乙肝“大三阳”“小三阳”与血清病毒含量之间相关性分析

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[摘要] 目的：探讨荧光定量PCR检测血清HBV-DNA与血清HBV标志物的关系。方法：采用IFMA、TRFIA方法及荧光定量PCR方法同时检测94份肝炎患者血清，并对结果进行对比分析。结果：乙肝“大三阳” HBV-DNA检出率为87.72%，乙肝“小三阳” HBV-DNA检出率为21.62%，两组间比较（P

[关键词] 聚合酶链反应；DNA；肝炎病毒；乙型

[中图分类号]R512.6[文献标识码]C [文章编号]1673-7210（2008）07（b）-192-01

乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物检查是目前临床分析和判断患者病程和传染性的重要依据。随着分子生物学的发展，荧光定量PCR检测技术逐渐应用于临床诊断和治疗。本文应用该技术检测乙肝患者血清中HBV-DNA浓度，同时检测“两对半”指标，旨在观察在传统乙肝“两对半”模式中HBV-DNA的浓度变化，为临床提供新的信息。

1材料与方法

1.1材料

患者来源于2005年12月～2006年8月在北京航天总医院肝炎门诊就诊的病人。其中，男性65例，女性29例，年龄18～60岁，平均35岁。共取94份乙肝患者血清。临床诊断符合病毒性肝炎防治方案标准[1]。

1.2乙肝病毒标志物的检测

用IFMA方法检测HBsAg，抗-HBs、HBeAg。用TRFIA方法检测抗-HBc，抗-HBe。试剂盒为苏州新波生物技术有限公司生产，按试剂盒说明书严格进行操作和判断结果。仪器为中国上海产的AT-2000时间分辨免疫荧光分析仪。

1.3 HBV-DNA定量检测

基因扩增仪FX-2500，荧光电量分析仪FX-990(中国杭州郎基科学仪器有限公司)，荧光定量PCR检测试剂盒为深圳匹基生物工程股份有限公司提供。操作及结果判断参照试剂盒说明书。

2结果

见表1。

根据HBV血清标志物的不同情况分为“大三阳”“小三阳”，同时结合HBV-DNA的含量，通过表1进行对比，“大三阳” HBV-DNA检出率为87.72%，“小三阳”HBV-DNA检出率为21.62%，两组间比较（P

3讨论

“大三阳”和HBV-DNA：“大三阳”指的是“表面抗原”“e抗原”和“核心抗体”同时阳性，表中第一组即为“大三阳”，当病人检测是“大三阳”时，HBV-DNA阳性率可达87.72%，说明“大三阳”患者在荧光定量PCR方法与IFMA、TRFIA方法两种测定方法上有良好的一致性，均表明体内HBV有活动性复制[2]，因此“大三阳”的病人具有较强的传染性，需进行抗病毒治疗。

“小三阳”和HBV-DNA：“小三阳”是指“表面抗原”“e抗体”和“核心核体”同时阳性，表中第二组即为“小三阳”，当病人检测是“小三阳”时，HBV-DNA阳性率为21.62%和第一组相比（P

以前认为，血清HBeAg转换成抗-HBe后，通常伴随着HBV复制的停止，而本结果显示抗-HBe为阳性，患者HBV-DNA阳性率为21.62%，说明抗-HBe存在并不表示患者体内没有病毒复制，所以“小三阳”患者体内是否有活动性复制及其水平如何，单靠“两对半”测定是无法准确判断，而必须进行HBV-DNA检测。

HBV感染在我国人群中较多见。准确检测HBV感染后人体内病毒存在的状态,对判断预后及进行有效治疗有重要价值[3]。乙肝“两对半”是HBV在人体内的一种免疫状态而表现出的各种模式，是诊断HBV感染的传统方法。荧光定量PCR法是检测HBV本身，而且能进行量化，能更准确、更灵敏地反映HBV感染状况，是目前检测HBV复制最敏感、应用广泛的技术。本文结果显示,在不同乙肝五项模式中, 荧光定量PCR检出HBV-DNA的阳性率不同, “大三阳” HBV-DNA检出率高，“小三阳” HBV-DNA检出率低，说明“大三阳”患者 HBV的复制较活跃,而“小三阳”的患者,也并不说明HBV已在患者血清中消失, 血清中仍尚有少量HBV复制。单纯根据“两对半”结果判断HBV感染、传染性及HBV是否在体内复制有许多缺陷，因此同时进行HBV血清标志物检测及HBV-DNA定量检测，将对治疗方案的选择及疗效的判断，具有重要的临床意义。

[参考文献]

[1]中华医学会传染病与寄生虫病学分会.肝病学分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华传染病杂志, 2001, 19 (1): 56.

[2]方芳，浦春，陈有华.乙型肝炎病毒DNA定量与乙肝二对半及血清酶ALT的关系[J].皖南医学院学报，2006，25（1）：49－50.

[3]Jardi RR,Odrigue Z F,Buitim,et al.Quantitative detection of hepatitis B virus DNA in serum by a new rapid real-time fluorescence PCR assay[J].J Viral Hepat,2001,8:465-471.

（收稿日期：2008-05-14）

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