HPLC测定方便榨菜中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠及脱氢乙酸
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摘要 建立高效液相色谱法同时测定方便榨菜中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠及脱氢乙酸5种食品添加剂的检测方法。采用高效液相色谱法，Waters SymmetryShield C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱进行分离，流动相为0.02 mol/L乙酸铵缓冲溶液∶甲醇（95∶5，V/V），流速1.0 mL/min，检测波长220 nm，一次直接进样，同时测定5种食品添加剂。各物质在0.50～100.0 mg/kg范围内呈良好的线性关系，相关系数为0.999 0～0.999 9，精密度良好，加标回收率92.5%～98.8%，RSD
关键词 高效液相色谱（hplc）；方便榨菜；安赛蜜；苯甲酸；山梨酸；糖精钠；脱氢乙酸
中图分类号 TS207.7 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）08-0271-02
Determination of Acesulfame，Benzoic Acid，Sorbic Acid，Sodium Saccharin，and Dehydroacetate in Convenience Pickled Mustard Tubers by HPLC
FENG Hui XIE Jun-hong
（Yuyao Food Inspection and Testing Center of Zhejiang Province，Yuyao Zhejiang 315400）
Abstract Detection method for simultaneous determination of 5 kinds of food additives namely acesulfame，benzoic acid，sorbic acid，sodium saccharin，dehydroacetate in convenience pickled mustard tubers by HPLC was made.Using high performance liquid chromatography，Waters Symmetry Shield C18（150 mm×4.6 mm，5 μm） were isolated from the column，the mobile phase was 0.02 mol/L ammonium acetate buffer solution∶methanol（95∶5，V/V），flow rate of 1.0 mL/min，the detection wave length was 220 nm，a direct injection，simultaneous determination of 5 food additives.The materials in the 0.50～100.0 mg/kg showed good linear relationships，the correlation coefficient were 0.999 0～0.999 9，good precision，recovery rate were 92.5%～98.8%，RSD
Key words high performance liquid chromatography（HPLC）；convenience pickled mustard tubers；acesulfame；benzoic acid；sorbic acid；sodium saccharin；dehydroacetate
方便榨菜富含蛋白质、胡萝卜素、膳食纤维、矿物质等，能健脾开胃、补气添精、增食助神，深受人们的喜爱。不过生产企业为了延长产品的保质期和增加口感，特添加苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸等防腐剂和安赛蜜（乙酰磺胺酸钾）、糖精钠等甜味剂。而这几种食品添加剂都有国家限量标准[1]，过量食用会对人体产生毒副作用，甚至引发癌症。因此，对方便榨菜进行安全质量控制尤为重要。现有的标准检测方法中，有液相色谱法[2-5]、薄层色谱法[3]、气相色谱法[4]。但是没有同时测定这几种添加剂的方法。在日常工作中，为节约时间以提高分析效率，就要求基层检测工作者研究出适合多种添加剂同时测定的检测方法。该法是建立一种简单的前处理方法，用高效液相色谱仪测定，采用样品超纯水溶液提取、稀释、过滤后进液相色谱仪分析。该法操作简单快速，测定结果满意，适合大批量样品的快速准确检测。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
仪器有美国Waters 2695型液相色谱仪带2996二极管阵列检测器、美国梅特勒-托利多ML204电子天平、金坛市亿通电子66×66位双层摇床、德国赛多利斯超纯水仪。试剂有甲醇、乙酸铵，为色谱纯，试验用水为超纯水（18.3 MΩ×cm）。
1.2 标准品溶液的配制
标准储备溶液的配制：精密称取按其纯度折算为100%质量的标准品各0.100 g，置100 mL容量瓶中，加少量水溶解并定容至刻度，配成1.00 mg/mL水溶液。4 ℃冰箱保存。
标准工作溶液的配制：根据需要准确移取相应标准储备液，用水稀释成0.50、1.0、2.0、5.0、10.0、50.0 μg/mL系列标准工作溶液，用前配制。
1.3 试样处理
取样品（m）10.0 g（精确至0.001 g）于100 mL容量瓶中，调pH值至7.0左右，用水定容至刻度，振荡，经0.45 μm滤膜过滤，滤液上机测定。
1.4 色谱条件
HPLC分析条件：C18柱，4.6 mm×150 mm，粒度5 μm。流动相：0.02 mol/L乙酸铵∶甲醇=95∶5，波长：220 nm，流速：1.0 mL/min，进样量10 μL。
2 结果与分析
2.1 检测波长的选择
该试验采用二极管阵列检测器，在190～700 nm范围内对所有分析物进行光谱扫描。结果发现，5种物质的最大吸收波长如下：安赛蜜226 nm，苯甲酸223 nm，山梨酸253 nm，糖精钠208 nm，脱氢乙酸293 nm。考虑到多数基层检测机构配置的紫外检测器，采用220 nm波长对5种物质检测。5种添加剂标准色谱图如图1所示。
2.2 流动相的选择
流动相配比对分离效果的影响试验结果表明，甲醇体积分数小于10%时，脱氢乙酸拖尾严重，甲醇体积分数在5%～10%时，脱氢乙酸又与糖精钠峰型重合，故最终选择流动相的比例为乙酸铵缓冲溶液∶甲醇=95∶5。
2.3 线性范围与检出限
对系列标准工作溶液按照上述色谱条件进样分析，以峰面积定量，得到标准溶液浓度与峰面积之间的线性回归方程，方法的检出限按3倍信噪比计算，如表1所示。
2.4 回收率与精密度
在方便榨菜中加入2种不同浓度的5种添加剂，依法提取、过滤，上机检测，计算回收率和精密度，如表2所示。结果表明，不同浓度下方便榨菜样品的回收率在92.5%～98.8%，RSD在1.0%～2.6%。5种添加剂加标溶液色谱图如图2所示。
3 结论与讨论
对方便榨菜中5种常用添加剂的分析检测，建立了同时检测方便榨菜中的5种常用添加剂检测方法，快速、简便、准确率高、重现性好，线性关系、精密度和准确度均获得满意的结果，能更好地满足基层检测单位对方便榨菜的专业分析检测，具有较高的实际应用价值。
4 参考文献
[1] GB 2760-2011食品添加剂使用标准[S].北京：中国标准出版社，2011.
[2] GB/T 5009.140-2003饮料中安赛蜜的测定[S].北京：中国标准出版社，2003.
[3] GB/T 5009.29-2003食品中山梨酸、苯甲酸的测定[S].北京：中国标准出版社，2003.
[4] GB/T 23495-2009食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 高效液相色谱法[S].北京：中国标准出版社，2009.
[5] GB/T 5009.28-2003食品中糖精钠的测定[S].北京：中国标准出版社，2003.
[6] 蒋晓彤，陈国松，姜玲玲，等.高效液相色谱法同时检测6种甜味剂[J].食品科学，2011，32（6）：165-168.