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微柱凝胶法在临床交叉配血中的应用

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摘要:目的:探讨临床交叉配血中微柱凝胶法的应用价值。方法:2012年5月―2013年5月间,我院血样标本556份,采用微柱凝胶法进行临床叉配血试验。结果:本研究中556多例标本经微柱凝胶法交叉配血,配血结果显示3例阳性,阳性率率0.93%;25例阳性结果中,主侧不合而次侧良好14例,次侧不合而主侧良好11例;此25例标本采用盐水法及凝聚胺法交叉配血试验,盐水法24例无凝集,凝聚胺法21例无凝集;25例阳性标本与抗人球蛋白试验结果均相符合。结论:采用微柱凝胶法进行交叉配血操作简单、灵敏性高、结果准确,在有条件的实验室中有着显著的临床推广应用价值。

关键词:微柱凝胶法 交叉配血 应用价值

Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2013.07.188

【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2013)07-0171-01

交叉配血是指将一份血标本中的血清和红细胞分别与另一份血标本中的红细胞和血清混合,观察有无凝聚反应法试验,临床交叉配血是确定是否能够输血的重要依据,在血型鉴定的基础上进行准确的交叉配血是临床安全输血的重要保证,因此,交叉配血时配血方法的选择十分关键。微柱凝胶法(Microcolumn Gel Text,MGT)是目前国际卫生组织(WHO)推荐的一种用于输血前的临床交叉配血方法,近年来在欧美等一些发达国家临床交叉配血试验中已成为常规性检测技术[1],2012年5月―2013年5月间,我院采用微柱凝胶法进行临床交叉配血试验,以进一步了解这一方法的应用方法及价值,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料。本研究中所使用的1480多份血液标本均取自2012年5月~2013年5月间我院血库的配血标本。

1.2 仪器与试剂。使用由长春博研科学仪器有限责任公司生产的血型血清学离心机TD-3A型。FYQ型免疫微柱孵育器。采用系统配套的微柱凝胶卡、抗人球蛋白卡、低离子强度盐溶液。

1.3 方法。微柱凝胶法:①操作方法:以低离子溶液分别将受血标本及供血标本分别配制0.5%红细胞悬液,配血卡主侧微柱加供血者血清50μl、献血者0.5%红细胞悬浮液和50μl受血者血浆.次侧微柱加受血者50μl、0.5%红细胞悬浮液和50μl供血者血浆;放置孵育器内以37℃孵育15min,专用离心机离心5min,900rpm2min,1500rpm3min后取出观察结果。②结果判断:红细胞沉积于凝胶管底部表示无凝集,为匹配;红细胞凝集于凝胶上或胶中表示凝集阳性,为不匹配。抗人球蛋白试验:按照全国临床检验操作规程第3版相关规范进行操作[2]。

2 结果

本研究中1480例标本经微柱凝胶法交叉配血,配血结果显示25例阳性,阳性率0.93%;25例阳性结果中,主侧不合而次侧良好14例,次侧不合而主侧良好11例;此25例标本采用盐水法及凝聚胺法交叉配血试验,盐水法17例无凝集,凝聚胺法11例无凝集;25例阳性标本进行抗人球蛋白试验,所有均呈阳性反应。

3 讨论

临床输血直接关系到受血者的生命安全,因此,在输血前必须进行血型鉴定和交叉配血试验以确保受血者和供血者的血型一致且不存在抗原-抗体反应,从而确保输血的安全。临床交叉配血的试验方法有盐水法、凝聚胺法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法等多种。

盐水法交叉配血操作简单快速,但只能检出IgM(Immunoglobulin M)抗体,IgG(immunoglobulin G)抗体在此方法中不出现凝集,不能直接检出,因此在进行交叉配血时即便是条件交叉的试验室也不能只进行盐水介质交叉配血。

凝聚胺法方法简便、结果明显,在国内不完全抗体的测定、交叉配血等血清学试验中的应用较为广泛,但该法可引起红细胞的非特异性凝聚,可促进红细胞抗原与抗体的结合,而如果存在可与红细胞抗原相结合的特异性抗原则凝聚胺诱导凝集现象会消失,仍存在着漏检的现象[3]。

抗人球蛋白试验的结果准确,但操作步骤较复杂,需要的时间长,且在结果判断时还要求操作者有一定的经验,难以作为常规法推广应用。

微柱凝胶技术是一项免疫学检测技术,由Lappierre于1986年发明,是采用排阻层析原理,利用微柱凝胶微孔过滤作用和抗原体特异性反应作用的检测方法,即通过离心技术,在微柱凝胶介质中,若红细胞抗原与相应抗体结合成红细胞免疫复合物,该复合物在离心力作用下不能通过凝胶间间隙而被阻滞与凝胶上或胶内;若红细胞抗原未与相应抗体结合,则分散的单个红细胞可会在离心力作用下向下运动,通过间隙沉积于微柱腔底部。

微柱凝胶中的抗人球蛋白凝胶中含有球蛋白抗体,可用于检测不完全抗体[4],同时省略了抗人球蛋白法交叉配血中洗涤红细胞的繁琐步骤,利用此种方法,操作者通过肉眼观察有无凝集即可判读结果,操作更加简便,且减少了人工误差,结果准确。我院本次研究中,采用微柱凝胶法进行2680例临床交叉配血,检出阳性结果25例,此25例阳性结果进行盐水法和凝聚胺法交叉配血,分别有17例和11例无凝聚,表明微柱凝胶法用于交叉配血灵敏性高、特异性好。

综上所述,在临床交叉配血试验中采用微柱凝胶法能够很好地简化操作步骤,操作简单,可减少人为因素造成的误差,灵敏性高、结果准确,同时结果明晰,易于判断,对提高用血质量,保证用血安全有着重要而积极的意义,在有条件的实验室中有着显著的临床推广应用价值。

参考文献

[1] 姜世辉,周玲.3种方法在临床交叉配血中的比较[J].国际检验医学杂志,2012,33(17):2121-2122

[2] 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规[M].南京:东南大学出版社,2006:253-263

[3] 杨丽萍.临床用血中两种配血方法的比较[J].中国社区医师(医学专业),2012,14(28):245

[4] 朱志虎,李鲜娜.微柱凝胶法和凝聚胺法在交叉配血试验中的应用分析[J].临床血液学杂志(输血与检验版),2011,24(4):479-480