首页 > 文章中心 > 小豚鼠

小豚鼠

开篇:润墨网以专业的文秘视角,为您筛选了八篇小豚鼠范文,如需获取更多写作素材,在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享!

小豚鼠范文第1篇

我家饲养者一只可爱的小豚鼠。它长着一身耀眼的白毛;像个尖尖的下垂的三角体似的鼻子;猪八戒似的耳朵,呼扇呼扇地;走起路来摇摇晃晃,笨拙得可笑!

我喜欢和小豚鼠玩游戏,开心极了!每当妈妈下厨煮饭的时候,总是蹲在柜子上,观察妈妈的手艺。看来还真想做“厨师”呢!过了一会儿,饭好了。小豚鼠就随着香味,向它的“美食”扑去,没等我叫它,小豚鼠已经自自觉觉而且津津有味地吃起来了。每次都把盘子舔得光亮亮的,都能当镜子了.唉,真是一只“贪吃鼠”呀!有一次,我想逗逗我的小豚鼠.我把它摆在镜子前面,它惊奇地望着镜子里的“小豚鼠”,好像在说:“咦,你是谁呀?”小豚鼠看着里的“小豚鼠”,坐在桌子上思考着,而镜子里的“小豚鼠”也坐在桌子上思考着,这更使小豚鼠百思不得其解,于是,它试探着伸出小爪子去抓镜子里的小豚鼠,没想到镜子里的“小豚鼠”也伸出爪子来,这可把小豚鼠吓坏了,它立刻落荒而逃。小豚鼠这反应逗得我们全家捧腹大笑。后来,它看见大家取笑它,可能怕丢脸,于是很不服气地跑回来,拼命地去抓镜子,好像要跟镜子里的“小豚鼠”一争高下。为了不弄坏镜子,我们只好把它拿开。

谁说“老鼠过街,人人喊打!”小豚鼠就是一种讨人喜爱的动物嘛!你说,这么可爱的小豚鼠,你忍心打它吗?

小豚鼠范文第2篇

论文关键词:银屑病,消银汤,肿瘤坏死因子-α,干扰素-γ

1 材料与方法

1.1 动物

白色豚鼠53只,普通级,体质量为300g~350g,雌雄兼用,由重庆医科大学实验动物中心提供,合格证号:SYXK(渝)2012-0001。

1.2 药物

消银汤药物组成:黄芩10g、生地15g、牡丹皮12g、赤芍15g、半枝莲30g、白花蛇舌草15g、槐花10g、紫草10g、玄参15g、丹参15g、鸡血藤15g和甘草6g。制备方法:称取各药材,用水煎煮制备,共煎煮两次,煎出液合并,浓缩到每剂药168ml。消银汤的人体推荐摄入量为168g·d-1生药,相当于2.8g·kg-1·d-1生药(成人以60kg计)。

1.3 主要试剂及设备

甲氨蝶呤片(上海信谊药业有限公司,批号:20130403),普萘洛尔(山西云鹏制药有限公司,批号:130801),聚乙烯吡咯烷酮,氮酮(国药集团化学制剂有限公司,批号:20131115,20131030),豚鼠TNF-α,IFN-γELISA试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司,批号:201311),光学显微镜(日本奥林巴斯公司),LP-400酶标仪(法国巴斯德公司)。

1.4 消银汤对豚鼠银屑病样模型血清中TNF-α、IFN-γ含量的影响

盐酸普萘洛尔搽剂制备方法:取盐酸普萘洛尔5g,用50%乙醇溶解,加入氮酮5mL作为透皮吸收促进剂,加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP-K30)5g为成膜材料,最后补加50%乙醇至100mL,搅拌均匀即得[2]。

取白色豚鼠53只,雌雄兼用,随机抽取8只作为正常对照组,其余豚鼠用玻棒涂抹普萘洛尔搽剂于两侧耳廓皮肤,用量为0.1mL/cm2,每日两次,连续涂抹两周,制备耳部皮肤银屑病样皮损模型(至第2周末,空白组及造模组随机处死5只豚鼠作耳组织病理学检查,如出现银屑病样病理改变,则提示造模成功)[3]。

将成模豚鼠40只,随机分为模型组、消银汤高(26.0g·kg-1)、中(13.0g·kg-1,等于临床等效剂量)、低(6.5g·kg-1)剂量组、阳性对照组(甲氨蝶呤0.77mg·kg-1,相当于临床等效剂量),每组8只。各组灌胃给药,每天两次,小学英语教学连续14d,给药容积为13ml·kg-1。正常组和模型组给予等量的生理盐水。末次给药1h后,腹腔注射20%乌拉坦麻醉豚鼠,切开腹部,暴露腹主动脉,采集全血8mL,室温静置30min,3000r·min-1离心15min,吸取上清,置于-80℃保存。用ELISA试剂盒检测血清中细胞因子TNF-α、IFN-γ含量,具体操作严格按照说明书进行。

1.5 统计学分析

采用SPSS 13.0软件进行数据处理和统计分析,计量资料以均数±标准差(■±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。

0

2 结果

2.1 消银汤对豚鼠银屑病样模型血清中TNF-α、IFN-γ含量的影响

与空白对照组相比,模型组豚鼠血清中TNF-α、IFN-γ的含量均明显升高(P<0.01);与模型组相比,消银汤各剂量组及甲氨蝶呤组豚鼠血清中TNF-α、IFN-γ的含量均明显降低(P<0.01);消银汤高剂量组与甲氨蝶呤组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),见表1:

0

表1 消银汤对豚鼠银屑病样模型血清中TNF-α、IFN-γ含量的影响)(■±s,n=8)

注:与模型组比较aP<0.01;与甲氨蝶呤组比较bP<0.05,cP<0.01.

0

3 讨论

银屑病是一种以红斑鳞屑为主的慢性炎症性皮肤病,其病因和发病机制复杂。目前,银屑病发病机制主要有遗传因素、免疫因素、感染因素、内分泌因素、神经精神因素等[4]。近年来,大量研究表明银屑病存在着免疫异常,而细胞因子作为免疫调节的物质基础在银屑病的发病中起着重要的作用[5]。TNF-α是一种重要的促炎症性细胞因子,与银屑病的发生密切相关,它能够促进淋巴细胞浸润,能够促进朗格汉斯细胞成熟,能够促进上皮细胞和成纤维细胞的生长[6]。INF-γ在银屑病中既可导致角质形成细胞异常增生,又可使T细胞进入表皮增殖活化[7]。

本实验结果显示,模型组豚鼠血清中TNF-α、IFN-γ的含量明显高于空白对照组,消银汤各剂量组对豚鼠血清TNF-α、IFN-γ均有抑制作用,其中消银汤高剂量组的作用优于甲氨蝶呤组,结果提示消银汤对银屑病豚鼠模型的治疗作用可能与降低血清中TNF-α、IFN-γ的表达水平有关。

【参考文献】

[1]郝平生.豚鼠银屑病动物模型组织中TNF-α表达及加味凉血消风散的调控实验研究[J].成都中医药大学学报,2011,34(3):29-31.

小豚鼠范文第3篇

目的观察镇咳止喘咀嚼片的主要药理作用。方法采用小鼠因氨水所致咳嗽法、豚鼠因枸橼酸所致咳嗽法观察其镇咳作用;小鼠呼吸道酚红排痰量法、大鼠毛细管排痰量法观察其祛痰作用;组胺所致豚鼠“哮喘”法观察其平喘作用。结果镇咳止喘咀嚼片可以延长小鼠因氨水所致的咳嗽潜伏期及因枸橼酸所致豚鼠的咳嗽潜伏期,同时减少咳嗽次数;可以增加小鼠呼吸道的酚红排痰量及增加大鼠毛细管的排痰量;可以对抗动物因组胺引起的“哮喘”症状。结论镇咳止喘咀嚼片具有镇咳、祛痰、平喘作用。

【关键词】 镇咳止喘咀嚼片;镇咳; 祛痰; 平喘

Abstract:ObjectiveTo observe pharmacological effects of Zhenke Zhichuan Tablets.MethodsThe cough-relieving effect of Zhenke Zhichuan Tablets was observed by mouse cough model induced by NH4OH and guine-pig cough model induced by citric acid with capillary method; observation on the phlegm expelling effect was completed by using phenol red and by observing the phlegm expelling from the respiratory tract of adult mouse; the effect of anti-asthma was observed through the asthma caused by histamine. ResultsZhenke Zhichuan Tablets could apparently prolong the coughing incubation period and reduce coughing frequency ; increase excretion of phenol red and phlegm from the respiratory tract;resist asthma caused by histamine.ConclusionZhenke Zhichuan Tablets has a therapeutic effect of relieving cough and expelling phlegm and anti-asthma.

Key words: Zhenke Zhichuan Tablets; Relieving cough; Expelling phlegm; Anti-asthma

镇咳止喘咀嚼片是由中药颗粒剂经剂型改造而成的新药,具有吸收速度快、服用方便、易于运输保存等特点,功能为清热宣肺、化痰止咳,临床上可以用于上呼吸道感染、气管炎、肺炎等。我们对其镇咳、祛痰、平喘的药理作用进行了研究,为临床合理用药提供理论依据。

1 材料与仪器

1.1 动物

昆明种小鼠,远交封闭系,皖医动准第01号;英国种豚鼠;Wister大鼠,远交封闭系,皖医动准第02号。安徽医科大学实验动物中心提供。

1.2 药品与试剂

镇咳止喘咀嚼片,安徽医科大学第一附属医院提供,批号040618;镇咳止喘颗粒,安徽医科大学第一附属医院提供,批号20031223;氨水,上海试剂一厂综合经营公司产品,浓度28%,AR级,批号20020327;枸橼酸,中国医药集团上海化学试剂公司,AR级,批号20020116;苯酚红,北京市朝阳区旭东化工厂产品,批号990609;乌拉坦,中国医药(集团)上海化学试剂公司产品产品,批号20011105;磷酸组织胺,中国药品生物制品检定所出品,25 mg/支,批号5109411。

1.3 仪器

东芝空气压缩机,日本产。721分光光度计,上海第三分析仪器厂出品。80-2沉淀离心机,上海手术器械厂产品。毛细管,内径0.8mm,长度5~6cm。手术器械若干。

2 方法

2.1 镇咳作用

2.1.1 对小鼠因氨水所致咳嗽的影响

参照文献[1],取体重18~22 g的小鼠50只,各半,随机分成5组,分别灌胃给予0.2 ml/10 g相应供试液,第1天上、下午各1次,第2天给完药后30 min时将小鼠置于5 000 ml玻璃钟罩内,以400~500 mmHg 恒压将氨水(28%)喷入钟罩,喷雾5 s,然后观察记录小鼠的咳嗽潜伏期及咳嗽次数(3 min)。动物在第1次给药前24 h进行筛选,后再分组,咳嗽标准为:腹肌收缩,同时张大嘴,有时可有咳声。若潜伏期小于1 min且在1min内出现3次以上典型咳嗽者为“有咳嗽”敏感动物,否则作无咳嗽而淘汰。

2.1.2 对豚鼠因枸橼酸所致咳嗽的影响

参照文献[2],取体重100~200 g的纯白色豚鼠(对咳嗽及哮喘较敏感),兼用,筛选40只后随机分为5组,每组8只。给药容积为1.0 ml/100 g,第1天上、下午各给药1次,第2 天上午给药后30 min进行实验。将动物置于5 000 ml的密闭钟罩内,以400~500 mmHg 恒压通过喷头将17.5%枸橼酸喷入钟罩,喷雾1 min,然后观察记录6 min内豚鼠的咳嗽潜伏期及咳嗽次数,加以组间比较并作统计分析。首先在给药前1天对豚鼠进行筛选,6 min内豚鼠的咳嗽次数少于10次或大于30次均作淘汰。

2.2 祛痰作用

2.2.1 对小鼠呼吸道酚红排痰量的影响

测定酚红最大吸收峰:参照文献[2]方法,酚红含量测定略作改变。在100 ml容量瓶内精确配制浓度为1 mg/ml的酚红母液,再配每毫升含酚红0.01,0.1,0.5,0.7,1,3,5,10 μg溶液,分装于8个10 ml容量瓶内。任取两管溶液,以未知酚红的0管作对照,用721分光光度计在波长420~570 nm范围内,测光密度值。最后得酚红最大吸收峰的波长在560 nm处。

绘制酚红标准曲线 :将上述配制的酚红溶液,分别在560nm波长处测光密度值,结果各管酚红含量与光密度之间的直线相关有极显著意义(相关系数r=0.999 5,P

实验操作:参照文献[2],取体重18~22 g的小鼠50只,各半,随机分成5组,分别灌胃给予0.2 ml/10 g相应供试液,第1天上、下午各1次。第2天给完药后0.5 h时做实验。实验前小鼠禁食8~12 h,每只小鼠给药30 min后,腹腔注射酚红溶液0.5 ml/只。30 min后,脱椎处死,仰位固定。颈部拉直,解剖分离出气管在气管下穿一丝线,以备固定气管插管用。气管插管(用头部磨平的9号针头)从甲状软骨处插入气管内约0.3 cm,用备好的丝线结扎、固定,用1ml注射器吸取5 d/dl的NaHCO3溶液0.5 ml推注入气管内,反复连续推抽3次,灌胃呼吸道。最后用注射器将灌洗液抽出注入试管中,按上述方法操作3次,冲洗9次,共吸取NaHCO3溶液1.5 ml,合并洗出液约1.2~1.5 ml,离心后取上清液用分光光度计比色,OD值代入方程,得出酚红浓度,将结果进行统计学分析。

2.2.2 对大鼠毛细管排痰量的影响

参照文献[2],取体重180~220 g大鼠30只,各半,每组6只,随机分成5组,分别灌胃给予1.0 ml/100 g相应供试液。实验前禁食不禁水8~12 h后,乌拉坦1.0 g/kg腹腔注射麻醉后,仰位固定(注意保暖)。剪开颈正中部皮肤,分离出气管。在甲状软骨下缘正中的软骨环之间用尖锐的注射针头扎一小孔,然后插入玻璃毛细管1根,使毛细管刚好接触气管底部表面,借以吸取气管后部之痰液。当毛细管内痰液充满时,立即另换1根。以毛细管吸取痰液长度作为评价药物的祛痰效果。记录给药前2 h的正常分泌量后,灌胃给药后(在给药1 h后,再按同等剂量重复给药1次)继续再观察4h 痰液分泌量。比较给药前后平均每小时分泌及与生理盐水组相比的痰液分泌量,并作统计学分析。

2.3 对组胺所致豚鼠哮喘的影响

参照文献[2],取预选后体重150~200 g豚鼠40只,兼用,随机分为5组,每组8只,给药容积为1.0 ml/100 g,第1天上、下午各给药1次,第2天上午给药后0.5 h进行实验。将动物置于5 000 ml的密闭钟罩内,以 400~500 mmHg压力喷入2 mg/ml磷酸组胺1 ml,动物在吸入以上药液后经过一定的潜伏期,即产生“哮喘”反应,“哮喘”反应按程序分为4级:Ⅰ级呼吸加速,Ⅱ级呼吸困难,Ⅲ级抽搐,Ⅳ级跌倒。动物一旦出现抽搐,即拉开盖子,必要时辅以人工呼吸以免动物因窒息而死亡。多数动物在90 s以内即可以出现Ⅲ或Ⅳ级反应,一般不超过150 s,超过150 s者可认为不敏感,不予选用,给药前1天进行筛选,潜伏期超过360 s按360 s计。

3 结果

3.1 镇咳作用

3.1.1 对小鼠因氨水所致咳嗽的影响

镇咳止喘咀嚼片小、中、大剂量2.062 5,4.125 0,8.250 0 g·kg-1(分别相当于临床用的5,10,20倍)灌胃给予小鼠3次后,与颗粒(4.125 0 g·kg-1)剂型一样,可以延长因氨水所致小鼠的咳嗽潜伏期,同时减少咳嗽次数,与生理盐水组相比较具有显著意义,潜伏期与对照组相比分别为P

3.1.2 对豚鼠因枸橼酸所致咳嗽的影响

镇咳止喘咀嚼片小、中、大剂量0.773 4,1.546 9,3.093 8 g·kg-1(相当于临床用量的1.875,3.75,7.5倍),灌胃给予豚鼠3次后,与颗粒剂型(1.546 9 g·kg-1)一样,可以延长因枸橼酸所致豚鼠的咳嗽潜伏期,同时减少咳嗽次数,与生理盐水组相比较具有显著意义,潜伏期与对照组相比分别为P

3.2.1 对小鼠呼吸道酚红排痰量的影响

镇咳止喘咀嚼片小、中、大剂量(2.062 5,4.125 0,8.250 0 g·kg-1,分别相当于临床用量的5,10,20倍)灌胃给予小鼠3次后,可以增加小鼠呼吸道的酚红排痰量,与生理盐水组相比具有显著意义,分别为P

3.2.2 对大鼠毛细管排痰量的影响

镇咳止喘咀嚼片小、中、大剂量(1.031 3,2.062 5,4.125 0 g·kg-1,分别相当于临床用量的2.5,5,10倍)灌胃给予大鼠2次后,可以增加大鼠毛细管的排痰量,与生理盐水组相比具有显著意义,分别为P

3.3 对组胺所致豚鼠哮喘的影响

豚鼠经呼吸道吸入一定量的磷酸组胺后,可以造成类似人类的“哮喘”模型。镇咳止喘咀嚼片小、中、大剂量(0.773 4,1.546 9,3.093 8 g·kg-1,分别相当于临床用量的1.875,3.75,7.5倍)灌胃给予豚鼠3次后,可以对抗动物因组胺引起的“哮喘”症状,表现为动物跌倒潜伏期延长,与生理盐水组相比较具有非常显著意义,经统计学处理分别为P

4 讨论

通过实验发现镇咳止喘咀嚼片具有镇咳、祛痰、平喘、抗炎、抗菌的药理作用,咀嚼片剂型和原颗粒剂型相比具有同等的药理作用,均有镇咳祛痰之功效,临床上可以用于上呼吸道感染、气管炎、肺炎等,同时咀嚼片相比原颗粒剂型具有服用方便,作用迅速,易于运输保存等特点。

参考文献

小豚鼠范文第4篇

【摘要】 目的探讨益母草对休克血浆所致豚鼠心室肌电生理改变的拮抗作用。方法采用常规玻璃微电极细胞内记录技术,记录离体豚鼠心室肌动作电位,观察休克血浆对豚鼠心室肌动作电位的影响及益母草对其干预作用。结果正常血浆灌流时,与对照组相比,豚鼠心室肌细胞动作电位无明显改变。休克血浆灌流时,豚鼠心室肌细胞动作电位的APA,OS均显著升高,APD50,APD90,APD明显延长,与对照组及正常血浆组比较均有显著性差异(P

【关键词】 休克血浆; 电生理; 肌; 益母草

Abstract:ObjectiveTo clarify the interential effects of Leonurus heterophyllus (LH) on shock plasma(SP) and protective effects on guinea pig papillary muscles.MethodsBy using conventional intracellular microelectrode technology to record their action potentials,LH were used to observe their electrophysiological effects on guinea pig papillary muscles.Results(1)In normal papillary muscles ,shock plasma did not significantly increase the amplitude of action potential(APA) (P<0.05).(2)Perfusion with LH(2.5,5,10 %),partially abolished the effects of shock plasma on guinea pig and overshoot(OS) in a concentration in APD in papillary muscles.ConclusionSP can significantly influence eletrophysiological characteristics of the normal papillary muscles,and LH may abolished the effects of SP on guinea pig papillary muscles.

Key words:Shock plasma; Electrophysiology; Papillary muscles; Leonurus heterophyllus

益母草Leonurus heterophyllus (LH)是唇形科草本植物的全草,有效成分为益母草碱甲、乙及水苏碱、油酸等。其功用主治为活血化淤、利尿、调经。研究表明益母草的药理作用是多方面的,不仅有降血压和利尿作用,临床上也有用于冠心病心肌缺血的治疗,取得了良好效果[1]。为了进一步探讨益母草对心肌细胞的保护作用机制,本实验利用常规玻璃微电极细胞内记录技术,观察了益母草对休克血浆(shock plasma,SP)所致豚鼠心室肌动作电位改变的干预作用。

1 器材

1.1 药品与仪器

1.1.1 动物与药物成年豚鼠,Wistar雄性大鼠,中国医学科学院实验动物繁育中心提供;益母草注射液由河北北方学院化学教研室提供。戊巴比妥钠(北京化学试剂厂生产,批号20000919);肝素钠,北京奥博星生物技术责任有限公司生产,批号001218)。

1.1.2 仪器PCLAB生物信号系统,浙江医科大学实验仪器厂生产;DWF3型微电极放大器,军事医学科学院实验仪器厂生产;SDQ4型三道电子刺激器,蚌埠实用技术研究所生产;微循环显微电视录像设备,徐州光学仪器厂生产;ZCZ50型自动抽注机,浙江医科大学实验仪器厂生产;MLD-1型多功能激光多普勒血流仪,南开大学医学物理研究所生产。

1.2 SP的制备按我室方法复制豚鼠失血性休克模型[2],豚鼠颈动脉插管,经三通管一端连Lamson瓶,另一端记录血压,通过调节瓶的高度,将血压降至5.3 kPa维持60 min,颈动脉放血4 ml,离心(2 000 r/min)10 min,取上清液,制备SP。

1.3 标本制备成年豚鼠(200~300 g),雌雄不拘。击颅致昏后迅速开胸取出心脏,置于O2饱和的改良Locke液中。暴露左室,选择分支少、大小约0.6 mm×1 mm×3 mm的柱状肌。制好的标本以不锈钢针固定于灌流槽内的硅橡胶上,用(36.0±0.5)℃的改良Locke液恒温、恒速灌流,流速为5 ml/min,灌流液中持续充以O2,pH 7.4。标本在灌流液中稳定120 min后开始实验。

1.4 电位引导采用标准玻璃微电极技术记录心肌细胞电活动。玻璃微电极充以电极液后直流电阻为10~20 m。将刺激电极置于标本的心肌组织上,给一波宽2 ms、1 Hz,两倍阈强度的方波刺激,动作电位经微电极引出后,经镀氯化银的银丝输入DWF-3型微电极放大器后,一路输入监听器监听,另一路经高速数模转换器输入微机,采样存储动作电位并分析其各项参数指标。

1.5 电位记录与给药引发豚鼠心室肌动作电位,待动作电位稳定10 min后,采集正常的动作电位做对照组(Control Group);然后向20 ml心肌灌流液中加入正常血浆(normal plasma, NP)2 ml灌流,分别记录灌流后1,3,5,10,15 min时的电位变化;之后再加入SP 2 ml记录相应时间的电位变化;最后由低到高剂量依次加入益母草注射液,使100 ml灌流液中益母草浓度分别达到2.5,5,10 g(2.5%,5%,10%),并于灌流后1,3,5,10,15 min时,记录每一浓度的动作电位。

1.6 统计学处理应用Excel统计工具进行,动作电位的各观测指标均以±s表示,给药前后各项指标用t检验,以P<0.05为有显著差异。

2 结果

2.1 NP对豚鼠心室肌动作电位的作用NP灌流心室肌标本15 min后,动作电位的各项指标无明显变化。

2.2 SP对豚鼠心室肌动作电位的作用SP灌流心室肌标本5 min后,动作电位的超射(OS)及幅值(APA)明显增高,(P

2.3 益母草对SP所致豚鼠心室肌动作电位的干预作用2.5%益母草的休克血浆灌流液灌流心室肌标本后,APD50明显延长(P

3 讨论

休克是临床上常见急症,常因组织器官的缺血导致重要器官功能代谢障碍和细胞受损。其中,心泵功能的障碍不仅是心源性休克的始动环节,也是加剧其它休克的重要因素。以往研究表明,益母草有改善微循环及增加冠脉血流量,恢复缺血区的血液供应[3]。此外,益母草还增强缺血再灌注损伤心肌中的抗氧自由基系统的活性,减轻氧自由基对心肌细胞膜的损害,减少心肌细胞内心肌酶的漏出[4]。因此,探讨休克血浆对心肌细胞动作电位的影响并寻找保护心肌的有效药物对疾病的治疗具有重要意义。

结果表明,SP灌流液时,豚鼠心室肌细胞动作电位的APA,OS均显著升高,APD50,APD90,APD也明显延长,可能与休克时机体产生的肾上腺髓质素(ADM)、一氧化氮、自由基(Oxygen free radicals,OFRS)等物质增多及细胞内Ca2+超载有关。这些物质使细胞膜受损,出现离子泵功能障碍,使细胞心肌膜对Na+的通透性增高,OFRS激活Na+Ca2+交换,使细胞膜Na+Ca2+交换异常[5],Na+负荷过度,去极化时Na+内流增加,因而心室肌细胞动作电位的OS,APA明显增高;而离子泵功能障碍及OFRS可使细胞内Ca2+含量明显增高,引起Ca2+超载(calcium overload),Ca2+负荷过度,复极化缓慢,可能是APD明显延长的重要原因。另外OFRS还有使ATP酶活性下降,细胞膜各种主动转运功能减弱,故可抑制延迟整流钾电流(IK)作用,这种延迟整流钾电流的迅速降低,可能引起APD的瞬间延长的另一原因[6]。

用含益母草的休克血浆灌流后,可对抗SP引起的APA,OS升高,APD50,APD90,APD延长效应。可能是益母草减轻氧自由基对心肌细胞膜的损害[4];保护心肌细胞的ATP酶,减低钙超载;逆转被抑制通道活动。另外益母草可能提高酶的活性,减少酶漏出,保护抗氧化酶系统,减轻脂质过氧化反应,抑制过氧化脂质生成。郑鸿翱等[7]曾报道益母草可明显降低心肌组织丙二醛(MDA)含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH1PX)活性,提高心肌酶肌酸激酶(CK)、谷丙转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶2L(LDH2L)和α羟基丁酸(α2HBDH)活性等多种酶的活性。陈少如等[8]也曾报道的益母草可减轻心肌酶的漏出,保护心肌细胞Ca2+ATP酶、Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶,促进Ca2+泵出并减少Na+-K+交换,从而减少细胞内Ca2+超载。以上结果表明,益母草可明显拮抗SP对豚鼠心室肌动作电位的影响,对心肌细胞有重要保护作用。

参考文献

[1]董仁寿,陈少如,黄俊益,等.益母草注射液治疗无症状性心肌缺血的临床观察[J].汕头大学医学院学报,1998,11(1):6.

[2]牛春雨,张 静,樊 贵,等.淋巴液对失血性休克大鼠系膜微循环变化的影响[J].微循环学杂志,1996,6(3):1.

[3]黄俊益,董仁寿,颜建中.从微循环血液流变学变化探讨益母草对冠心病的疗效机理[J].中国血液流变学杂志,1995,5(3):16.

[4]钟丽萍,施道海,陈蕴英.益母草与心肌保护[J].江西医学院学报,2004,44(6):135.

[5]Storozhevykh TP,Pinelis ,Vinskaya,et al.The leading role of membrane Ca2+ ATPase in recovery of Ca2+homeostasis after glutamate shock[J].Bull Exp Biol Med.2003,135(2):139.

[6]王泽君,鲍光宏.氧自由基引起心肌损伤的离子通道机制[J].高血压杂志,1998,6(4):238.

小豚鼠范文第5篇

(注:适用于完全显性条件下的真核生物的细胞核遗传)

方法一、依据显隐性性状的概念(也叫杂交法):

1、具有相对性状的纯合亲本杂交,F1表现出来的性状为显性,未表现出来的性状为隐性。

举例1:参见高中生物教材中孟德尔的豌豆的高茎和矮茎一对相对性状的遗传实验。这种方法其实就是依据显隐性性状的概念。

2、具有相对性状的亲本杂交,所有F1均表现一种性状。则F1出来的性状为显性,未表现出来的性状为隐性。(注:这里的“所有F1”是指F1数量较多情况下,才可做出这样的判断)

举例2:参见教材28页事例2、“另一只黑毛雌豚鼠(乙)与白毛雄豚鼠(丙)后,生殖的7窝小豚鼠全部是黑毛豚鼠”。在此例中,由于生殖的7窝小豚鼠全部是黑毛豚鼠,即“数量较多情况下”,就可根据该法判断豚鼠的显隐性性状。

方法二、依据性状分离现象(也可叫自交法、性状分离法):

1、自交后生了性状分离的亲本所表现出来的性状为显性,未表现出来的性状为隐性。

举例3:参见教材中孟德尔的豌豆的高茎和矮茎一对相对性状的遗传实验,F1自交,F2出现了性状分离。这种方法其实就是依据性状分离的概念。

2、表现型相同的亲本相交,若子代出现性状分离,则亲本所表现出来的性状为显性,未表现出来的性状为隐性。

解析:该法本质上和上述方法是相同的,也是依据性状分离的概念,只是这里的“相交”是让两个基因型未知的个体。当然,表现型相同的亲本相交,若子代不出现性状分离,则无法判断。

3、在一个种群中,多对表现型相同的亲本相交,若子代均无性状分离,则亲本所表现出来的性状为隐性,未表现出来的性状为显性。

(注:此法应强调是“在一个种群中,多对表现型相同的亲本相交”,这句话隐含有随机之意。若是人为选定数量较少的几对表现型相同的亲本相交,则不能做出上述判断)

举例4:参见举例5(2)。

方法三、假设推论法:

在运用该法判断显隐性性状时,若出现假设与事实相符的情况时,要注意对两种性状同时做假设或对同一性状做两种假设,切不可只根据一种假设做出片面的结论。但若假设与事实不相符时,则不必再做另一种假设,可予以直接判断。

举例5:(2005、全国卷1)

已知牛的有角与无角为一对相对性状,由常染色体上的等位基因A与a控制。在自由放养多年的一群牛中(无角的基因频率与有角的基因频率相等),随机选出1头无角公牛和6头有角母牛,分别,每头母牛只产了1头小牛。在6头小牛中,3头有角,3头无角。

(1)根据上述结果能否确定这对相对性状中的显性性状?请简要说明推断过程。

(2)为了确定有角与无角这对相对性状的显隐性关系,用上述自由放养的牛群(假设无突变发生)为实验材 料,再进行新的杂交实验,应该怎样进行?(简要写出杂交组合、预期结果并得出结论)

分析:本题考查相对性状中显、隐性性状的判断。判断显、隐性性状常根据亲代与子代所表现出的性状判断:具有相对性状的亲本杂交,若子代只表现出一个亲本的性状,则这一性状为显性;若子代同时表现出两个亲本的性状,则根据现有条件无法直接判断,可用假设法予以判断。假设某一亲本的性状为显性(隐性),按照假设的条件去推算,若与事实不相符,则假设不成立,可判断出亲本的显隐性;若与事实相符,应再假设另一亲本的性状推算是否与事实相符,如果也与事实相符,则无法判断显隐性,可再设计实验予以确认。设计时的原则一般是选用相同性状的个体杂交,若后代一旦出现不同性状(排除基因突变),则这一不同性状一定是隐性,亲本性状为显性。

答案:(1)不能确定。

①假设无角为显性,则公牛的基因型为Aa,6头母牛的基因型都为aa,每个组合的后代或为有角或为无角,概率各占1/2。6个组合后代合计会出现3头无角小牛,3头有角小牛。

②假设有角为显性,则公牛的基因型为aa,6头母牛可能有两种基因型,即AA和Aa。AA的后代均为有角。Aa的后代或为无角或为有角,概率各占1/2,由于配子的随机结合及后代数量少,实际分离比例可能偏离1/2。所以,只要母牛中具有Aa基因型的头数大于或等于3头,那么6个组合后代合计也会出现3头无角小牛,3头有角小牛。

小豚鼠范文第6篇

【关键词】机能学;虚拟实验技术;Flash;豚鼠;心肌细胞动作电位

Abstract:Aiming at single,insufficient facilities and funds,and less students-participation teaching methods in traditional experimental teaching of functional science course,the authors explored experimental platform based on virtual system. Through comparisons of various virtual simulation technology methods,we select Flash as the development platform because that it is simple,flexible,more visually attractive and high interactivity,so that wo can simulate complicated and incomprehensible experimentation. Taking action potentials in guinea pig ventricular myocytes to demonstrate the development of virtual experiment based on Flash technology.

Key words:functional science;virtual experiment;Flash;guinea pig;action potential in ventricular myocytes

一、引言

机能实验学是将生理学、病理生理学、药理学三门课程的实验内容有机融合在一起,体现学科间的交叉融合和新技术的应用以及培养学生创新能力的课程。因为传统机能学实验的对象多为活体动物或离体器官组织,从而教学中存在一些困难进而影响教学质量。

1.实验成本高且一些大型仪器设备陈旧和数量有限,学生人数很多,同时只能有部分学生操作而其余学生围观,因而不能熟练操作仪器设备。

2.实验操作精细且困难大,由于实验教学场地和课时限制,学生大多没有很好的预习和复习,未能掌握实验操作技术,从而厌恶实验[1]-[3]。

虚拟实验技术凭借软件模拟的优势可以解决这些问题,目前虚拟实验技术包括Java技术、QuickTime VR技术、VRML技术Flash等,其中Flash作为一种矢量多媒体技术是为创作网络交互式动画所开发。Flash具有很强的交互性、图形矢量性的同时保证了很小的动画体积;采用Actionscript这种面向对象的脚本语言使得当特定事件发生动作时可以控制对象,非常适合交互式虚拟实验平台的建立;开发周期短适合演示性虚拟实验。虽然Flash的交互性不如VRML,数据处理能力不如Java但其开发的简单灵活以及以上三种特性使得Flash成为开发教学虚拟实验的最佳平台[3]-[6]。

二、以机能学中豚鼠心机细胞动作电位实验为例介绍基于Flash的虚拟实验技术的开发

1、实验步骤

(1)取出心脏分离肌;(2)拉制玻璃微电极;(3)调试仪器记录动作电位。

2、虚拟实验

(1)制作素材并将素材导入Flash库

首先,用photoshop或者coreldraw,AI等绘图软件制作好实验所需器械及动物模型等各种素材绘如豚鼠、HF-100抗干扰台、BL-420、手术剪等;然后打开flash cs4,新建一个ActionScript 2.0的文件,在菜单栏打开文件-导入-导入到库-把做动画需要用到的素材导入到flash的库中。

(2)构建虚拟实验室

1)布置舞台设置原件

ctrl+F3调出属性面板对新建的文件进行设置,设置好舞台需要的背景的颜色,大小和帧频等。为了方便管理和维护,我们选择把动画做到mc影片剪辑里面,先把鼠笼等拖入到舞台上,调整好位置和大小过后,F8转换为原件,选择下面的影片剪辑属性,再点击右键调出标尺或者按快捷键Ctrl+Shift+Alt+R拉好辅助线,这是为了确定精准的位置,特别是有变化的地方,一定要调整好位置和大小,否则画面会有错位的跳跃感(见图1)。

2)动画实现

以取豚鼠离体心脏为例:首先从抓豚鼠开始,我们需要在mc里面新建一个图层,命名为手套,把戴手套的各个动作素材拖放到舞台上,按照帧顺序依次排列好,动画连贯性以一拍三8帧画面为主,接着需要给鼠笼做一个遮罩用以产生穿插感的,把鼠笼、笼盖子放到两个图层中,再新建一层,点击右键勾选上“遮罩层”选项,再把鼠笼拖入到遮罩层下方,会发现遮罩层和被遮罩层都发生了图标变化。设置好后在遮罩层中插入关键帧选择相关绘制工具绘制出遮罩图案部分(有图案的地方才会被显示),绘制好后同时锁定遮罩层和被遮罩层移动笼盖测试效果,看是否遮好,然后在手套戴好需要打开鼠笼的位置编辑笼盖,鼠笼是固定不动的,需要给盖子添加动作,配合上手打开笼盖的动作把盖子移动到相应的位置,提起后插入关键帧,再延迟几帧后插入关键帧或者快捷键F6插入关键帧,移动笼盖和手到移动的终点位置,再在此移动帧中间选任意一阵单击右键选择插入传统补间,这时候插入补间的地方会有一条箭头,接下来是手要伸入笼子里抓豚鼠,由于要产生交错感,需要给手也添加一个遮罩,把抓豚鼠的手的图层拖入到“遮罩层”的下面,再插入帧编辑这只手的位置,于是就产生了手伸入到了笼子里面的感觉。

3)代码实现

在以上交互中需要用到的代码用的是actionscript 2.0,我们可以将代码写到按钮上,帧上。

新建一层,把做好的按钮放到这个层上面,在相应需要交互的按钮上写下代码。

(1)比如点击下一帧上一帧的代码可以写作:

on(release){

nextFrame();

},

on(release){

PrevFrame();

}

(2)当点击按钮需要跟随鼠标的代码如下:

Mouse.hide();

mc1.onMouseMove=function(){

this._x = _xmouse;

this._y = _ymouse;

UpdateAfterEvent();

}

Mc1是指定要跟随鼠标的影片剪辑,里面的内容可以是一张图片,动画,影片。

(3)当需要拖动一个工具去响应另一个动作时就需要用一下代码:

OnClipevent (mouseDown){

If (hit Test (_root._xmouse,_root._ymouse.false)){

startDrag(“”,true);

x = this._x;

y = this._y;

}

}

onClipEvent(mouse up){

if (!hitTest(_parent.regionl)){

this _x = x;

this _y = y;

}else{

_parent.nextFrame();

}

StopDrag();

}

注释:其中regionl 是感应区,也就是一个隐藏的透明按钮。

(4)调用和控制库里面的影片剪辑以及键控,比如:

On(release,Keypress”<ENter>”){

gotoAndPlay();

}

(5)在页面上的小按钮也可以添加相应的代码,比如主页就可以写:

On(release){

Get URL(http://,“blank”);

}

或者:

on(release){

gotoAndStop();

},

三、结束语

本文将Flash技术应用于机能学中豚鼠心肌细胞动作电位的测定,细化了各个步骤并附有视觉冲击感;减轻了经费不足、大型仪器少、场地不够等困难;学生多可以使学生在实验前后随时观看并与实验互动,熟练实验步骤、深刻理解实验原理和结果以及熟练操作实验仪器,从而提高教学质量。

参考文献

[1]李涛,谭安雄.医学技能学虚拟实验室的构建与应用[J].中国数字医学,2012,07(6):23-25.

[2]王璁,屠幼萍.基于Flash的高电压虚拟实验室探索[J].电气电子教学学报,2013,35(2):98-100.

[3]刘惠萍,张国民,喻嵘,等.虚拟实验平台在医学机能学实验教学中的作用[J].中医教育,2014,33(3):12-13.

[4]高振国.基于Flash建立的虚拟液压回路系统的研制[J].现代教育技术,2008,25(8):83-88.

小豚鼠范文第7篇

1材料和方法

1.1实验材料实验材料:浓度为0.1mg/ml的甘草黄酮溶液、浓度为0.5mg/ml的甘草黄酮溶液、浓度为1mg/ml的甘草黄酮溶液、浓度为2mg/ml的甘草黄酮溶液、二甲基亚砜溶液(由二甲基亚砜溶解,二甲基亚砜的最终浓度为1%)和豚鼠1只。

1.2实验器材麦式浴槽,温度计,张力换能系统,恒温水浴装置,供氧装置,铁架台,弹簧夹,注射器,手术剪,棉线。

1.3实验方法实验操作步骤:①取制肠段标本。取空腹豚鼠一只,迅速将其致死。然后剖开豚鼠的腹部,剪取其空肠和回肠的上半段。②在肠段的两端各穿一根线,将肠段的一端系在固定片上,另一端系在张力换能器的小勾上。然后开动记录仪,待肠管收缩平稳后,记录一段正常的肠管收缩曲线。③依次在肠段上使用不同浓度的甘草黄酮溶液,并观察不同浓度的甘草黄酮溶液对离体小肠自发活动的影响。

2结果

2.1二甲基亚砜对豚鼠离体小肠的影响实验结果表明,二甲基亚砜对豚鼠离体小肠有微弱的影响,但对本次实验结果影响不大。

2.2甘草黄酮溶液对豚鼠离体小肠的影响实验结果表,浓度为0.1mg/ml的甘草黄酮对离体小肠的收缩无明显影响,其他浓度的甘草黄酮,如浓度为0.5mg/ml的甘草黄酮、浓度为1mg/ml的甘草黄酮和浓度为2mg/ml的甘草黄酮对豚鼠离体小肠的收缩活动呈抑制作用,表现为收缩振幅降低、收缩紧张性下降,且随着溶液浓度的加大,抑制收缩作用会逐渐加强。其中,浓度为0.1mg/ml的甘草黄酮对离体小肠的抑制率为0.0045±0.030,浓度为0.5mg/ml的甘草黄酮对离体小肠的抑制率为0.272±0.038,浓度为1mg/ml的甘草黄酮对离体小肠的抑制率为0.636±0.057,浓度为2mg/ml的甘草黄酮离体小肠的抑制率为0.727±0.063。具体是实验结果。

3.讨论

3.1甘草黄酮的成分分析甘草黄酮属查耳酮和二氢黄酮,均为含有酚羟基的化合物。其对脂质过氧化终产物——丙二醛(MDA)的生成具有明显的抑制作用,对超氧阴离子自由基和超氧阴离子羟自由基有明显的清除作用。有学者证实,甘草黄酮具有明显的清除自由基、抑制脑组织脂质发生过氧化反应的作用;甘草黄酮对Fenton反应生成的羟自由基具有较强的清除作用,其效果明显优于甘露醇(甘草黄酮清除羟自由基的IC50是甘露醇的1/255,抑制羟自由基生成的IC50是甘露醇的1/139)。有报道称,有14种甘草黄酮类化合物对4种活性氧(即超氧阴离子自由基、羟自由基、单线态氧和过氧化氢)具有清除效应。有10种甘草黄酮类化合物对抗卟啉衍生物(HPD)具有明显的溶血作用。另有国外学者从甘草黄酮降低β-胡萝卜素损耗、抗低密度脂蛋白(LDL)氧化的角度阐明了甘草黄酮的抗氧化机制,并论述了这一机制与机体抗过敏、抗血栓、抗肿瘤、抗炎等作用之间的关系。

小豚鼠范文第8篇

【摘要】 【目的】观察纳子法电针治疗对哮喘模型豚鼠嗜酸性粒细胞(Eos)凋亡的影响。【方法】将48只豚鼠随机分为4组:申时(15:00~17:00)电针组、巳时(9:00~11:00)电针组、模型组及正常对照组;除正常对照组外,其他组均采用鸡卵清蛋白复制哮喘模型,治疗组分别于不同时段取定喘、肺俞、经渠穴电针治疗;采用苏木素—伊红(HE)染色法和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法,检测Eos计数及肺组织中Eos凋亡率。【结果】模型组Eos计数显著性升高(P<0.001),Eos凋亡率无显著性变化;申时电针组和巳时电针组Eos计数均显著性降低(P<0.001),Eos凋亡率均显著性升高(P<0.001),其中申时电针组2项指标优于已时电针组(P<0.05或P<0.001)。【结论】按时辰取穴的纳子法电针治疗哮喘的疗效优于不按时辰治疗者,其机制可能与降低模型豚鼠气道的Eos计数与凋亡率有关。

【关键词】 哮喘/针灸疗法; 纳子法; 肺组织/病理学; 细胞凋亡; 疾病模型,动物; 豚鼠

目前哮喘的发病率和死亡率呈逐年上升态势,如何更有效地治疗哮喘成为全球医学界的一大难题。中医学采用针灸手段治疗哮喘疗效确切[1],其中纳子法是中医时间医学代表的一种经典针灸方法,强调不同时辰脏腑气血盛衰状况不同,针灸效应亦不同。有学者[2]认为子午流注纳子法的优越性就在于强调选择针灸时间的同时亦强调选取适当穴位, 从而最大限度地发挥穴位的效应。但目前尚未见运用纳子法电针治疗哮喘的相关报道。本实验观察纳子法电针治疗对哮喘模型豚鼠的治疗效果,以进一步明确其治疗机制,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物及分组 健康豚鼠48只(由中山大学实验动物中心提供,编号0018507) ,体质量350~400g,雌雄各半,随机分为4组: 申时电针组(A组)、巳时电针组(B组)、模型组(C组)和正常对照组(D组),每组12只。

1.2 主要试剂与仪器 鸡卵清蛋白(Sigma 产品,批号:A5503);多聚甲醛(天津百世化工,批号:915);脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)试剂(Chemicongoncan公司产品,批号:S7100);电针机(SLT-B型全信息电针治疗机);超声雾化器(粤华WH-2000,粤汕);定量分析生物显微图像光学处理系统(南方医科大学病理教研室提供)。

1.3 模型复制[3] A、B、C 3组动物均以100g/L鸡卵清蛋白液1mL腹腔注射致敏。致敏后第7天将3组动物置特制激发箱内,以10g/L鸡卵清蛋白溶液喷雾激发,按个体差异每次 2~10min , 直至“哮喘”发作(点头呼吸) , 连续5d。正常对照组以等容积生理盐水代替。

1.4 纳子法电针治疗 造模成功后A组于肺经昼夜气血盛衰的峰值申时(15:00~17:00),B组于肺经昼夜气血盛衰的非峰非谷值巳时(9:00~11:00),取定喘、肺俞、经渠穴电针治疗(取穴方法参照《实验针灸学》[4])。每次治疗10~15min,1次/d,6d为1疗程,共治疗2个疗程。

1.5 病理学检查 末次喷雾激发后第2天,各组动物麻醉后取出右肺,标本用100g/L多聚甲醛固定,从固定部位切取右肺组织块。

1.6 肺组织中嗜酸性粒细胞(Eos)计数及Eos凋亡率测定 切片分别做常规苏木素—伊红(HE)染色和TUNEL标记。原位凋亡标记方法参考试剂盒说明及文献[5]。凋亡阳性细胞核呈棕黄或棕褐色,与同一来源的组织HE染色对照,鉴别为Eos。细胞计数方法为在显微镜下每张切片分别连续数10个高倍视野(×400)的Eos (HE染色)和凋亡Eos (TUNEL原位凋亡标记)总数,计算凋亡细胞所占相应细胞的百分比即为Eos凋亡率。

1.7 统计学处理 采用SPSS 11.0进行多个样本均数间两两比较的q检验。

2 结果

2.1 HE染色法观察 图1结果显示,肺组织切片正常对照组支气管及肺泡结构正常,几乎没有Eos。模型组的细、小支气管管壁和伴行动脉周围有较多的Eos、浆细胞和淋巴细胞浸润,同时可见支气管黏膜皱壁增多、基底膜增厚、平滑肌增生、管腔缩窄或被黏液栓和炎性细胞闭塞等现象。两治疗组炎性改变不及模型组的变化明显。巳时治疗组的肺泡发现有中量的Eos、浆细胞和淋巴细胞浸润的炎症渗出,较少发现有明显的支气管基底膜增厚、平滑肌增生、管腔狭窄、或者被黏液栓和炎症细胞闭塞等现象。而申时治疗组只有少量到中量的炎症渗出,肺泡结构较为清晰,未发现有明显的支气管基底膜增厚、管腔狭窄或者被黏液栓和炎症细胞闭塞等现象。

2.2 TUNEL染色法观察 图2结果显示,两治疗组中Eos的TUNEL阳性细胞数相对增多;模型组Eos的数量较多,其TUNEL阳性细胞却少见;正常对照组Eos的数量较少,其TUNEL阳性细胞亦少见。表1结果显示,申时电针组与巳时电针组均可显著降低Eos计数,升高Eos凋亡率(P<0.001),且申时电针组2项指标与巳时电针组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.001)。

表1 各组豚鼠肺组织中Eos计数及Eos凋亡率比较(略)

Table 1 Comparison of lung EOS count and EOS apoptotic rate in various groups

统计方法:q 检验;①P<0.001,与正常对照组比较;②P<0.001,与模型组比较;③P<0.05,④P<0.001,与巳时电针组比较

a.正常对照组b.模型组c.巳时治疗组d.申时治疗组

图1 各组光镜下豚鼠肺组织形态比较(HE染色,×400)(略)

Figure 1 Features of guinea pig lung tissue under light microscope (HE stain,×400)

a.正常对照组b.模型组c.巳时治疗组d.申时治疗组

图2 各组豚鼠肺组织变化比较(TUNEL染色,×400倍)(略)

Figure 2 Features of guinea pig lung tissue under light microscope(TUNEL stain,×400)

3 讨论

本实验选用鸡卵清蛋白溶液腹腔注射并喷雾法复制哮喘模型,该方法操作简易、成功率高、可重复性强,已在实验研究中得到广泛应用[6]。

在观察指标选择上,Eos是目前得到公认的哮喘气道炎症的主要效应细胞[7],因此,如能使浸润于肺组织中的Eos消散,对哮喘症状的改善极为有利。哮喘气道中的Eos可能有5种减少的途径:进入气道组织的Eos数目减少;气道组织内原有的Eos大量转移、分布到其他器官;Eos坏死性死亡;Eos凋亡;Eos进入气道腔,排出体外。在上述方式中,目前认为最为可能的是Eos的凋亡[8-9]。陈金等[10]研究证明哮喘与嗜酸性粒细胞凋亡有关。与其他细胞凋亡检测方法相比,本实验所采用的TUNEL染色法是一种较为敏感和准确的方法,并可对凋亡细胞进行定量分析。但是在肺组织中确定凋亡细胞为嗜酸性粒细胞存在着一定难度,我们首先在TUNEL片上找到细胞核呈棕黄或棕褐色细胞的凋亡细胞,然后将与之对应的HE片进行鉴别。但是由于石蜡切片有一定的厚度,有时HE片和TUNEL片不能一 一对应,存在着一定困难,如何提高这方面的鉴别水平有待进一步的研究。

在治疗方法选择上,针灸作为一种污染少的自然疗法治疗哮喘发挥了一定的优势,运用纳子法电针治疗哮喘更具优越性。中医学强调“人与天地相参也,与日月相应也”,即天之阴阳随时间递相变化,势必引起人体阴阳随时间发生相应改变,故人体十二经脉内应脏腑,外应十二时辰,昼夜十二时辰经脉气血盛衰变化有其节律。“当气血流注某经所属时辰时,该经气血旺,脏气盛,穴位开,表现为该经的腧穴,该经所属的脏腑功能增强、兴奋,对治疗的敏感性增高”[11]。而“每一经盛时为24h出现1次,所以其衰时则在盛时之后12h之时,衰后12h又值当盛之时”[12]。

在取穴择时上,按纳子法原则“虚则补其母, 实则泻其子, 不虚不实取本经本穴”原则选取手太阴肺经本穴经渠,同时选用与肺密切相关的定喘、肺俞2穴。此2穴是针灸临床用以治疗肺系疾病的常用有效穴位,可起到调整肺功能、增强肺抵抗力以及促进病愈之功效[13]。基于此,根据纳子法理论,本实验选择肺经昼夜气血盛衰的峰值时辰申时与非峰非谷值时辰巳时 ,对哮喘模型豚鼠分别采用电针定喘、肺俞、经渠3穴治疗,以观察择时治疗的效应。本实验结果显示,哮喘模型豚鼠经电针定喘、肺俞、经渠穴治疗后,Eos计数值降低,Eos凋亡率上升,与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.001),说明针灸定喘、肺俞、经渠穴有降低气道局部的Eos计数、提高哮喘模型豚鼠气道周围Eos凋亡率的作用,且申时施治,即肺经气血旺盛时有良好疗效,证实了是否择时治疗之间具有显著性差异,揭示时辰与一定的穴位配伍可产生协同作用,而且子午流注纳子法的时辰—穴位配伍具有优越性, 为提高临床疗效提供了实验依据。同时也证实了传统纳子法的基本合理内核,即不同时辰机体气血盛衰状态不同,其针灸效应也不相同,提示临床治疗时应尽量采用该疾病所处经脉气血旺的时辰。

但在本实验中,模型组的凋亡率较正常组的稍高,是否因为较多数量的Eos本身能够使凋亡增加还需进一步研究。两治疗组的Eos计数、Eos凋亡率尚未恢复至正常水平,可能与治疗时间较短有关。另一方面也说明了哮喘是一种慢性顽固性疾患,提示纳子法对哮喘气道局部炎症的长期治疗效果有待于进一步的实验及临床观察来确定。

参考文献

[1]马文珠.针灸治疗哮喘的临床研究近况[J].针灸临床杂志,1997,13(10):41.

[2]涂乾.子午流注纳子法对大鼠乙酸性胃溃疡愈合质量影响的实验研究[J].武汉市职工医学院学报,2001,29(3):21.

[3]唐纯志,赖新生,张毅敏,等.穴位敷贴对哮喘豚鼠转化生长因子-β1影响的实验研究[J].新中医,2005,37(4):94.

[4]李忠仁.实验针灸学[M].北京:中国中医药出版社,2003:105.

[5]Nonclercq D, Revese D,Toubeau G,et al.In situ demonstration of apoptotic gern cells in an experimental model of chemical castration[J].Biochemical, 1997,1:12 .

[6]吕国平,崔德建.介绍一种建立大鼠哮喘模型的实验方法[J].中华结核和呼吸杂志,1995,18(6):377.

[7]赖新生,唐纯志,杨君军,等,穴位敷贴对哮喘豚鼠血清E、P选择素水平的影响[J].针刺研究,2005,30(4):219.

[8]钱小顺.哮喘嗜酸性粒细胞凋亡的调控[J].国外医学:呼吸系统分册,2000, 20(1): 6.

[9]Jonas S Erjefalt, Carl G A Rersson.New aspects of egranulation and fates of airway mucosal eosinophils[J].Am J Respir Crit Care Med,2000,161:2074.

[10]陈金,张庆荣,赵世芬.培土生金法对哮喘大鼠嗜酸性粒细胞凋亡的影响[J].山东中医杂志,2004,23(11):678.

[11]瞿岳云.中医时间医学理论及应用[M].重庆:重庆出版社,1993:29.

[12]程士德.中医时间证治学纲要[M].北京:人民卫生出版社,1994:161.