杨宗纬空白格
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杨宗纬空白格范文第1篇
【摘要】 目的 观察运脾方对小鼠溶血素抗体生成作用的影响，探讨其提高免疫功能的作用机理。方法 健康KM小鼠48只，随机分成正常对照组及运脾方大、中、小剂量组，正常对照组灌服蒸馏水，运脾方大、中、小剂量组分别灌服20、10、5 mL/kg运脾方糖浆制剂，连续给药7 d。第7日给每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞(CRBC)混悬液0.2 mL进行免疫，连续7 d。检测血清溶血光密度值。结果 运脾方大、中、小剂量组分别与正常对照组比较，小鼠的血清溶血光密度值明显增加(P＜0.001)。结论 运脾方提高免疫功能的作用机理与增加血清溶血素抗体水平密切相关。
【关键词】 运脾方；血清溶血素抗体；小鼠
Abstract：Objective To investigate the effects of Yun-Pi Prescription on hemolysin antibody， and approach its mechanism of regulating immune function. Methods Forty-eight KM mice were randomly pided into high， medium and low dose of Yun-Pi Prescription groups， which were given 20， 10， 5 mL/kg Yun-Pi Prescription respectively， and one control group with no intervention. From the seventh day， all groups were injected with chicken red blood cell for seven days. Levels of serum hemolytic optical density were measured in all groups. Results Compared with control group， levels of serum hemolytic optical density in Yun-Pi Prescription groups increased significantly (P＜0.001). Conclusion Yun-Pi Prescription remarkably enhanced immune function， which has closely relation to increasing mice levels of serum hemolysin antibody.
Key words：Yun-Pi Prescription；serum hemolysin antibody；mice
运脾方是孙远岭教授治疗儿童厌食症、反复呼吸道感染复感儿的有效验方，能显著增强食欲，提高患儿进食量，同时可以减少患儿呼吸道感染的次数，缩短呼吸道感染的持续时间。本研究通过观察运脾方对小鼠溶血素抗体生成作用的影响，探讨其增强免疫功能的作用机理。
1 实验材料
1.1 动物
健康KM小鼠48只，雄性，体重(22±2)g，SPF级，动物质量合格证号：SCXK(沪)2002-2003，上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，检疫后备用。
1.2 药物及试剂
运脾方由黄芪10 g、苍术10 g、白术10 g、当归10 g、煅龙骨15 g、焦山楂15 g、炒麦芽15 g等组成，饮片购自上海市药材公司，由本院制剂室按国家药典规定加工成糖浆制剂，批号：沪卫药剂S(98)-001-(新华)。5%鸡红细胞生理盐水悬液，自行配置。补体(豚鼠血清)冻干，0.3 g/支，购于中国药品生物制品检定所。
1.3 主要仪器
分光光度计LG721，山东高密电子仪器厂；离心机，IEC Centra CL2；37 ℃恒温箱，NAPCO 5410。
2 实验方法
2.1 分组及给药
随机分成正常对照组及运脾方大、中、小剂量组，每组12只。正常组灌服蒸馏水，运脾方大、中、小剂量组灌服运脾方糖浆制剂(大、中、小剂量组分别灌服20、10、5 mL/kg)，连续给药7 d。第7日给每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞混悬液0.2 mL进行免疫，连续7 d。
2.2 标本采集
末次给药后40 min，摘取眼球取血，3 000 r/min离心5 min。
2.3 血清溶血光密度值测定
血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清1 mL于0.5 mL 5%鸡红细胞悬液和0.5 mL 10%补体(豚鼠血清)混合，在37 ℃恒温箱中保温30 min后，置0 ℃冰箱30 min中止反应。离心，取上清液，于分光光度计540 nm处比色，测光密度值。另设生理盐水做空白对照，取其上清作为比色时调零。计算各组小鼠溶血光密度值。
3 统计学方法
数据用x±s表示，采用方差分析，用SPSS11.5进行统计分析。
4 结果
(见表1)表1 运脾方对小鼠血清溶血素抗体生成的影响(略)注：与正常对照组比较，***P＜0.001
5 讨论
现代研究显示，中医“脾”的概念不仅职司消化吸收，且与机体免疫功能密切相关。中医学的“脾”容涵着免疫学的内容。脾虚证与免疫器官、非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫、细胞因子、分子免疫以及免疫遗传学等方面异常改变均有极为显著的相关性[1]。《脾胃论》曰：“脾胃虚则肺最受病。”脾与肺是母子关系，而卫气根源于下焦，滋养于中焦，卫气强弱直接受中焦脾胃的影响。脾气旺盛，运化有力，气血充足上盈于肺，卫气发挥其充皮肤、实腠理、司开合的作用，邪不得入。脾胃虚弱，肺卫失养，肺卫不足，营阴不能内守则多汗，腠理疏松，卫外失固，稍有风寒、风热即侵入机体，表现为反复外感。运脾方由黄芪、白术、煅龙骨、炒麦芽等中药组成，具有健脾益气、培土生金之功效，用于治疗儿童厌食症、反复呼吸道感染效果显著[2-3]。
鸡红细胞对鼠类是一种较强的抗原性异物，当其被注入小鼠腹腔后其淋巴细胞便产生相应的抗体——溶血素，并释放至外周血。分离致敏动物的血清，与鸡红细胞一起温育，在补体参与下，可以产生溶血现象。红细胞破坏，释放出血红蛋白，使溶液呈红色，颜色的深浅反映了红细胞溶血量的多少，而红细胞溶血与血清中抗体含量有关。因此，测定其上清液的光密度值，则可间接判断血清中抗体形成的数量，光密度越大，则说明抗体产生量越多，反之亦然。小鼠血清溶血素的水平是一项机体非特异性免疫功能的主要指标[4-5]，溶血值的测定反映了B细胞的增殖分化以及与补体结合后向体液中分泌溶血素的能力，我们通过测定溶血素值，用以检测药物对机体防御能力的影响[6]。本实验结果显示，运脾方各剂量组溶血光密度值显著增强，并有一定量效关系，说明运脾方具有刺激B细胞分化增殖转变为浆细胞的功能，提高抗体水平，从而增强小鼠体液免疫功能。
参考文献
[1] 修宗昌，余绍源，黄穗平.脾虚免疫学机制[J].中国中医药信息杂志， 2003，10(4)：10－13.
[2] 孙远岭，顾菊美，周 纬，等.运脾方治疗儿童反复呼吸道感染的临床研究[J].山东中医药大学学报，2002，26(6)：442－443.
[3] 孙远岭，奚政君，祝明杰，等.运脾治疗对脾虚大鼠免疫功能的影响[J].中国中医药信息杂志，2005，12(12)：27－28.
[4] 王玉凤，凤良元，鄢顺琴，等.楮实子对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响[J].中华中医药学刊，2008，26(5)：1023－1025.