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D―二聚体的检测与应用

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【中图分类号】R446.61【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2012)10-0019-02

D-Dimer检测技术的发展史:

1972年,Gaffney首先提出 D-Dimer检测,可作为监测凝血性疾病的“有用的工具”。 1983年,Rylatt等首先报道了用单克隆抗体(DD-3B6/22) 检测D-Dimer(乳胶凝集法)。当时被誉为“金标准”。 90年代,ELISA分析法、乳胶增强型免疫分析法等。 目前有超过30种检测方法和20多种单抗被使用。90年代末到本世纪初,免疫比浊法在凝血仪上实现了自动化检测。

1对象与方法:

1.1一般资料:D-二聚体的产生:D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子ⅤⅢ交联后再经纤溶酶水解所产生的一种特异降解产物,是监测纤溶活性的有价值的指标,我们通过测定血浆D-二聚体含量,探讨血浆D-二聚体测定在临床诊断意义及应用。

D-二聚体片段的异源性:在继发性纤溶亢进时,由于个体差异,纤溶酶的水解程度不同患者血浆所包含的D-二聚体片段中,可含有1个或两个以上D-二聚体,其分子量50~228 000 Dal 产生的降解片段间差异显著目前对D-二聚体的检测,实质上是对包含有D-二聚体的纤维蛋白片段的测定,在循环体内并不是一个结构简单均一的物质,而是含有D-二聚体结构的大小不同片段的混合物。D-二聚体单克隆抗体的特异性:1983年,Rylatt等首先报道了用单克隆抗体(DD-3B6/22)目前有超过30种检测方法和20多种单抗被使用各品牌试剂中的抗D-二聚体单克隆抗体是针对不同分子量的纤维蛋白降解片段制备的,不同试剂间差异非常显著。

1.2方法:D-二聚体检测试剂敏感性强 适用于24小时作常规定量分析,有标准、质控物检测试剂盒目前市场上用于检测D-二聚体的试剂品种有很多种,大体上可分为两类:一类是以欧美产品为代表,主要用于DVT/PE排除筛查特点:灵敏度高,检测范围相对较窄。另一类是以日本产品为代表,主要是用于DIC诊断特点:灵敏度相对较低,检测范围较宽标准化问题无统一的国际标准,目前有超过30种检测方法和20多种单抗被使用。存在两种报告单位:D-dimer(DDU)和纤维蛋白原当量(FEU) 抗体对D二聚体不同片段有不同的亲和力不同的试剂有不同的干扰情况原因主要是患者血浆DD片段的异质性。生产厂家单抗的多样性,乳胶颗粒大小不等,结合单抗能力有差异,反应后吸光特性也不一样。目前校准物包括交联纤维蛋白凝块被消化处理后的血浆,部分纯化的D-二聚体制品及高分子量纤维蛋白寡聚体制品等。美国临床实验室标准化协会(CLSI) H59-P推荐指南不同疾病的溶栓治疗,D-二聚体峰值变化的时间有所不同。在急性心梗、脑梗溶栓后1~6h D-二聚体达到峰值,24h降至溶栓治疗前水平;在DVT溶栓治疗时,D-二聚体峰值常出现在24h或以后。慢性期DVT患者,溶栓前D-二聚体含量高于正常,而溶栓后D-二聚体含量不升高,或迅速下降至正常范围,说明此时仅有少量新鲜血栓形成,大部分为机化的陈旧血栓,溶栓常不能收到满意效果。