离心对尿液低浓度红细胞镜检定量计数的影响

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【摘要】目的:探讨对低浓度红细胞尿液（10/μl -100/μl）使用不离心法镜检计数红细胞的可能性。方法:尿液中加入定量红细胞，理论定值为10/μl、25/μl、50 /μl、100/μl。用离心镜检法和不离心镜检法计数红细胞。结果:离心镜检法与理论定值浓度差异较大，均值为4.52/μl、13.39 /μl、29.91/μl、 56.74/μl，平均偏差-46.15%；不离心镜检法结果与实际浓度比较接近，均值为9.11/μl、23.43/μl、47.42/μl、97.06/μl，平均偏差-5.82%；两法相比，t=2.52，P

【关键词】离心；尿红细胞；细胞计数；镜检；尿沉渣

【中图分类号】R122.1+2【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)12-0066-01

长期以来，尿液有形成分检验是否离心，文献报道不一[1]~[6]。丛玉隆等认为尿液离心检查法不适合红细胞等有形成分定量[5]，马俊龙等研究发现离心镜检法与不离心镜检比较，红细胞检测结果仅是不离心镜检法的一半[7]。但上述研究都是在尿液红细胞中高浓度（≥100/μl）以上时得出的。本文使用离心和不离心两种方法对低浓度红细胞（≤100/μl）尿液进行红细胞镜检计数，结果报告如下。

1材料与方法

1.1材料①标本来源：本院门诊病人正常尿液；正常人全血。②仪器器材：Olympus显微镜（日本）；LDZ5-2低速自动平衡离心机（北京医用离心机厂）；FAST-READ10一次性尿沉渣计数板（意大利）。

1.2方法

1.2.1不同浓度红细胞成分的尿液标本的制备选择EDTA-K2抗凝的新鲜正常的全血样本1份，用血细胞分析仪（使用校准品校准）测量红细胞数值，使用正常人混合尿液（收集多人尿液，用高速离心方法去除细胞等有形成分，留取上清夜）将红细胞含量配制成10/μl、25/μl、50 /μl、100/μl四个浓度。配制好的含红细胞的尿液标本分别由三位熟练检验人员用离心镜检法和不离心镜检法计数红细胞数量。

1.2.2离心镜检法按全国临床检验操作规程方法[8]进行，取混匀的尿液标本10ml于一次性尿沉渣专用离心管内，以1500r/min,离心5分钟，吸掉上清夜，留取管底0.2ml沉渣，充分混匀后用一次性塑料吸管滴入FAST-READ10一次性尿沉渣计数板的计数池内，稍待片刻，首先用低倍镜观察细胞分布情况，再用高倍镜计数全池9个大方格内的红细胞数。红细胞含量（细胞数/μl） =（9个大方格的红细胞数/9）×10÷50。

1.2.3不离心镜检法将配制好的红细胞尿液充分混匀，用一次性塑料吸管吸取滴入FAST-READ10一次性尿沉渣计数板的计数池内，稍待片刻，首先用低倍镜观察细胞分布情况，再用高倍镜计数全池9个大方格内的红细胞数。红细胞含量（细胞数/μl） =(9个大方格的红细胞数/9)×10

以上两种方法，每管都重复充液计数6次，取平均值。所有检测均在样本配制后2h内完成。

1.3统计学方法用配对t检验。

2结果

不离心镜检计数与理论定值比较接近，平均偏差-5.82%；但离心法镜检计数结果是理论定值的一半左右，平均偏差达-46.15%。见表1。两法相比，t=2.52，P

3讨论

尿沉渣的显微镜检查是识别尿有形成分的“金标准”，主要有离心镜检法和不离心镜检法两种，我国多建议采用离心法[9]。在实际工作中，当尿液红细胞较多时，离心沉淀反而不利镜检计数，尿沉渣检验实际无需离心，这已为检验人员所公认[4，6，7]。况且，许多研究显示，在尿红细胞中高浓度时，离心法结果与真实结果存在明显的差异，离心法结果明显低于不离心法，不离心直接计数与真实值更加接近[5，7 ，0]。离心的目的是浓缩有形成分，防止漏检，在尿有形成分浓度较低时，比如在正常参考值的上限9/μl[11]以上，到100/μl这个浓度范围内，将尿液离心，浓缩有形成分后再镜检计数似乎理所当然，但本研究显示即使在低浓度下离心法的计数结果仍然明显低于真实值，而不离心法与真实值较为接近，与丛玉隆等[5]在高浓度下的研究结果一致。

离心使红细胞计数偏低的原因主要可能有以下几个方面：①离心后红细胞沉淀不完全，上清夜还有红细胞；②离心过程中部分红细胞受到破坏；③离心管管壁有细胞的粘附；④计算时除于50这个浓缩倍数，放大了上述效应。本研究方法参考丛玉隆等的研究方法是在没有干扰物的情况下进行的，在实际工作中是否适用，马俊龙等通过研究已经得到了肯定，认为采用新鲜尿液直接计数（扩大计数范围）是尿液有形成分计数的理想方法，而离心镜检法不适合有形成分定量分析[7]。综上所述，可以认为，不离心法尿液直接镜检计数红细胞（扩大计数范围）在决定性水平上（高于参考值上限的低浓度）比离心镜检法更为敏感，更为准确，检出率更高；且该法操作简便，结果快速，无须昂贵仪器，值得基层医院推广。至于数到多少细胞的数量接近泊松分析能够达到准确定量计数的标准，尚需探讨。

参考文献

[1]黄燕逐，张东玲，王萍.定量尿沉渣分析板镜检法参考值的测定[J].中华医学检验杂志，1996，19（2）：110-111.

[2]叶美珍，曾芝如，樊季伟.比较Fast Read10法与计数板法检查尿沉渣的结果[J].上海医学检验杂志，1995，10（3）：154-155.

[3]程大林，蒋拥军，包建芳.尿沉渣Fast Read10板计数非离心法探讨[J].陕西医学检验，1998，13（3）：29-30.

[4]许会彬，张代民，李萍. Fast Read10尿沉渣定量计数板计数非离心法应用探讨[J].临床军医杂志，2001，29（1）：79-80.

[5]丛玉隆，马骏龙，张时民，等.尿液细胞成分定量分析方法学研究[J].中华医学检验杂志，2006，29（3）：211-214.

[6]吴润香，何英，刘玢.离心对尿沉渣镜检细胞计数结果的影响[J].广东医学，2006，27（4）：573-574.

[7]马骏龙，陆玉静，黎晓晖，等.尿液红、白细胞定量不同方法学探讨[J].临床检验杂志，2006，24（5）：348-350.

[8]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京：东南大学出版社，2006：293-294.

[9]丛玉隆.尿沉渣标准化建议[J].中华检验医学杂志，2002，25（7）：249-250.

[10]徐腊香，段艺，余小红.离心法尿红细胞计数结果准确性的初探[J].检验医学，2006，21（5）542-543.

[11]丛玉隆，马骏龙，李云莲，等.尿沉渣测定四种方法的参考值范围调查[J].中华医学检验杂志，1997，20（4）：229-231.

(收稿日期：2009.01.10)