP的特异性与敏感性。据相关研究显示,TPPA与ELISA在敏感性与特异性方面都比较相似,均具有较好的敏感性与特异性。由于ELISA检测法能同时检测到IgG与IgM等特异性抗体,但随着有效的治疗后,IgG抗体仍可能被检出,个别患者甚至终生都可检出。因此,ELISA检测法不能作为评定患者临床治疗效果与病情复发及再次感染的依据。此外,特异性梅毒血清学试验存在一定的局限性,可能会受到一些生理或病理方面的影响,导致假阳性率。一些老年患者在相关基础疾病的影响下,机体会生成抗类脂质抗体抗原,也可能生成梅毒螺旋体抗体的交叉抗原[2]。

3.2 TRUST梅毒血清学检测方法 这属于非特异性梅毒筛选试验,具有很多优点,比如,价格低廉、测定效价高、操作简单、检测快等。其主要原理是运用相关技术从牛心中提取出卵磷脂、胆固醇、心磷脂等,在特制的甲苯胺红溶液中重悬这三种物质组成的性病研究室WDRL抗原。通过检测血清或血浆中的相关反应素进行判定。但伴随着相关医学技术的进步,发现该试验的敏感性并不强。不同时期检测得出的检出率也存在较大的差异。另外,伴有相关疾病的患者、孕妇等人群体内由于存在类似的类脂质抗体,也可能检出假阳性,又称为低滴度生物学假阳性。但据相关研究证实,TRUST试验滴度会受到患者病程的影响。处于疾病活动期的感染者,TRUST的滴度会相应降低。患者感染梅毒后就会提高TRUST滴度[3]。因此,观察滴度变化对评定梅毒是否复发或再次感染是具有较高的临床价值的。

3.3 TPPA梅毒血清学检测方法 该检测方法的敏感性与特异性均很高,其检测原理是包被致敏红细胞与明胶颗粒的过程中使用纯化的致病性螺旋体抗原进行检测。但该检测方法程序过于繁琐,并对医师的操作水平有着严格的要求。另外,检测成本较高,患者会面临不小的经济压力。由于该方法的检测原理和ELISA比较相似,会同时检出IgG与IgM等抗体,因此,不能作为病情复发与再次感染的判断依据。

综上可知,三种检验方法各有优劣,对于疑似阳性的标本,建议采用TPPA进行检验。若需观察治疗效果及评判是非再次感染复发,则宜采用TRUST试验法。如需进行大批量检验或筛查高危人群的时候,一般选择ELISA法。另外,还必须考虑到患者的临床症状、病情、病史等进行诊断。

参考文献:

[1]谢昭宁.多种不同梅毒检验方法检测梅毒螺旋体的结果准确率比较[J].安徽医药,2013,17(5):797-798.

医学检验检测方法范文第4篇

    当检验结果与临床表现不符时应加强与检验医生的沟通工作,对结果进行合理的解释。仅关注某一个检测项目,而忽略了疾病变化过程中所有检测项目的变化。目前的教学中均以检验项目的参考值、结果分析及临床意义为重点,但许多疾病的某一检测项目会有相同或相似的变化,而同一疾病的不同阶段某一检测项目也可能呈现不同的变化。所以,应加强检验项目与疾病关系的综合分析。比如肝功能检测一章,课本上往往对肝功能检测3大方面(蛋白质功能检测、胆红素代谢功能检测、血清酶类检测)进行重点讲解。在蛋白质功能检测一节,又分为白蛋白及总蛋白水平升高和降低以及球蛋白和总蛋白水平升高和降低等。那么,是否可以尝试一种新的方法,按照内科学中肝脏常见疾病依次讲解,如急性重症肝炎、慢性重症肝炎、肝硬化、肝癌等疾病过程中,应选择哪些监测指标;在肝性昏迷的患者中需要监测哪些指标。根据疾病的需要详细地进行讲解,使临床医学生更能明白针对这些患者应该开什么样的化验单,如何使用这些检测项目排除某些疾病等,从而加强临床医学生疾病综合分析的能力。

    教学内容脱离临床在临床医学生实验诊断学教学中应以“临床应用为导向,兼顾检验医学”。应向学生介绍实验方法学,了解每种检测方法的灵敏度和特异度,根据不同需要合理选择检测方法[5]。比如梅毒的血清学检测,在临床应用中主要有3种方法:梅毒螺旋体特异性抗体检测、非特异性快速梅毒过筛实验、梅毒螺旋体明胶凝集试验。那么,哪种试验适合作为初筛,哪种试验适合作为确诊,哪种试验适合判断疗程等,应结合实际病例进行讲解。目前临床实验室已采用化学发光法进行梅毒特异性抗体检测,灵敏度和特异度均较以前的检测方法高,且方便快捷,可更好地服务临床,尤其是急诊患者,但临床医生对此还不太了解。另外,梗阻性黄疸时,理论上尿胆红素检测为强阳性,尿胆原检测为阴性。但因为尿胆原检测过程中,当尿胆红素水平较高时,会干扰尿胆原的检测,所以会导致梗阻性黄疸患者尿胆原假性轻度增高的现象。

    应重视新技术、新项目的介绍。实验诊断学教学严重滞后于检验医学的发展。虽然新版教材已更新了教学内容,涵盖了许多临床的新技术和新项目,但是目前实践性教学内容和教学安排仍偏重“四大常规”和血液骨髓学检验等手工操作项目,远不能概括如流式细胞技术、基因芯片、自身免疫性疾病的实验诊断、药物浓度监测等许多已在临床应用的新技术和新项目。教学中甚至还包括已经淘汰的检测项目,如出血时间的测定、血块收缩试验、毛细血管脆性试验等;而一些临床上常用的新检测方法却未提及。另外,实验诊断学的设施还停留在手工操作的水平,而临床上检验项目基本上由自动化的仪器完成,两者形成了巨大的反差。

    所以,应加强新项目、新技术的介绍,这不仅为新项目的开展和普及打好思想基础,也有助于临床医学生开阔视野,拓展思路,培养创新的意识和动力。比如卵巢癌诊断过程中新的检测项目人附睾蛋白4检测,是最新发现的卵巢癌诊断标志物,特异性和灵敏度均高,与现有肿瘤标记物糖类抗原125结合更具有临床价值。实验诊断学教学内容应以培养学生临床思维能力为目标,通过这门课程的学习,达到“三会”:会开化验单,会选择检验项目,会运用检验结果进行临床分析。

    所以,在实验诊断学教学内容的安排上应以“临床应用为导向,兼顾检验方法”;应与时俱进,更新实验诊断学理论课教学内容;尝试在实习课上让学生充分体会理论课所讲授的内容,实习课上增加临床分子生物学、自身免疫性疾病实验室诊断、药物浓度监测、流式细胞术在临床疾病诊断中的应用等内容,加强实验诊断技术与临床的紧密结合,加强知识的连贯性、应用性、实效性。这样,临床医学生才能通过实验诊断学课程的学习,对临床上常用的检验项目、检验方法及每个检验项目的临床意义有较为全面的了解和认识,并可以运用检验结果进行综合的临床分析。

医学检验检测方法范文第5篇

    仅关注某一个检测项目,而忽略了疾病变化过程中所有检测项目的变化。目前的教学中均以检验项目的参考值、结果分析及临床意义为重点,但许多疾病的某一检测项目会有相同或相似的变化,而同一疾病的不同阶段某一检测项目也可能呈现不同的变化。所以,应加强检验项目与疾病关系的综合分析。比如肝功能检测一章,课本上往往对肝功能检测3大方面(蛋白质功能检测、胆红素代谢功能检测、血清酶类检测)进行重点讲解。在蛋白质功能检测一节,又分为白蛋白及总蛋白水平升高和降低以及球蛋白和总蛋白水平升高和降低等。那么,是否可以尝试一种新的方法,按照内科学中肝脏常见疾病依次讲解,如急性重症肝炎、慢性重症肝炎、肝硬化、肝癌等疾病过程中,应选择哪些监测指标;在肝性昏迷的患者中需要监测哪些指标。根据疾病的需要详细地进行讲解,使临床医学生更能明白针对这些患者应该开什么样的化验单,如何使用这些检测项排除某些疾病等,从而加强临床医学生疾病综合分析的能力。

    2教学内容脱离临床

    在临床医学生实验诊断学教学中应以“临床应用为导向,兼顾检验医学”。

    2.1应向学生介绍实验方法学,了解每种检测方法的灵敏度和特异度,根据不同需要合理选择检测方法。比如梅毒的血清学检测,在临床应用中主要有3种方法:梅毒螺旋体特异性抗体检测、非特异性快速梅毒过筛实验、梅毒螺旋体明胶凝集试验。那么,哪种试验适合作为初筛,哪种试验适合作为确诊,哪种试验适合判断疗程等,应结合实际病例进行讲解。目前临床实验室已采用化学发光法进行梅毒特异性抗体检测,灵敏度和特异度均较以前的检测方法高,且方便快捷,可更好地服务临床,尤其是急诊患者,但临床医生对此还不太了解。另外,梗阻性黄疸时,理论上尿胆红素检测为强阳性,尿胆原检测为阴性。但因为尿胆原检测过程中,当尿胆红素水平较高时,会干扰尿胆原的检测,所以会导致梗阻性黄疸患者尿胆原假性轻度增高的现象。

医学检验检测方法范文第6篇

【关键词】 酶联免疫吸附法;梅毒螺旋体感染;临床检验

DOI:10.14163/ki.11-5547/r.2017.01.035

梅毒是因为梅毒螺旋体感染引发, 对病原体进行检测是诊断梅毒的主要手段。临床中通常选择TRUST对血清梅毒螺旋体自身的表达予以检y, 此方法并无显著的特异性, 并且会出现假阳性结果[1, 2]。所以, 怎样提升梅毒患者的诊断正确率是临床中主要关注的课题。ELISA为新型诊断手段, 此方法在操作中较为简单, 并且具有良好的自动化程度[3-5]。本研究分析ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验效果, 现将研究过程以及结果进行如下报告。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择本院于2015年2月~2016年6月收治的80例疑似梅毒螺旋体感染患者为研究对象, 其中男50例, 女30例, 年龄最大60岁, 最小22岁, 平均年龄(40.6±6.8)岁。经临床确定患者为60例, 其中20例患者为Ⅰ期, 25例患者为Ⅱ期, 15例患者为Ⅲ期。

1. 2 纳入及排除标准 ①入选标准:所有患者均自愿参与此次研究。②排除标准[3]:排除恶性肿瘤患者、血液系统疾病患者、代谢系统疾病患者、心脏病以及肝脏病患者、无良好依从性患者、精神类疾病患者。

1. 3 方法 80例疑似患者均分别进行ELISA以及TRUST检测。ELISA法选择北京科美东雅生物技术有限公司生产的ELISA试剂, 随后采用美国生产型号为BIO-RAD伯乐酶标仪, 对患者的静脉血抽取3~5 ml, 随后将其放置在试管中, 对血清予以分离, 根据试剂盒说明书予以操作。TRUST选择上海荣盛生物技术有限公司生产的TRUST试剂, 随后选择型号为WZR-H600爱林数显混匀器, 患者的静脉血抽取3~5 ml, 随后将其放置在试管中, 对血清予以分离, 依据试剂盒说明书予以操作。

1. 4 观察指标 观察80例疑似患者分别经过不同方法检测的敏感性、特异性, 比较两种检测方法阳性诊断正确率。

1. 5 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P

2 结果

80例疑似患者经TRUST法检测后, 45例患者检测结果为阳性, 15例患者检测结果为假阳性, 8例患者检测结果为假阴性, 12例患者检测结果为阴性, 敏感性为84.91%(45/53), 特异性为44.44%(12/27), 阳性诊断正确率为75.00%(45/60);

80例疑似患者经ELISA法检测后, 58例患者检测结果为阳性, 8例患者检测结果为假阳性, 2例患者检测结果为假阴性, 12例

患者检测结果为阴性, 敏感性为96.67%(58/60), 特异性为60.00%(12/20), 阳性诊断正确率为96.67%(58/60), 两种检测方法阳性诊断正确率比较差异具有统计学意义(χ2=11.5820, P

3 讨论

人体感染梅毒的主要途径为性接触, 梅毒在临床中分为Ⅰ期、Ⅱ期以及Ⅲ期。而Ⅰ期、Ⅱ期梅毒临床中称之为早期梅毒, 此患病时期无严重传染性, 对机体无较大的损伤, Ⅲ期梅毒患者为晚期, 此患病时间传染性较为严重, 且患者患病时间过长, 对机体产生了严重的损伤[6-9]。临床中梅毒发病机制并不明确, 同时无研究证实, 然而可以确定的是梅毒传染性较强, 当机体产生梅毒螺旋体感染后, 会降低自身的生活质量, 并且增加患者的心理负担, 发展为晚期时会出现死亡现象。所以需要及时对疾病进行诊断, 及时治疗。

目前而言, 伴随现代医学的完善以及发展, 临床已提高了梅毒螺旋体感染的诊断率, 而ELISA法是临床中广泛应用的一种技术, 将抗原以及抗体在固相载体表面处进行吸附, 抗原体经酶标记后予以检测, 通过洗涤方法清除液相中的游离成分[10-12]。所以, 可以经底物颜色对免疫反应进行判断, 然而需要重视的是颜色深浅和抗体抗原量呈现正相关。ELISA法将抗体自身反应的中的特异性以及酶化学反应进行相互结合, 从而形成一种有效的检测手段。此外, ELISA法在操作过程中较为简单, 无需选择特殊仪器, 具有重要的临床价值。TRUST为非梅毒螺旋抗体血清检验, 主要是对梅毒进行筛选, 并对临床治疗效果进行观察[13-15]。大量的临床研究证实, TRUST方法并不具备特异性, 所以在对非梅毒螺旋体抗体感染患者进行检验的过程中, 同样会出现反应素, 例如麻风、传染性单结核、红斑狼疮以及类风湿性关节等[16-17]。与此同时, 老年患者以及吸毒人员经此方法检测后同样会出现生物学假阳性结果。TRUST方法和ELISA法相比较而言, 特异性以及敏感性较低, 因此越来越少在临床中使用。

综上所述, 将ELISA法应用于梅毒螺旋体感染患者诊断中可提升阳性诊断正确率, 同时此检测手段具有较高的特异性以及敏感性, 在临床中可将此检测方法进行推广以及应用。

参考文献

[1] 东立. ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床价值及应用.临床和实验医学杂志, 2013, 12(1):61, 63.

[2] 王莹. ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验价值分析.中国医药指南, 2015(28):62-63.

[3] 陶琦.探讨ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床效果.大家健康(下旬版), 2016, 10(1):60.

[4] 海尔尼沙. ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验价值分析.医学美学美容(中旬刊), 2013(9):134-135.

[5] 邹红霞, 郝军, 倪丽娜, 等.四种梅毒螺旋体抗体血清学试验方法的临床评价.国际免疫学杂志, 2014, 37(3):260-262.

[6] 丁兆明.诊断梅毒螺旋体感染中ELISA法的检验分析.国际医药卫生导报, 2016, 22(7):996-998.

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医学检验检测方法范文第7篇

【关键词】淋球奈瑟球菌法;直接图片染色法;培养鉴定法;聚合酶链反应法;斑点金免疫渗滤法

【中图分类号】R7592【文献标志码】A

淋病作为目前临床上一类发病率较高的性传播疾病,据调查研究资料显示,每年新增的淋病病例可高达6000万[1]。由于淋病主要病原体为淋病奈瑟菌,在发病过程中可诱发附睾炎、盆腔炎等,对患者的身心健康带来了较大的伤害,因此,对于淋病奈瑟球菌的早期诊断至关重要。目前实验室中对淋病奈瑟球菌的检测方法较多,包括直接涂片染色法、培养鉴定法、聚合酶连反应法及斑点金免疫渗滤法[2]。本文现针对上述四种检测方法在淋病奈瑟球菌中的临床应用价值展开分析,将研究结果总结报告如下。

1资料与方法

11一般资料

采取随机数字表法选取我院自2012年8月至2014年8月来院检查的400例疑似淋病奈瑟菌感染患者作为临床研究对象,全部患者均在我院行尿液及分泌物检查,其中男198例,女202例,年龄在30至52岁之间,平均年龄为(432±25)岁,病程在1至3个月之间,平均病程为(21±06)个月。

12标本采集

由门诊医师对该组患者进行标本采集,其中对于男性患者标本的采集方法为:将一次性拭子插入到男性患者尿道内的2至3cm处对分泌物进行采集。对于女性患者标本的采集方法为:将一次性拭子插入到宫颈口05cm至1cm处进行采集,将上述所采集到的分泌物分别置于4支无菌管中,将其放置在35℃的环境中予以保存后及时送检。

13主要仪器与设备

淋球菌培养基购自天津市金章科技发展有限公司,氧化酶试剂、APINH生化鉴定纸条由法国生物梅里埃公司提供,快速革兰染色液由珠海备索生物技术有限公司提供,聚合酶链反应试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司,斑点金免疫渗滤所用的试剂购买自蓝波生物科技有限公司。

14检测方法

直接涂片染色法:将采集到的分泌物立即进行涂片出后直至风干,对其采用革兰染色法于显微镜下进行观察。于胃镜下可见涂片染色呈粉红色或红色,形状呈半圆形对称排列或肾形对称作为淋病奈瑟球菌阳性。

培养鉴定法:在进行培养前对所使用的培养基于35℃环境中予以保温,将采集到的分泌物直接连续划线接种于TM淋球菌专业培养基上,后将其放置于5%二氧化碳培养箱内连续培养1~2d。

聚合酶连反应法及斑点金免疫渗滤法严格按照各试剂说明书进行操作。

15统计学指标

采用SPSS180统计软件对本次研究所取得的数据进行分析,计数资料采用χ2检验,两种方法的一致性检验采用Kappa分析,以P

2结果

21四种淋病奈瑟球菌检测方法对疑似淋病奈瑟球菌感染患者阳性检出率对比培养鉴定法阳性检出率为2175%,直接涂片染色法阳性检出率为1700%,斑点金免疫渗滤法阳性检出率为2100%,聚合酶链反应法阳性检出率为2500%,培养鉴定法与斑点金免疫渗滤法阳性检出率相比无显著差异(χ2=289,P>005);培养鉴定法分别与直接涂片染色法、聚合酶连反应法阳性检出率相比具有显著差异(χ2=435,P

22四种检测方法对淋病奈瑟球菌的符合度对比

培养鉴定法检测淋病奈瑟球菌阳性例数87例,其中直接涂片染色法检测为阴性22例(5500%),斑点金免疫渗滤法检测为阴性7例(175%),聚合酶连反应法检测为阴性2例(500%)。另外,直接涂片染色法检测出阳性3例(075%)与斑点金免疫渗滤法检测出阳性4例(100%),在行培养鉴定法检测时为阴性,聚合酶链反应法检测出阳性15例(3750%)而培养鉴定法检测为阴性。培养鉴定法与聚合酶连法在检测淋球菌方面存在一致性(K=0890,P005)。见表2。

3讨论

目前临床上用于诊断淋病奈瑟球菌的方法种类较多,本次研究选取了其中四种检测方法包括直接涂片染色法、培养鉴定法、聚合酶连反应法及斑点金免疫渗滤法进行比较,由于临床上将培养鉴定法作为检测淋病奈瑟球菌的金标准,为此,我院将其作为对照组来比较其他三种检测方法在淋病奈瑟球菌诊断中的应用价值[3]。

本次研究结果显示,采用直接涂片染色法在淋病奈瑟球菌检测中的阳性检出率最低,仅达1700%,该结果与以往的研究结果不一致[4]。推测原因可对直接涂片染色剂结果造成的因素较多,包括标本取材是否得当、染色效果是否明显、患者在进行标本取材前是否服用过抗生素、检验人员是否按照严格规定进行操作等[5]。另外,研究结果显示,斑点免疫渗滤法的淋病奈瑟球菌的阳性检出率为2100%,培养鉴定法的淋病奈瑟球菌的阳性检出率为2175%,二者无显著差异,这与以往研究报道基本一致[6]。而培养鉴定法仍作为目前一种用来诊断淋病奈瑟球菌最为可靠的手段,在标本取材上的要求较高,若患者在行标本取材之前服用抗生素类药物,则可对检测结果造成一定的影响,使其临床效果不佳[7]。

由于淋病奈瑟球菌可极易受到温度的影响,这就需要医师在对标本进行采集时注意保暖,即时送检避免在外放置时间过长,尤其当外界环境气温过低时,应当引起重视,避免因标本在温度降低的环境下产生假阴性的情况,对检测结果造成影响[8]。斑点金免疫渗滤法与培养鉴定法在淋病奈瑟球菌阳性检出率所得结果基本一致,因此,临床上可将斑点金免疫渗滤作为早期诊断及治疗的可靠参考价值[9]。本次研究中还显示了,行聚合酶链反应法进行检测时,可见其阳性检出率最高,高达2500%,这与以往研究结果基本一致[10]。原因是此种检测方法不易受到外界因素的影响,但其同样受到所处环境温度及患者是否服用抗生素治疗的干扰,且检测所需费用较高[11]。此外,据本次研究结果显示,由于四种检测方法的操作过程及原理各不相同,这就使得以上四种方法在检测淋病奈瑟球菌所得符合度也各不一致[12]。

综上所述,直接涂片染色法引起具有快速操作简便、价格经济的优势在诊断淋病奈瑟球菌方面可起到重要的临床提示作用,而斑点金免疫渗滤法同样可作为诊断淋病奈瑟球菌的参考手段[13]。但对于部分处于慢性期的患者或绝大多数的女性患者,选择培养鉴定法检测是必不可少的[14]。聚合酶链反应法虽具有较高的灵敏度,且不易受到外界因素的影响,但其对设备要求较高,所花费用较多,无法适用于基层的医院中[15,16]。因此,我们主张在临床工作中对微生物进行诊断时,建议选择两种以上的检测方法以保证阳性检出率,为临床合理治疗提供可靠依据。

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医学检验检测方法范文第8篇

摘 要 目的:探讨实验室3种检测方法检测SLE的比较和评价。方法:抗ds-DNA的测定用酶联免疫法、抗ENA抗体采用免疫印迹法、红斑狼疮细胞(LEC)的检验采用去纤维法。结果:在35例抗ds-DNA阳性中男性仅2例,其余33例均为女性。在35例抗ds-DNA阳性中,LEC24例占抗ds-DNA阳性的68.5%,ENA多肽阳性32例,占抗ds-DNA阳性的91%。结论:抗ds-DNA的检测对SLE有较强的特异性,是SLE免疫学检测的首选方法;抗ENA抗体不是诊断SLE的专用指标,但其灵敏度,特异性及检出率仍优于LEC的检测,有条件的实验室可以淘汰LEC的检测。

关键词 SLE 检测方法 评价

材料和方法

对象:252例来自内科(主要是肾病内科)和皮肤科疑为SLE患者,年龄13~55岁。20例健康体检者,作为阴性对照。

材料:抗ds-DNA试剂盒,ENA多肽抗体谱试剂盒(厦门英科新创科技有限公司提供)。

方法:①红斑狼疮细胞(LEC)的检验:采集患者静脉血2~3ml于试管中用竹签搅拌约10分钟,呈37℃温箱90~120分钟,取出1500转/分离心10分钟,吸去上层红色上清液,余下血细胞悬液转入血细胞比容管,以3000转/分离心20分钟后取出,用毛细吸管十分小心的将上层液弃去,然后用毛细吸管仔细地在沉淀与上清液交界处取1滴白细胞悬液,置于玻片上混匀,涂2~3张,待干,用瑞氏染色镜检,先低倍,后高倍,最后用油镜确认。②抗ds-DNA的测定用酶联免疫法(EIA)和抗ENA抗体(免疫印迹法),按试剂说明书操作。 结 果

对照组:20例健康体检者,LEC检验、抗ds-DNA和抗ENA抗体均为阴性。252例SLE3种方法的检测,结果见表1。

在35例抗ds-DNA阳性中男性仅2例,其余33例均为女性。在35例抗ds-DNA阳性中,LEC24例占抗ds-DNA阳性的68.5%,ENA多肽阳性32例,占抗ds-DNA阳性的91%。

讨 论

抗ds-DNA抗体检测是近年来逐步建立起来的诊断SLE理想的免疫学方法,该方法用于检测人血清双链DNA自身抗体。双链DNA自身抗体与单链DNA不同,它主要在SLE中存在。其抗ds-DNA抗体滴度与SLE疾病的活跃程度有关。因此,抗ds-DNA的检测对SLE有较强的特异性,它对SLE的诊断是非常重要的,这是SLE免疫学检测的首选方法。抗ENA抗体主要是对核内可提取性核抗原的1种自身抗体,临床常检测的有十几种,尽管它们不是诊断SLE的专用指标,其灵敏度、特异性及检出率仍优于LEC的检测。有条件的实验室可以淘汰LEC的检测,但是必须具备条件,这条件是对SLE检测手段齐全,如能开展抗ds-DNA抗体、抗ENA多肽抗体的检测、间接荧光法检测抗核抗体等多种检测方法。由于市售试剂盒质量不稳定,难免出现假阳性和假阴性结果。对SLE的诊断用同1种方法1次结果很难得出明确的判断。因此,不具备SLE多种检测方法的实验室,不宜过早、过快地淘汰LEC的检测。

参考文献

1 叶应妩,王毓三,申子瑜,主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006:655-667.