竹柏和长叶竹柏叶中穗花杉双黄酮的含量对比
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇竹柏和长叶竹柏叶中穗花杉双黄酮的含量对比范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
【摘要】目的:利用,以穗花杉双黄酮为对照品,测定十三批次的竹柏和竹柏叶中穗花杉双黄酮的含量。方法:高效液相色谱法,以Agilent Hypersil ODS C18柱(4.6mm*150mm,5μm);乙腈-0.05%磷酸水液为流动相,梯度洗脱;检测波长为310nm。流速1.0ml/min,柱温20℃。结果:竹柏叶中穗花杉双黄酮含量在0.1618mg/g～0.5721mg/g之间,显著高于长叶竹柏叶(0.039mg/g～0.1304mg/g)。结论:本法结果准确,操作方便,可作为竹柏和长叶竹柏叶质量控制方法的参考;穗花杉双黄酮在两者中含量差异明显,可作为两者理化鉴别参考。
【关键词】竹柏;长叶竹柏;穗花杉双黄酮;HPLC;含量测定
罗汉松科竹柏Podocarpus nagi (Thun. ) Zoll et Mor和长叶竹柏Podocarpus?fleuryi?Hickle具有较强的抗肿瘤作用,均含有穗花杉双黄酮,且含量较高[1]。为了控制竹柏和长叶竹柏的内在质量,参考文献[2、3]的方法对其共有的特征性成分穗花杉双黄酮进行含量测定研究。
1材料与仪器
1.1仪器Agilcnt 1100型高效液相色谱仪(美国惠普公司);BS124S电子分析天平(德国Sartorius); BP211电子分析天平(德国Sartorius);超声清洗器(北京医疗设备二厂)。
1.2试药乙腈为色谱纯,磷酸、甲醇等均为分析纯,水为三蒸水。穗花杉双黄酮对照品由广东省中医研究所提供,纯度为99.8%。
1.3样品竹柏叶和长叶竹柏叶均采集于广东省广州市,原植物经广东省中药研究所蔡岳文副主任中药师鉴定,分别为罗汉松科竹柏Podocarpus nagi和长叶竹柏Podocarpus?fleuryi。经水分测定,鲜品竹柏叶含水量约33.7%,鲜品长叶竹柏叶含水量约53.4%。
2方法与结果
2.1方法
2.1.1对照品溶液的制备精密称取穗花杉双黄酮对照品,加甲醇溶解,制成0.013mg/ml的对照品溶液。
2.1.2供试品溶液的制备分别取药材样品,剪碎,取0.5g,精密称定,加50%乙醇10ml,称重,超声提取35分钟,取出,放冷,称重,补足损失的重量,摇匀,滤过,滤液做为供试品溶液。
2.1.3含量测定Agilent Hypersil ODSC18柱(4.6mm*150mm,5μm);乙腈-0.05%磷酸水液为流动相,梯度洗脱;检测波长为310nm。流速1.0ml/min,柱温20℃。理论塔板数按穗花杉双黄酮计应不低于5000。
2.1.4线性范围的考察分别精密吸取对照品溶液1、2、5、8、10μl进行色谱测定,按上述色谱条件测定峰面积,以进样量(X,μg)对峰面积(Y , A)进行线性回归,得标准曲线。结果显示,进样量在0.013～0.130μg范围呈线性关系,回归方程为y = 3273.1x + 1.2429,相关系数R2= 0.9998。
2.1.5精密度试验 精密吸取样品溶液10μl,按上述色谱条件,重复测定6次,测得峰面积的积分值,计算精密度,其RSD(%)为0.29。
2.1.5稳定性试验 取同一供试品溶液10μl按上述色谱条件测定0、0.5、2.5、5、20小时,测得峰面积并计算含量,结果显示20小时内稳定,RSD
2.1.6回收率试验精密吸取已知含量(0.3169mg/g)的同一批样品0.25g,分别精密加入1ml的穗花杉双黄酮对照品溶液(0.050mg/ml),按供试品溶液制备项下操作,测定含量,计算回收率,结果见表1。
2.2结果分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,按上述色谱条件测定峰面积,外标法计算各样品中穗花杉双黄酮的含量 (n=3)。结果见表2。
3讨论
竹柏属药材化学成分主要为双黄酮类成分,均含有穗花杉双黄酮。竹柏叶和长叶竹柏中穗花杉双黄酮含量存在显著差异。竹柏叶中穗花杉双黄酮含量显著高于长叶竹柏叶,竹柏中穗花杉双黄酮含量在0.1618mg/g～0.5721mg/g之间,而长叶竹柏中穗花杉双黄酮含量在0.039mg/g～0.1304mg/g之间。
(致谢:感谢广东食品药品职业学院蔡岳文副主任药师和广东省中医药研究所孙冬梅研究员提供的帮助。)
参考文献
[1]孙同兴,王雪英.竹柏属植物的分类、地理分布及药用价值[J].亚热带植物科学,2005, 34(2): 53.
[2]戴忠,王钢力,张尊建,等.卷柏属药用植物的成分分析[C].2001中国药学会学术年会论文集.上册.北京:2001.164-167.
[3]孙冬梅,罗文汇,李智勇.HPLC法测定11种卷柏属药材中穗花杉双黄酮的含量[J].中药材,2006,29(1):26