输血前不规则抗体筛查的临床意义

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摘 要 目的：探讨筛查不规则抗体对临床输血的意义，以保输血治疗安全有效。方法：对2009年7月-2010年7月来本院拟输血的患者标本,进行输血前不规则抗体检测,并对抗体筛检阳性者进一步行抗体鉴定,并对检测结果进行统计分析。结果：在3 145例被检血清标本中，用微柱凝胶法检出血型不规则抗体阳性者10例，阳性率为0.32%，其中，抗C 4例,抗D 3例,抗E 2例，抗Ec 1例，均属于Rh血型系统。结论：在输血前对受血者血液进行血型不规则抗体筛选、特异性鉴定, 输注不含相应抗原的血液, 对确保输血安全及效果均有重要的临床意义。

关键词 不规则抗体 抗体筛查 输血反应 输血安全

中图分类号：R457.1；R446.62 文献标识码：B 文章编号：1006-1533(2012)07-0024-02

在血型抗体中，除抗A、抗B或抗AB以外，由血液免疫产生的血型抗体，在血型血清学检验中被称为不规则抗体，由于有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入血液中不匹配的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，轻则影响治疗结果，重则危及患者生命；此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器发育，并损害其智力发育，严重者则会危及新生儿的生命安全。

为了解A、B、O血型以外血型不规则抗体产生的频率及其类型分布，上海市中医药大学附属曙光医院在鉴定受血者A、B、O及RhD血型的基础上，应用微柱凝胶法，对拟输血的受血者血液标本进行血型不规则抗体筛选，对结果阳性者再进行抗体特异性鉴定，为受血者选择不含相应抗原以及交叉配血试验相合的血液进行输注，以保临床输血治疗的安全有效。

1 标本来源和检测方法

1.1 标本来源

自2009年7月-2010年7月，至我院进行治疗性输血和手术备血的血液病、肿瘤、消化道出血及其他疾病患者3 145例，年龄12~90岁，其中男性1 833例，女性1 312例。

1.2 方法

1.2.1 试剂

微柱凝胶抗人球蛋白卡[强生(上海)医疗器材有限公司]。标准试剂红细胞，抗体鉴定谱细胞1～11号，IgG抗D、抗C、抗Ec、抗E试剂血清和抗人球蛋白试剂均由上海市血液中心提供 。

1.2.2 仪器

微柱凝胶卡37 ℃专用孵育器、卡式离心机由强生(上海)医疗器材有限公司提供，血库专用离心机由台湾贝索生物技术有限公司提供。

1.2.3 微柱凝胶卡检测方法

抽取被检者血液标本3 ml，置37 ℃水浴10 min，离心分离血清与红细胞，在微柱凝胶卡上标记被检者姓名及血型不规则抗体筛查细胞的编号，分别吸取血型不规则抗体筛查细胞悬液10 μl，被检者血清40 μl和缓冲液50 μl加入微柱凝胶卡中， 置37 ℃专用器孵育10 min，使用BioVue卡式离心机离心5 min，肉眼观察结果。红细胞均匀沉于管底者为阴性，悬浮于凝胶表面或凝胶中段者为阳性。对阳性标本再用试管法做间接抗人球蛋白试验，进行对照比较，对确试验仍为抗体筛选阳性的血液标本再用谱细胞进行抗体特异性鉴定。

1.2.4 间接抗人球蛋白试验

在试管内加入被检者血清2滴和2% ～5%试剂红细胞悬液1滴，混匀，在37 ℃孵育1 h后，用生理盐水洗涤3次，倒尽末次洗涤的盐水，吸干试管边缘的水分，于试管内加入抗人球蛋白试剂2滴，3 000 r/min离心15 s，观察结果， 有凝集者为阳性，无凝集者为阴性;在阴性结果的试管内加入质控细胞1滴，3 000 r/min离心15 s，出现凝集者说明试验结果可靠。

1.2.5 质控对照细胞的制备

1） 阳性质控细胞的制备人抗D血清2滴加O型RhD阳性压积红细胞2滴，混匀置37 ℃致敏30 min，用生理盐水洗涤3次备用。2） 阴性质控细胞的制备 人抗D血清2 滴，加O型RhD 阴性压积红细胞2滴或AB血清2滴加O型RhD阳性压积红细胞2滴，混匀置37 ℃30 min，用生理盐水洗涤3次，倒尽末次洗涤的盐水，吸干试管边缘的水分，于试管内加入抗人球蛋白试剂2滴，3 000 r/min离心15 s，观察其结果。

1.2.6 血型不规则抗体特异性的确认

对血型不规则抗体筛选试验阳性的血液标本，在排除冷凝集素和其他假凝集干扰以后，进行血型不规则抗体特异性鉴定，对照该抗体与谱细胞反应格局确认血型不规则抗体的特异性，并同时检测被检者红细胞上的相应抗原是否为阴性。

2 结果

3 145例被检者中检出血型不规则抗体10例，阳性率为0.32% （10/3 145），与不规则抗体在正常人群中检出率为0.3%～2.0%的报道相符[1]。其中男性患者阳性4例，均有输血史；女性患者阳性6例，4例有输血史，2例有妊娠史。红细胞不规则抗体阳性的抗体鉴定，结果分别是抗C 4例，占40%（4/10），抗D 3例，占30%（3/10），抗E 2例，占20%（2/10），抗Ec 1例，占10%（1/10）均属于Rh血型系统。此10例患者分别采用特殊配血、输注不含相应抗原的血液或输注洗涤红细胞等方法进行输血治疗，结果安全有效。

3 讨论

本研究结果显示，本院检出的不规则抗体以Rh血型系统占多数，主要是经多次反复大量输血或妊娠免疫等刺激产生。Rh血型系统是最复杂的遗传多态性血型系统之一，被视为是临床上产生溶血性输血反应的主要原因。所有的Rh抗体都有潜在的临床意义，RhE、RhC抗原的免疫原性虽不如RhD抗原强，但任何输血量都可刺激机体产生相应抗体，因此抗E、抗C是引起交叉配血不合、新生儿溶血病和溶血性输血反应的重要原因之一[2]，且多在A、B、O血型正反定型不符、交叉配血困难、新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血等进行血型血清学检查时才被发现[3]。不规则抗体多为免疫球蛋白G( IgG)类抗体，IgG抗体属单倍体，分子长度约24 nm，在盐水介质中不能凝集，只能致敏相应的红细胞，必须通过特定的方法（如牛血清蛋白、酶、抗球蛋白和凝聚胺等）才能使致敏红细胞发生凝集。此次不规则抗体筛查阳性的10例患者，后分别采用特殊配血、输注不含相应抗原的血液或输注洗涤红细胞等方法进行输血治疗，保了输血治疗的安全有效。

由A、B、O血型不相容引起的急性溶血性输血反应并不常见，主要由人为差错引起，而A、B、O血型系统以外的不规则抗体是引起溶血性输血反应的主要原因。若受血者抗体阳性，而又输注了有相应抗原的红细胞，可引起溶血反应，造成溶血或输注无效。故进行不规则抗体筛检(尤其对有输血史及妊娠史的患者)，检出有临床意义的抗体，选择不含相应抗原的血液输注，可有效减少或避免溶血性输血反应的发生，对保输血安全具有重要意义。

目前，美国、日本和澳大利亚等国家均已将不规则抗体筛查列入常规检测。在我国，尚未将不规则抗体检测作为输血前的常规检测项目，本研究在输血前常规检测不规则抗体，保了输血安全，提高了输血治疗效果，值得临床推广。

参考文献

[1] 向东, 张雄民, 王键萍, 等. 22 例患者血型不规则抗体分析[J]. 临床输血与检验, 2003, 5(2): 103-105.

[2] 朴春花, 严花实, 许青松, 等. Rh血型系统不规则抗体5例[J]. 中国输血杂志, 2010, 23(7): 557.

[3] 杨世明, 张红丽, 张勇萍, 等. 自身免疫性溶血性贫血患者的血清学特性检测分析[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2008, 24(8): 834-835.

（收稿日期：2011-12-12）