中草药饲料添加剂诱导哈萨克羊规律研究

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摘要 为了了解中草药饲料添加剂诱导哈萨克羊的生殖激素变化规律，采用酶联免疫法（ELISA）测定外周血液中E2、P4、MLT、FSH和LH等5种重要生殖激素的浓度。结果表明：血液中E2和P4呈现波动式变化，FSH和LH呈现规律性脉冲式变化。结果提示E2和FSH与绵羊的非繁殖季节有关，高浓度的P4和LH对开启或维持绵羊的有重要作用，为通过中草药饲料添加剂调控绵羊提供激素方面的理论依据。

关键词 中草药饲料添加剂；哈萨克羊；诱导；生殖激素

中图分类号 S816.7 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）10-0243-03

Study on Estrus Laws for Inducing by Chinese Herbal Medicine Feed Additive in Kazak Sheep

DANG Le 1 FU Xue-feng 2 SHI Gang 2 *

（1 The Animal Husbandry Station of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Urumqi Xinjiang 830009；2 Institute of Animal Science，Xinjiang Academy of Animal Sciences）

Abstract The purpose of this study was to analyze reproductive hormones change rule of estrous kazak sheep，which were induced by Chinese herbal medicine feed additive.The concentration of reproductive hormones were measured by using enzyme-linked immunoassay（ELISA），including estradiol（E2），progesterone（P4），melatonin（MLT），follicle stimulating hormone（FSH） and luteinizing hormone（LH） of peripheral blood.The results showed that the E2 and P4 fluctuated type change，and the FSH and LH pulsed type change in blood.These results indicated that the concentration of E2 and FSH changed related to the anestrous season sheep estrous，and the high concentrations of LH and P4 played an important role for opening or maintaining sheep estrous.The study will provide the theory basis of reproductive hormones change rule by Chinese herbal medicine feed additive in regulate and control sheep estrous.

Key words Chinese herbal medicine feed additive；Kazak sheep；estrus induction；reproductive hormone

中草药饲料添加剂具有天然性、多功能性、无毒副作用、无抗药性等特性，是目前研发的热点[1-4]。中草药饲料添加剂可刺激母羊的生殖器官和调整母羊的生殖内分泌，诱导周岁羊当年，缩短周岁羊的周期、配种时间，达到快速提前以及促进排卵，提高产仔率以及产出率的目的[5]。

哈萨克羊为我国三大粗毛绵羊品种之一，具有较高的肉脂生产性能，以季节繁殖为主，产羔率103%[6]。本研究以季节性的周岁哈萨克羊为研究对象，检测补饲中草药诱导周岁羊与不周岁羊外周血液中雌二醇（estradiol，E2）、孕酮（progesterone，P4）、褪黑激素（melatonin，MLT）、促卵泡激素（follicle stimulating hormone，FSH）和促黄体素（luteinizing hormone，LH）等5种重要生殖激素的浓度，分析各生殖激素的浓度变化差异，以期阐明控制哈萨克羊的生殖激素变化规律。

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.1.1 试验动物。在绵羊季节（10―12月），选取体重接近、体格大小、年龄和饲养管理均一致的周岁哈萨克羊8只，随机分成试验组和对照组各4只，分栏饲喂。

1.1.2 供试饲料。天康671周岁羊颗粒精料补充料，成分：粗蛋白≥20.0%、粗纤维≤5.0%、粗灰分≤12.0%、脂肪≥2%、钙0.8%～1.2%、总磷≥0.5%、食盐0.3%～0.8%、水分≤14.0%、蛋氨酸≥0.3%、能量 ≥3 200。

1.1.3 中草药饲料添加剂。中草药由当归、党参、黄芪、淫羊藿、益母草、覆盆子、女贞子、香附按一定的比例组方。将所有药物用中草药粉碎机粉碎，过40目筛，拌匀备用。

1.2 试验方法

1.2.1 饲喂方法。试验期为23 d，试验开始前3 d为预试期，然后进行20 d的正试期。供试羊只在正试期分别于每天早晨10：00进行饲喂，试验组每天早晚饲喂正常饲料，对照组在正常饲料中添加中草药饲料添加剂，每天均按时补水；从试验完毕后开始每天早晨（10：00）用试情公羊对母羊进行试情。

1.2.2 鉴定。选择成年种公羊试情早晚各1次，并观察外的变化。母羊时常鸣叫，举尾拱背，后肢开张，频频排尿，食欲减退，愿意接受公羊爬跨与，时静止不动。外充血，肿胀的同时可以看到黏液分泌，盛期其黏液量增加，稀薄透明。而不或结束后则表现为远离雄性，当强行牵引接近时，往往会出现躲避行为甚至踢、咬等抗拒行为。试情时间为 1 h，如发现母羊被公羊追随并爬跨，母羊站立不动接受爬跨，即被认为表现，观察并且记录。

1.2.3 血液样品采集。选择在和不（对照）的母羊每天10：00―12：00采集非抗凝血1次，每次3 mL，共20 d（一个完整的采血周期），37 ℃静置10 h，22：00析出血清后转移到干净的1.5 mL离心管中，放入-20℃冰箱待测。

1.2.4 激素的测定。E2、P4、FSH、LH、MLT均按照试剂盒步骤进行测定。

1.2.5 统计分析。试验结果以平均值±标准误差表示，用SPSS13.0软件进行方差分析，并检验其差异显性。

2 结果与分析

2.1 哈萨克羊的特点

调查发现，试验组母羊明显表现出特征，且有一定规律：非繁殖季节成年母羊的周期、持续时间分别为17～18 d、24～48 h。

2.2 试验组周岁羊血液中E2、P4、FSH、MLT和LH的变化规律

由表1可知，5种激素中P4分泌量基本稳定，差异不显著；E2分泌量呈波动式，11月21―27日E2的分泌量显著低于其余几天，差异显著；在12月3―5日LH分泌量显著高于11月13―17日，11月25日LH分泌量又显著低于10―23日；FSH的分泌量在11月21日、23日、25日显著高于其他几天。

2.3 对照组周岁羊血液中E2、P4、FSH、MLT和LH的变化规律

由表2可知，P4在整个周期中分泌量差异性不显著（P>0.05）；E2在11月29日到12月5日分泌量显著高于11月10―27日（P0.05）；LH 12月1日的分泌量显著高于其他几天（P

2.4 试验组与对照组周岁羊血液中E2、P4、MLT、FSH和LH的变化比较

由图1可知，试验组和对照组一个周期内血液E2的变化趋势不同，母羊与不母羊差异明显。在整个周期中，母羊血清中E2分泌量在第5天有小的脉冲变化，第6天与不母羊差异明显（P

时含量升高；不的母羊E2变化趋势与母羊不同，不母羊E2含量相对高于母羊11～12 d，且较多时候差异显著。

由图2可知，试验组周岁羊与对照组周岁羊血液中P4浓度变化趋势相似，但母羊P4含量高于不母羊。母羊在第2、3、4、5、11天与不母羊相比差异显著

（P

由图3可知，试验组和对照组一个周期内血液MLT的变化趋势不同，母羊与不母羊差异十分明显，对照组与试验组差异极显著，对照组各MLT含量明显都高于试验组周岁羊，但试验组周岁羊MLT变化相对稳定。

由图4可知，试验组母羊与对照组母羊外周血液中FSH浓度变化趋势相似，母羊在第5～8天之间高于不母羊且在第8天差异显著，在第2、3、13天间不母羊FSH含量高于母羊且在第3天差异显著。初步推测，FSH可能与非繁殖季节绵羊的有关。

由图5可知，试验组周岁羊与对照组周岁羊外周血液中LH的变化趋势相似，均在11月9日有脉冲高峰，且11月17―21日2组分泌量相似，12月1日对照组E2分泌量

显著增加。但在11月19―21日母羊LH的含量高于不母羊的含量且在第13天存在显著差异。结合期母羊LH的含量变化可以推测高浓度的LH可能对开启和维持绵羊的有一定影响。

3 结论与讨论

3.1 讨论

3.1.1 补饲中草药诱导哈萨克母羊分析。本研究发现，通过中草药添加剂诱导哈萨克羊的时间为7 d以后表现症状，15 d以后排卵。而常规激素诱导羊时间一般为3～7 d表现症状，排卵时间相差很大[5，7]。这可能是二者作用母羊个体靶器官不同引起的，激素直接作用于卵巢上的特异受体。而由于中草药成分复杂，其作用器官是整个生殖系统，这种作用效果虽然缓慢，却更接近于自然状态。

3.1.2 哈萨克羊血液中E2浓度变化情况。E2主要来源于卵巢的卵泡内膜细胞和卵泡颗粒细胞，E2对动物的不同刺激会引起和性周期的发生[8]。母羊时，卵泡内膜细胞分泌大量E2，此时E2含量达到峰值[9]。在周期中，大卵泡中E2浓度显著高于小卵泡，在繁殖季节周期中绵羊血液可检测出2个雌激素峰[10-14]，这与本研究非繁殖季节母羊E2含量在周期中的变化趋势相符合。但是E2的波动峰低于繁殖季节，这可能是因为绵羊在非繁殖季节卵巢仍然处于活跃状态，卵泡能够产生甾体激素E2，每次LH的升高总会伴随着E2的升高，导致绵羊乏情的可能原因是E2对促性腺激素的分泌发挥负反馈调节作用，使LH浓度低于正常时所需要的量，从而不能够启动。

3.1.3 哈萨克羊血液中P4浓度变化情况。研究表明，孕酮对母羊的具有“启动”作用，可以促使卵巢从相对静止状态转变为活跃状态，从而恢复母羊的正常和排卵[14-16]。Suttie等报道，短日照可以促进P4分泌，而长日照则具有明显的抑制作用[17]。本研究中母羊P4含量高于不母羊，可以看出P4的分泌量不仅与日照有关，且可以推测P4的含量对绵羊的有显著影响。

3.1.4 哈萨克羊血液MLT浓度变化情况。本研究中一个周期内血液中MLT的变化趋势不同，对照组各MLT含量明显都高于试验组周岁羊，但试验组周岁羊MLT变化相对稳定。大量研究表明，促性腺激素的季节性变化是引起哺乳动物季节性的原因之一，这种变化与E2负反馈的季节性改变密切相关。MLT作用于垂体主要是通过调节E2对垂体的负反馈，间接影响FSH和LH的分泌。E2抑制垂体的效果最明显，能很大程度减少因GnRH引起的LH分泌。但是，E2对下丘脑和垂体的抑制作用有二相性，即乏情期，E2对下丘脑和垂体抑制作用强；在期，E2的抑制作用变弱，这说明MLT参与调节E2的二相性[18-21]，这与本研究结果相符。

3.1.5 哈萨克羊血液中FSH浓度变化情况。FSH可促进卵巢卵泡的生长发育和卵泡颗粒细胞增生以及雌激素合成和分泌，刺激卵巢内卵泡的生长，引起母羊生殖器官和的变化。张海泉等研究显示，促黄体素脉冲与促性腺激素释放激素脉冲是一致的[22]。彭夏雨等研究表明，FSH可能参与绵羊早期卵泡的发生，动态添加FSH更有利于体外培养卵泡的发育和组织活性的维持[23]。以上研究为期FSH的变化，与本研究非繁殖季节母羊FSH的含量变化相似，在时FSH浓度上升。

3.1.6 哈萨克羊血液中LH浓度变化情况。LH可促进卵泡的成熟和雌激素的释放，诱使卵泡壁破裂而引起排卵，并参与卵巢黄体期的形成，从而相对抑制表现。研究表明，LH在繁殖季节时维持在较高的水平，而在乏情季节则保持在基础分泌水平[9，12，14，18-19]。本研究中在非繁殖季节的绵羊LH有明显上升趋势，即非繁殖季节的绵羊血液LH含量高于不绵羊，与以上研究结果有相似之处。

3.2 结论

通过研究发现补饲中草药饲料添加剂可以诱导哈萨克周岁羊。试验激素结果显示，哈萨克羊外周血液中E2和P4呈波动式变化，LH和FSH呈脉冲式变化，MLT参与调节E2的二相性。本研究结果表明，E2和FSH与绵羊的有关，高浓度的P4和LH对开启或维持绵羊的有重要作用。

4 参考文献

[1] 祝耀德，胡庆平，刘兴隆.中草药饲料添加剂的作用与开发[J].中国兽药杂志，2005，39（10）：28-30.

[2] 陆春波，葛蕾.中草药饲料添加剂的主要作用和发展前景[J].浙江畜牧兽医，2007，32（5）：16-17.

[3] 柳志余.复方中草药添加剂对香猪生长性能和血液生化指标的影响[J].黑龙江畜牧兽医，2014（2）：95-96.

[4] 秦绪光.中草药复方添加剂对繁殖后期种公鸡繁殖性能和血液生理生化指标的影响[D].杨凌：西北农林科技大学，2006.

[5] 杨保田，安芳兰，廖吉方，等.中草药饲料添加剂对母羊繁殖性能的影响[J].中国兽药杂志，2010，44（10）：57-60.

[6] 贾琦珍，杨菊清，罗康波，等.特克斯县哈萨克羊的品种资源概况[J].新疆畜牧业，2011（1）：26-29.

[7] 贾少敏，张英杰，刘月琴.中草药饲料添加剂的作用及对羊生产性能的影响[J].中国草食动物科学2012 （增刊1）：101-103.

[8] 石国庆.绵羊繁殖与育种新技术[M].北京：金盾出版社，2010.

[9] 李江源，CLARKE I J.雌二醇对动情间期切除卵巢母羊黄体生成激素脉冲分泌的抑制作用[J].中华内分泌代谢杂志，1990（3）：36-38，63.

[10] 曾国庆，王海云，徐一树，等.宁夏滩羊周期血液中促黄体素（LH）、孕酮、雌二醇-17β含量的测定[J].畜牧兽医学报，1980（3）：27-31.

[11] 张英杰，刘月琴，储明星.小尾寒羊高繁殖力和常年内分泌机理研究[J].畜牧兽医学报，2001，32（6）：510-516.

[12] 李运生.小尾寒羊产后诱导及5种生殖激素变化的研究[D].杨凌：西北农林科技大学，2007.

[13] 贺建宁，王金鑫，狄冉，等.常年和季节性绵羊在不同季节生殖激素变化规律[J].畜牧兽医学报，2013，44（10）：44-50.

[14] 毕浩磊.永昌肉羊新品种群外周血液中雌二醇、孕酮和睾酮变化规律的研究[D].兰州：甘肃农业大学，2013.

[15] 曾国庆，蒋广泰，徐直.宁夏滩羊妊娠期孕酮含量的变化[J].中国畜牧杂志，1983（1）：8-9.

[16] 周桂云，柴君秀，王和平，等.宁夏滩母羊的生殖激素变化规律研究[J].现代农业科技，2009（23）：322-323.

[17] SUTTIE J M，GLUCKMAN P D，BUTLER J H，et al.Insulin-like growth factor 1 （IGF-1） antler-stimulating hormone[J].Endocrinology，1985，116（2）：846-848.

[18] 张小辉.MLT、LH和FSH对绵羊季节性的调控作用研究[D].杨凌：西北农林科技大学，2004.

[19] 侯衍猛，曹洪防，徐云华，等.莱芜黑山羊周期中FSH、LH、E2和P4的分泌规律[J].中国兽医学报，2006，26（3）：340-342.

[20] 马青，许斌，黄玉邦，等.放牧与舍饲滩羊母羊FSH、LH、E2、P4季节性变化规律研究[C]//中国畜牧兽医学会养羊学分会全国养羊生产与学术研讨会议论文集.2010：275-277.

[21] 田占伟，赵宗胜，林杉，等.乏情期新疆哈萨克绵羊血清中P4、E2、FSH和LH生殖激素变化规律分析[J].石河子大学学报（自然科学版），2015（5）：31-35.

[22] 张海泉，施振声，夏国良，等.促性腺激素释放激素及其类似物的功能与应用[J].中国兽医杂志，2006（3）：34-36.

[23] 彭夏雨，杨梅，陈童，等.动态添加FSH对绵羊卵巢皮质组织体外培养的影响[J].畜牧兽医学报2010，41（11）：26-32.