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微生物及检验实验教学应注意的安全教育

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微生物是肉眼看不见,有一定形态结构能在适宜环境中生长的细小生物,包括细菌、放线菌、螺旋体、立克次氏体、支原体、衣原体、真菌和病毒等。在微生物实验中,可能接触病原微生物,若防护不当有可能造成感染,如何克服学生对微生物的恐惧,不敢进行微生物实验,又防止疏忽大意造成感染和环境污染呢?本文从主要从微生物特征,标本采集、实验室设计、安全设备及个体防护、安全制度和操作规程等方面对微生物及检验实验教学中应注意的安全教育问题进行阐述,以免教学事故发生,避免环境污染。

1 实验前充分掌握了解病原微生物特征,特点及传播途径

微生物几乎无处不有,与人类,动植物息息相关,其中绝大多数微生物对人类的生产生活有益,只有一部分微生物对人、动植物有害,能引起各种疫病和植物病害称病原微生物,病原微生物能引起人畜各类疾病的发生和传播,微生物及检验实验能从发病个体中分离出引起疫病的微生物,确定引起该传染病的微生物种类为防治疫病提供可靠依据。实验前要充分了解各类微生物的生长传播特点,区分细菌与病毒及其生长环境和条件,懂得各类病原微生物的传播特点及致病种类,是否传播人畜共患病等。对于某些微生物致死的个体是严禁剖检的要注意区分,如疑似炭疽杆菌感染致死的病畜尸体严禁剖检。

2 正确安全采集处理标本

标本采集是微生物检验成败的关键,标本采集过程中应遵循无菌操作,根据微生物的生长和繁殖特点,采集需检病原微生物,保证提供微生物生长所需的营养、温度、PH范围,渗透压及适应的呼吸环境。对采集标本进行正确处理和保存使实验结果正确科学合理。

2.1 标本采集

采集被检个体黏液、粪尿做检验时应采集新鲜的被检个体黏液和粪尿以防待检微生物死亡变性,检验动物性产品,应及时采集病变部位,对患病动物应从刚死亡的动物体或刚扑杀的濒死期的动物体采集标本。自然死亡的病例应在死亡后6小时内采集病料。作病毒分离或病毒抗原检查的标本,应在疾病刚流行时从发病初期和流行期的动物体上采集,做血清学检查时应分别在发病初期和相隔2~3周后采取,对于严禁剖检的动物尸体,不做剖检,以免发生传染和环境污染。如对疑似炭疽杆菌感染致死的动物尸体可在耳端末梢采集血液检查,取血后立即用烙铁将创口烙焦或用浸透0.2%升汞的棉球将其覆盖。

2.2 标本处理

所采标本应放入经灭菌的容器内,并用橡皮塞盖好。液体标本应装入玻璃管,火焰封口,对采集的固体病毒标本应保存在灭菌的50%甘油磷酸缓冲盐水中,使其中的病毒保持稳定。

2.3 标本的保存

采集的标本应在1~2小时内进行实验室检查,对标本进行分离培养,路途较远时,应将标本装入冰壶内带入实验室,实验室如无法对标本进行病毒检查时应将标本保存于700C以下的冰箱内。

3 微生物及检验实验宣的设计与建造

根据卫生部有关微生物实验安全规则,微生物及检验实验室不能少于3间,其中学生实验室一间,微生物培养室一间,微生物实验准备室一间。微生物实验室不能与其它实验室混用,只能作为专门实验室使用。实验室的设计与建造应尽可能安全、科学、合理与适用。

3.1 微生物实验室应设在专门实验区,有隔离防护措施。

3.2 实验室内表面应易于清洁,不适宜用地。地面应防滑,无缝隙,实验台表面应能防水,耐酸碱、耐有机溶剂、耐热,耐用于消毒的相关化学物质。

3.3 实验室中的家具应牢固。各种家具和设备之间应保持一定间隙,以易于清洁,实验室使用的椅子及其它器具,应覆盖易于清洗的非织物。

3.4 应配备实施各种消毒方法的设施,如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理,有专门放置生物废弃物的容器,房顶安装紫外消毒灯。

3.5 实验室要设置通风换气措施,每小时不少于3~4次通风换气,应设置窗莲窗纱。

3.6 安装生物安全柜时,要考虑到房间的通风和排风,不会导致生物安全柜超出正常参数运行。生物安全柜应远离门、远离能打开的窗,远离行走区,远离其他可能引起风压混乱的设备,保证生物安全柜气流参数在有效范围。

4 微生物及检验实验室安全设备及个体防护

4.1 实验室应配备必要的生物安全柜,消毒设备,相应的消毒药品或其它物理遏制装置,实验前教会学生正确使用。

4.2 当必须在生物安全柜外处理微生物时,需采取面部保护措施如眼镜、口罩、面罩或其它防溅装置。

4.3 学生进入实验室内实验必须使用专用的防护性外衣或制服。学生到非实验室区域(如教室、图书馆、寝室、食堂)时,防护服必须留在实验室,防护服可以在实验室内处理,也可以在洗衣房中洗涤,但不能带回寝室。

4.4 实验中需戴手套。当实验结束时或手套破损时,应摘除手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用。戴手套不能接触“洁净”设施表面(如书本、电话等),也不宜到实验室外。脱掉手套后,要用肥皂洗手。

4.5 对实验样品采取离心、剧烈震荡或混匀、开启装有传染源的容器(容器内部的压力可能与大气压不一致)均应在生物安全柜或其他物理抑制设备中进行,并使用个体防护设备。若选用真空采血管或带安全罩的离心杯实验,采血管或离心杯须在生物安全柜中打开或在离心机中静置30分钟后打开。

5 微生物及检验实验室实验安全制度和操作规程

制定和遵守实验安全制度和实验操作规程是确保学生安全的核心,微生物实验室的建筑格局,实验防护用品,防护措施及设计是能基本能满足学生实验要求的,实验室很难改变。如何培养学生安全观念,科学态度很必要。

5.1 制定微生物及检验实验室安全规则、学生实验守则、实验员工作职责等规章制度。学生实验前充分了解微生物实验规则及注意事项,实验中严格遵守各项规章制度以确保实验安全。

5.2 实验中要穿实验服,如沾有可传染的材料应脱下浸于消毒药水中(如5%石炭酸等)过夜或高压灭菌后再洗涤。

5.3 沾有病原微生物的器皿和培养物应先消毒(置于高压灭菌锅内高压灭菌20~30min)再在指定地点洗涤,检查用过的动物尸体、脏器、血液等应先消毒再掩埋。

5.4 正确使用各类仪器用品,接种环、接种针使用前后必需置火焰中烧灼灭菌,用移液管吸取液体不能以口吸,平皿一般要平翻放,皿底在上皿盖在下,含有培养物的试管不能平放以防液体流出,棉塞要在火焰附近,禁放在桌上以防污染。

5.5 实验操作中勿谈话或思考其它问题,禁止在实验室中饮食,用嘴湿润纸笔等文具用品,防止用手指或其它物品与面部和眼睛接触。

5.6 实验室中如发生意外,如吸入细菌或病毒,划破皮肤,污染台面等应报告教师及时处理,对人员进行必要的救治,对污染台面及地点消毒处理(用布蘸5%石炭酸覆盖过夜),并记录和汇报。

5.7 做好标记和记录,对所用各种试剂、染料、培养物、动物等均须标记明确,详细记录每日操作和观察结果。

5.8 菌种和毒种不能带出实验室,所有培养物,废弃物在运出实验室之前必须灭活,实验仪器设备在运出修理或维护前必须进行消毒,实验完毕后应先用消毒药水消毒再用清洁水洗手,每日至少消毒一次工作台面,将实验室整理清洁后才能离开。