胆管细胞癌范文精选

1流式细胞术分析

M3受体激动剂及阻滞剂对RBE细胞凋亡的影响取对数生长期的RBE细胞，以不同浓度匹罗卡品及硫酸阿托品进行处理，对照组以未加药干预的正常RBE细胞。培养48h后，胰酶消化，收集细胞，用冷磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤2次，1×结合缓冲液重悬细胞，制成单细胞悬液,使其浓度为1×106/ml。取100μL细胞悬液，加入5μLAnnexinV-FITC和10μL碘化丙锭（PI）溶液，混匀后室温避光孵育15min；再加入400μLPBS。采用流式细胞仪（BD公司，FACSCaliber）CellQuest软件进行分析。应用SPSS17.0统计软件进行分析，数据以±s）表示，多组比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD法检验，率的比较采用x2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1RBE细胞中毒蕈碱型受体M3蛋白的表达情况

对照组、匹罗卡品组及匹罗卡品加阿托品组均出现M3受体蛋白条带（图1），以M3与GADPH的灰度比值来表示M3受体蛋白的相对表达数值（表1）。单用匹罗卡品组差异有统计学意义（F=61.86，P＜0.05）。匹罗卡品+硫酸阿托品组差异有统计学意义（F=54.51，P＜0.05）。正常对照组与阿托品组相比差异无统计学意义（F=1.45，P＞0.05）。

2.2毒蕈碱型受体M3对RBE细胞增殖作用的影响

匹罗卡品对胆管癌细胞的增殖具有抑制作用，且其抑制作用呈浓度依赖。1mmol/L匹罗卡品组及0.5mmol/L匹罗卡品组与阴性对照组相比抑制作用明显（P＜0.05），而0.1mmol/L匹罗卡品组与阴性对照组相比抑制作用不明显（P＞0.05）。且随抑制作用呈时间依赖性，随作用时间延长抑制作用逐渐减弱（1mmol/L匹罗卡品组及0.5mmol/L匹罗卡品组抑制作用在24h、48h、72h时，呈减弱趋势（P＜0.05），而0.1mmol/L匹罗卡品组随时间延长，抑制作用无差别（P＞0.05）阿托品+匹罗卡品组的吸光值明显高于相应匹罗卡品组的吸光值，即阿托品可以阻滞匹罗卡品对胆管癌细胞增殖的抑制作用。而阿托品组的吸光值与阴性对照组几乎无差别（P＞0.05），即阿托品本身对胆管癌的增殖无抑制作用。

2.3毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3对RBE细胞凋亡的影响

【摘要】 目的 通过对胆管细胞癌和肝癌的CT表现与手术病理对照分析以提高CT对其的诊断水平。方法 28例采用德机SIMENS 欢悦螺旋CT机， 常规平扫后， 以2.5 ml/s静脉团注碘海醇80～100 ml进行增强扫描。结果 7例出现软藤征；6例并发肝内胆管结石；11例出现镶嵌征；4例肿瘤局部可见肝包膜凹陷征。结论 肝脏特殊的CT征象表现对正确诊断胆管细胞癌和肝癌有一定价值， 特别是软藤征和镶嵌征对二者的鉴别诊断有重要意义。

【关键词】 肝肿瘤；软藤征；镶嵌征；肝包膜凹陷征

近年来， 伴随工业发展生活环境的改变， 肝脏恶性肿瘤也随之增加。其中肝细胞癌与胆管细胞癌， 它们在临床表现及实验室检查等方面均无特异性， 导致诊断困难[1]。作者收集自2004年8月～2013年4月至湖南省衡阳县人民医院放射科诊治的病例， 均经手术病理证实的肝内恶性肿瘤28例， 分析并总结其各自的CT表现， 为进一步认识本病提供新的依据。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 本组病例共28例， 年龄30～72岁， 平均53岁。主要临床表现：上腹部饱胀不适17例， 黄疸8例， 发热3例，触及包块15例， 伴消瘦22例。有胆道手术史， 手术后4～11年CEA（癌胚抗原）升高7例。肝功能异常13例， AFP（甲种胎儿球晶）阳性23例。

1. 2 检查方法 所有病例采用德国SIMENS欢悦螺旋CT机扫描， 检查前均口服稀释甘露醇500～800 ml并进行呼吸屏气训练。常规平扫后， 以2.5 ml/s静脉团注碘海醇80～100 ml进行增强扫描， 层厚8 mm， 层距5 mm， 螺距2.0。动脉期扫描后60～90 s行静脉期扫描， 4 min后延迟扫描。

2 结果

28例标本23例术后病理证实的肝细胞癌。CT表现：①平扫。17例呈结节型， 病灶界限清楚， 可见假包膜；5例为巨块型， CT值23～45 HU不等， 瘤内多有坏死；1例为弥漫小结节型， 5例肿瘤局部可见肝包膜凹陷征， 瘤于肝组织边缘。②增强扫描。动脉期：所有病例均明显强化（>20 HU）。门静脉期：不均匀强化18例。延迟期：强化不明显。③其他表现。肝硬化18例， 肝门、后腹膜淋巴结肿大3例， 腹水2例。

[摘要] 目的 探讨CT诊断在鉴别肝细胞癌与肝胆管细胞癌中的应用效果。方法 方便选取2013年9月―2016年7月该院收治的经手术证实的63例肝胞癌患者及20例肝胆管细胞癌患者进行研究，分别对所有患者行B超检查和64排螺旋CT动态增强扫描，比较两种检查方式的诊断效能。结果 CT诊断肝细胞癌的病理诊断符合率为92.1%，肝胆管细胞癌的病理诊断符合率为85.0%； B超分别为77.8%和55.0%，CT诊断肝细胞癌和肝胆管细胞癌的病理诊断符合率均明显高于B超。肝细胞癌患者中合并肝硬化、HBsAg阳性、AFP升高等人数明显多于肝胆管细胞癌患者，合并结石及淋巴结转移者明显少于肝胆管细胞癌；CT诊断肝细胞癌和肝胆管细胞癌存在特异性差异。 结论 螺旋CT增强扫描与延迟扫描能有效提高肝细胞癌和肝胆管细胞癌的诊断准确率，且可结合患者的临床资料及并发症影像学检查结果对二者进行鉴别，具有较高的临床应用价值。

[关键词] 肝细胞癌；肝胆管细胞癌；CT诊断；鉴别诊断

[中图分类号] R445 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2016）12（c）-0190-03

[Abstract] Objective To investigate the application effect of CT in the diagnosis of hepatocellular carcinoma and cholangiocarcinoma. Methods Convenient selection 63 cases of hepatocellular carcinoma and 20 cases of hepatocellular carcinoma in our hospital were studied. The diagnostic efficacy of the two methods of dynamic enhanced scan and spiral CT scan in all patients were compared. Results The pathological diagnosis of CT diagnosis of hepatocellular carcinoma with the rate of 92.1%， the pathological diagnosis of hepatobiliary cancer with the rate of 85.0%； B were 77.8% and 55.0%， pathological diagnosis coincidence rate of CT diagnosis of hepatocellular carcinoma and liver and gallbladder carcinoma were significantly higher than the rate of B ultrasound diagnosis. The number of patients with hepatocellular carcinoma complicated with cirrhosis， HBsAg positive， AFP were significantly higher than those in hepatocholangiocarcinoma patients， with stones and lymph node metastasis were significantly less than those of hepatocholangiocarcinoma patients. There is specific differences between CT diagnosis of hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma. Conclusion Spiral CT scan and delayed scan can effectively improve the diagnosis of hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma accuracy and examination results， identify hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma combination of the clinical data and complications of patients， it has a high clinical value.

[Key words] Hepatocellular Carcinoma； Hepatocholangiocarcinoma； CT Diagnosis； Differential Diagnosis

肝细胞癌和肝胆管细胞癌均属于原发性肝癌，其中肝细胞癌发病率占原发性肝癌的90%以上，肝胆管细胞癌则占5%左右[1]。原发性感染、起病隐匿，早期患者多缺乏典型症状，临床确诊困难，多数患者就诊时已处于中晚期。作为两种最为常见的原发性肝癌，肝细胞癌和肝胆管细胞癌具有非常相抵的生物学行为，胆管细胞癌确诊后即使门静脉受到侵犯时仍可通过手术将其肿瘤全部切除，患者预后良好，但肝细胞癌侵犯门静脉时已属于晚期，患者预后极差[2]。因此，提高原发性肝细胞癌诊断的准确率以及明确肝细胞癌和肝胆管细胞癌的鉴别诊断对于患者后续的治疗及预后具有非常重要的作用。超声和螺旋CT都是临床诊断肝内占位性病变的检查方式，其中超声由于具有无创伤、方便、价廉的特点，是首选的检查方法，但其诊断的准确率容易受到操作医师手法和主观经验以及肝脏本身质地变化等因素的影响，而螺旋CT相比较而言则具有对肿瘤组织高敏感性和高精度的特点[3-4]。为了进一步提高原发性肝癌以及肝细胞癌与肝胆管细胞癌的鉴别诊断准确率，对2013年9月―2016年7月该院收治的经手术证实的63例肝细胞癌患者及20例肝胆管细胞癌患者进行研究，对B超和CT诊断对其诊断效能进行比较，以明确CT的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

【关键词】 肝内胆管细胞癌；计算机X线断层摄像术

文章编号：1003-1383(2008)02-0206-03中图分类号：R 814.427.358 文献标识码：Bお

为讨肝内胆管细胞癌CT表现特点，笔者收集我院2003年9月～2007年6月间经病理证实胆管细胞癌7例，结合文献分析如下。

资料与方法

1.一般资料 男4例、女3例，年龄最大81岁最小20岁，平均56.5岁，病程1个月～5年不等，临床表现：黄疸5例，其中2例呈间歇性，3例呈进行性加重，3例皮肤骚痒，6例有上腹疼痛、腹胀不适伴纳差，2例有间断发热，2例近期消C，1例可触及包块，3例腹水征阳性；2例有胆道手术史；3例CEA明显增高，HBsAg均阴性，AFP均正常。

2.检查方法及典型CT表现 所有病例均空腹进行，均行平扫和增强扫描。

（1）3例用SOMATOM.AR nova扫描，造影剂为60％复方泛影葡安，用量100 ml，静脉团注；CT表现：1例平扫示肝Ⅱ、Ⅲ段实质密度减低，其内胆管扩张，轮廓不规则，增强示病变早期强化，延时强化明显，密度明显高于同层面正常肝组织（如图1），CT诊断：胆管癌；1例示肝各叶比例失调，肝Ⅰ段明显增大，Ⅱ、Ⅲ段萎缩变小，边缘轮廓凹凸不平，实质密度减低，肝内胆管扩张，其内可见多枚高密度结石，增强同前，CT诊断为：肝内胆管多发性结石、肝硬化；1例示肝门区低密度占位、边缘模糊，肝内胆管呈树枝样扩张，肝门及腹膜后可见肿大淋巴结，增强示肿块早期轻度强化，延时强化明显。诊断：胆管癌并肝门及腹膜后淋巴结转移。

（2）4例用GE.lightspeed 16层CT，造影剂为碘海醇300

[摘要] 目的:分析肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)合并胆管癌栓的CT表现,以提高影像诊断准确性。方法:回顾分析4例HCC合并胆管癌栓的临床及CT表现。结果:4例均发现HCC及胆管癌栓病灶。3例未经任何治疗的HCC病灶均具有典型的CT表现,1例临床确诊HCC并经介入栓塞术治疗的表现为病灶内高密度碘油栓塞影像。4例胆管癌栓CT影像均表现为扩张的胆管内填充软组织块影,呈条索状或柱状,胆管壁无增厚及肿瘤侵犯,远段胆管呈软藤样或螃蟹状扩张,胆管癌栓在增强扫描动脉期有不同程度早期强化,无延迟强化改变。结论:HCC合并胆管癌栓的CT表现具有一定特征性,CT对病灶的检出及定性诊断具有重要价值。

[关键词] 肝细胞癌;胆管;体层摄影术;X线计算机

[中图分类号] R445.3 [文献标识码]C [文章编号]1674-4721(2010)06(a)-087-02

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵犯门静脉形成癌栓在临床上比较常见,但HCC侵入胆管形成癌栓合并阻塞性黄疸则相对少见,占肝癌的2%~9%,目前有关HCC合并胆管癌栓的CT诊断文献报道较少,临床容易误诊,而胆管癌栓的明确诊断对临床治疗方式的制定具有重要意义。笔者收集经临床证实的4例HCC合并胆管癌栓患者的资料,并复习文献进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集的4例HCC合并胆管癌栓患者均有黄疸、乏力、纳差,右上腹痛2例,血清总胆红素升高,甲胎蛋白均升高(>25 μg/L)。4例均为男性,年龄39～63岁,中位年龄49岁。4例中乙型肝炎表面抗原阳性3例,肝硬化2例,腹腔积液1例。3例HCC未经任何临床治疗,1例经肝动脉化疗栓塞术治疗。

1.2 检查方法

[摘要] 目的 探讨CT与MRI检查在肝内胆管细胞癌诊断中的临床应用价值。 方法 回顾性分析30例肝内胆管细胞癌患者的影像学资料。 结果 MRI定性诊断准确率为96.67%，CT定性诊断准确率为73.33%，两组定性诊断准确率比较，差异有统计学意义（P < 0.05），MRI与CT定位诊断准确率比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 CT扫描与MRI检查都是肝内胆管细胞癌诊断与鉴别诊断的重要影像学手段，MRI检查更有利于病灶的早期发现与显示，值得临床推广。

[关键词] 胆管细胞癌；肝内；CT扫描；MRI检查

[中图分类号] R445 [文献标识码] A [文章编号] 1674—4721（2012）09（c）—0096—02

CT and MRI diagnosis of intrahepatic cholangiocellular carcinoma

GONG Wensong LIU Yongjiu

CT/MRI Department of Jingmen Municipal First People''s Hospital in Hubei Province， Jingmen 448000， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical application of CT， MRI testing for intrahepatic cholangiocellular carcinoma. Methods The imaging data of 30 cases with intrahepatic cholangiocellular carcinoma were retrospectively analyzed. Results The qualitative diagnosis accuracy rate of MRI was 96.67%， while the rate of CT was 73.33%， there was significant difference between two groups （P < 0.05）. And level diagnosis rate of CT and MRI， there was no significant difference between two groups （P > 0.05）. Conclusion CT and MRI are important imaging methods to diagnosis and antidiastole the intrahepatic cholangiocellular carcinoma， while MRI testing is better to detect and reveal the focus in early stage， is worthy for being widely used in treatment.

[Key words] Cholangiocellular carcinoma； Intrahepatic； CT scan； MRI examination

[关键词] 胆管细胞型肝癌诊断 误诊

[中图分类号] R445[文献标识码] A[文章编号] 1005-0515（2011）-08-312-01

胆管细胞型肝癌较为少见(据上海医科大学中山医院手术病理证实的病例中占肝脏原发恶性肿瘤的3.25%)，CT诊断医师上往往由于临床经验不足易误诊，从而失去合理治疗的最佳时机，我们遇到5例，现报告如下：

1 临床资料

1.1 一般资料 本组男4例，女1例，年龄32岁-72岁，均为B超发现肝占位而行CT扫描。其中3例误诊为肝浓疡，2例误诊为肝血管瘤。

1.2 手术病理 5例在本院或上级医院均行手术切除，均为单发病灶。肿瘤位于肝左叶4例，肝右叶1例，直径4.6cm-6.8cm。镜下为典型腺癌细胞中纤维组织丰富。

2 讨论

2.1 对本病的临床特点认识不足在原发性肝癌中，胆管细胞型肝癌的发病率约3.25%左右；其病理学及临床表现与肝细胞型肝癌不同，胆管细胞型肝癌来源于肝内胆管上皮细胞，在大体标本上肿块呈灰色，质硬、坏死多见，无肝硬化。光镜下，胆管细胞型肝癌具有腺癌的一般特征，高分化这细胞呈立方形或柱形，染色浅谈内无胆汁滴，在癌细胞内、腺管内或间质内，常见粘液成分，分化低者细胞异性或核分裂相明显。特点为癌细胞中纤维结缔组织丰富，部分病例可见到钙化成分。胆管细胞型肝癌以单发为主，大多位于肝左叶，男女发病相近，肿瘤远侧肝内胆管扩张，位于左叶时多伴肝左叶萎缩。肿瘤侵犯肝静脉、门脉少见；多无乙型肝炎感染史及肝硬化病史，多以腹痛、扪及上腹部肿块或US发现肝占位而就诊，AFP测定多在正常范围[1]。因而，影像诊断应密切结合临床。

【摘 要】目的：对肝内周围型胆管细胞癌的 MRI 表现及病理进行对照研究，提高其诊断与鉴别诊断水平。材料和方法：分析经手术或穿刺活检病理证实的行MR检查患者35例。结果：35例中，肿块型19例、管周浸润型11例和管内生长型5例。MR平扫，病灶均为T1WI稍低或低信号，T2WI稍高或较高信号，增强后：早期强化不明显或周边强化，延迟后内部呈斑片状、分隔状甚至均匀性强化。伴有其内或周围有胆管扩张，或伴胆管结石，所在肝叶萎缩。结论：肝内胆管细胞癌MR增强扫描能较好反映其影像学特征，延迟后内部强化是其特征性影像表现。结合其他MR征象和临床综合分析，可与肝内其他疾病相鉴别。

【关键词】胆管细胞癌；病理学；磁共振成像

【中图分类号】R735.8 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）07-4594-02

胆管细胞癌根据发病部位分为周围型胆管细胞型肝癌、肝门型胆管细胞型肝癌和远端胆管细胞癌.肝内周围型胆管细胞癌 （Intrahepatic peripheral cholangiocarcinoma， IHPCC） 是肝内一种少见的原发恶性肿瘤，它的发病率仅次与肝细胞肝癌，而居第二位，占肝内原发性恶性肿瘤的 5%-15%[1]。 MRI 检查是诊断IHPCC常用的有效检查方法之一。本文通过分析经病理证实的 IHPCC 病例共计 35 例， 探讨其 MR 表现特点及其病理基础， 以期提高 MRI 对IHPCC 的诊断和鉴别诊断水平，对临床医生确定正确的治疗计划有重要指导意义。

1 资料和方法

1.1一般资料

搜集2013年1月～2014年1月在我院手术或穿刺活检并经病理证实的IHPCC患者35例，男25例，女10例，年龄20～76岁， 平均48岁。病程 2周 -5年。临床上主要表现为右上腹部疼痛饱胀、胸背痛、食欲不振、消瘦、间歇性巩膜黄染、 乏力、畏寒发热、或无痛性进行性黄疸伴有皮肤瘙痒等症状。部分患者有胆囊或胆道结石史，或因其他原因体检时发现有肝内占位性病变。 35例中行手术治疗者 （包括肝叶切除、剖腹探查）共计 29 例，6例行 B 超引导下肝穿刺活检，全部病人均经病理学证实。

1.2检查方法

【中图分类号】R44 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2011)05－0239－01

【摘要】目的：探讨螺旋CT在诊断肝门部胆管细胞癌中的价值。 方法：回顾性分析21例肝门部胆管细胞癌的CT平扫和增强扫描的表现。重点观察肿瘤的形态特征、肝内胆管扩张程度、范围、肝门部血管受侵及实质脏器与周围转移的情况。结论：螺旋CT动脉期、门脉期、延迟期扫描不但有利于观察肝门部胆管癌的强化和形态特点，更有利于观察肿瘤沿周围血管浸润的情况和肝内有无子灶的。

【关键词】癌 肝门部胆管细胞 螺旋CT 延迟扫描重建

Intrahepatic bile duct carcinoma diagnostic CT

【Objective】 to study the spiral CT in diagnosis of liver bile duct carcinoma portal vein of value. Methods: a retrospective analysis of 21 cases of liver portal vein bile duct carcinoma CT scan and enhance the flat esau performance. Key observation tumor in the morphological characteristics, intrahepatic bile ducts dilation degree, limits, liver vascular invasion by the portal vein and parenchymal visceral with surrounding metastases. Conclusion: spiral CT arterial, portal period, delay period scanning is beneficial not only to observe liver lobectomy in strengthening and morphological characteristics, is more advantageous to observe the peripheral vascular tumor inolement situation and intrahepatic without son foci.

【key words】cancer Hepatic portal vein bile duct cells Spiral CT Delay scanning reconstruction

肝门部胆管细胞癌是肝脏的一种原发性肿瘤。起源于左右肝管汇合处胆管的上皮层，占胆管细胞癌的25％ ［1］。与肝癌不同，胆管细胞癌缺乏血液供应，对化疗、放疗不敏感，手术治疗是获得长期生存的最重要因素。手术前能对肝门部病变作出明确诊断并清楚其对肝门部胆管、血管的侵犯程度，区域性淋巴结转移及远处转移情况，对手术方案的制定意义重大［2］。目前螺旋CT检查是临床上诊断本病最常用有效的手段。笔者收集了经手术病理证实的，资料相对完整的21例肝门部胆管细胞癌，探讨螺旋CT检查在其诊断中的价值。资料与方法

1 临床资料：本组21例均经手术病理证实，男9例，女12例，年龄3673岁，其中大于50岁者18例，占85.7％。主要临床症状是中上腹胀痛不适，进行性加重，间歇性皮肤巩膜黄染，黄疸，体重下降，脂肪泻。AFP检查均为阴性。有5例胆道结石手术史，其中2例此次仍见胆管结石。

1材料与方法

1.1实验材料

人胆管癌QBC939细胞株由医学院实验室提供；采用RPMI1640培养液、FCS胎牛血清、P-S双抗青霉素-链霉素美国（GIBCO公司）进行细胞培养，使用时按89:10:1比例配制成完全1640培养液做工作液；细胞培养板（美国Costar公司）；Src激酶特异性抑制剂PP2（Sigma公司，美国）；兔抗人磷酸化Src单克隆抗体（Tyr416，Millipore公司）；鼠抗人β-actin单克隆抗体（北京博奥森生物技术有限公司）；Transwell侵袭小室（8pm孔径）（Millipore公司）；细胞计数试剂盒-8（CCK-8）（碧云天生物技术研究所）；mRNA试剂盒(QIAGEN公司)；cDNA逆转录试剂盒(Thermo公司)；RT-PCR试剂盒(罗氏公司)。

1.2实验方法

1.2.1细胞培养及实验分组人胆管癌QBC939细胞用含10％胎牛血清和P-S双抗的RPMI1640培养液，置于37℃、体积分数为5％的CO2培养箱内进行培养；常规更换培养液，利用胰酶对细胞消化传代，实验采用处于对数生长期的细胞。实验共设四组，即空白对照组、实验A组、实验B组、实验C组（分别用2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L的Src激酶特异性抑制剂PP2处理）。

1.2.2PP2溶液配制Src激酶特异性抑制剂PP2溶解度为20mg/mL，利用DMSO作为溶剂，配制PP2饱和溶液。用含10％胎牛血清的培养液稀释获得50μmol/L的PP2母液进行备用，使用时根据需要再稀释获得不同浓度的工作液进行实验操作。

1.2.3WesternBlotting检测PP2对QBC939细胞Src激酶磷酸化的影响取对数生长期的QBC939细胞分别用2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L浓度的PP2处理48h后，以BCA法测定细胞裂解后获取的蛋白含量。取80μgSDS-PAGE，至PVDF膜，5％脱脂奶粉进行非特异性抗原封闭，加入1：500Tyr416，1：200的β-actin作为内参对照，4℃过夜，用含0.1％Tween20TBS洗膜，加入1：1000带有辣根过氧化物酶标记的二抗，室温下反应1h，TBS洗膜后DAB显色并记录。

1.2.4人胆管癌QBC939细胞体外侵袭检测50mg/L基质胶按1：4稀释液包被8μm孔径Transwell小室滤膜的上表面，置于37℃5％CO2培养箱中温育1h，并用L-15水化小室滤膜上下表面。消化并收集细胞，离心去培养液。PBS洗2遍，用含0.1％BSA的L-15培养基重悬细胞，调整密度为1×105/mL细胞悬液。先在小室上层加入4组200μL细胞悬液，混匀后向下室加入600μL10％FBS的L-15培养液。将24孔板置于37℃无CO2培养箱中培养。48h后移出，置于4％多聚甲醛中固定30min，1％结晶紫染色10min，倒置显微镜观察，每组6个视野。实验重复三次。