异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌检测与分析

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌检测与分析范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

摘要：目的：通过调查临床分离的金黄色葡萄球菌对万古霉素的耐药性,指导临床合理使用万古霉素。方法：对我院2010年6月至2011年6月分离的金黄色葡萄球菌进行万古霉素、替考拉宁药敏试验(E试验)的数据进行回顾性分析。结果：分离到282株金黄色葡萄球菌（Sau）。其中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）114株，异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌（hVISA）3株。结论：纸片法作为常规在临床微生物可以检出万古霉素耐药的菌株（VRSA），但不适合检出异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)和万古霉素中介金黄色葡萄球菌(VISA)；虽然金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药率低,但hVISA的存在导致万古霉素治疗失败，所以hVISA的检测具有必要性和紧迫性。

关键词：异质性;万古霉素;中介;金黄色葡萄球菌

【中图分类号】R97【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2012)03-0375-01

临床甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药状况日趋严重,尤其是多重耐药株,糖肽类抗生素是其治疗的主要选择[1]。随着万古霉素临床使用的增多,逐渐导致MRSA对万古霉素敏感性降低[2]。糖肽类抗生素敏感性下降的金黄色葡萄球菌一般来自MRSA[3]。本研究对临床MRSA进行了筛查,对糖肽类抗生素敏感性下降的MRSA医院感染的现状及有关耐药机制进行了探讨。

1 材料和方法

1.1 菌株：分离自2010年6月至2011年6月赣州市人民医院临床样本的金黄色葡萄球菌282株,经美国德灵MicroScan autoscan-4微生物鉴定药敏系统和PC20鉴定和药敏板鉴定。金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)为质控株。

1.2 试剂和仪器：瑞典AB Biodisk万古霉素、替考拉宁E-test试条, 使用美国德灵MicroScan autoscan-4微生物鉴定药敏系统和PC20鉴定和药敏板。

1.3 药敏方法：药敏判断根据CLSI2010年版推荐，采用MIC法测定。数据采用WHONET5.4软件统计处理。对MRSA采用E试验检测：采用万古霉素和替考拉宁两种试纸，如果两种抗菌药物对测试菌株的MIC均低（MIC为敏感标准以下），则为万古霉素敏感菌株；如果万古霉素的MIC低（MIC为敏感标准以下）而替考拉宁的MIC高（MIC高于敏感标准），则为hVISA；如果两者的MIC均高，则为VISA[4]。

2 结果

2.1 282株金黄色葡萄球菌对17种抗生素的耐药率：阿莫西林/克拉维酸46.9%，氨苄西林97.8%，氯霉素10.7%，环丙沙星46.9%，克林霉素49.0%，头孢唑林49.0%，红霉素61.2%，庆大霉素40.8%，亚胺增南46.9%，利奈唑胺0，左氧氟沙星38.8%，苯唑西林46.9%，青霉素97.8%，利福平20.4%，复方新诺明26.1%，四环素61.2%，万古霉素0。

2.2 282株金黄色葡萄球中检出114株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），其对17种抗生素的耐药率：阿莫西林/克拉维酸100%，氨苄西林100%，氯霉素33.3%，环丙沙星83.5%，克林霉素83.5%，头孢唑林100%，红霉素91.2%，庆大霉素73.9%，亚胺增南100%，利奈唑胺0，左氧氟沙星72.0%，苯唑西林100%，青霉素100%，利福平43.5%，复方新诺明44.0%，四环素87.0%，万古霉素0。

2.3 114株MRSA中检出3株hVISA MIC结果是万古霉素≤2μg/ml,替考拉宁12~16μg/ml。

3 讨论

纸片法作为常规在临床微生物可以检出万古霉素耐药的菌株（VRSA），但不适合检出hVISA和VISA；自动化仪器如Vitekt Microscan尚不能全部检出已知的VRSA菌株，故也不能作为常规检出hVISA和VISA。CLSI建议在含有6μg/ml万古霉素平皿上滴加10微升105麦氏浊度菌液，24h 35℃培养，超过1个菌落生长，即可怀疑为对万古霉素不敏感菌株，必须再进行万古霉素的MIC测定确认是VISA或VRSA。但也不能检出hVISA。目前最好的方法是采用E试验，是由Walsh等人提出的。具体是采用万古霉素和替考拉宁两种试纸，如果两种抗菌药物对测试菌株的MIC均低（MIC为敏感标准以下），则为万古霉素敏感菌株；如果万古霉素的MIC低（MIC为敏感标准以下）而替考拉宁的MIC高（MIC高于敏感标准），则为hVISA；如果两者的MIC均高，则为VISA[4]。

3株hVISA分别来自伤口(1株)和痰（2株）样本,3例金黄色葡萄球菌感染患者,查阅患者病历可见,患者有心、肺、高血压，肿瘤等多种严重疾病且住院时间长。治疗上单独使用万古霉素或联合用药如万古霉素和头孢类、亚胺培南、利福平等均告失败,最终因多器官衰竭死亡。临床医师发现万古霉素疗效不好时要考虑万古霉素敏感性下降的可能。对万古霉素敏感性下降金黄色葡萄球菌感染者使用万古霉素治疗容易失败。

有证据显示hVISA菌株是VISA菌株前期。第1株hVISA(Mu3)是从日本1例64岁男性肺癌患者术后因MRSA并发肺炎的痰标本中分离出，该患者经万古霉素治疗（42mg/kg/天）12天无效，最后病情恶化[4]。MRSA糖肽类耐药有多种耐药机制。糖肽类抗生素的使用提供了细菌耐药性变异的生态环境和选择性压力。针对万古霉素敏感性下降葡萄球菌的出现,美国疾病控制中心提供了防治指南。除按照万古霉素应用指征用药外,必须严格监测和隔离携带或感染患者,接触人员需彻底洗手及消毒[4]。虽然目前万古霉素敏感性下降葡萄球菌的分离率很低,但实验室做好筛查和检测可以有效控制其感染与传播。监测MRSA对万古霉素敏感性的变化,并如何有效延缓或防止万古霉素耐药MRSA的出现,还值得深入探索。

参考文献

[1] 徐建国，梁国栋等译.临床微生物学手册[M].北京：科学出版社，2005（1）：2096

[2] Hiramatsu K, HanakiH, Ino T, et a.l Methicillin-re-sistant Staphylococcus aureusclinical strain with re-duced vancomycin susceptibility [J]. J AntimicrobChemother,1997,40(1):135-136

[3] PlipatN, LivniG, Bertram H, et a.l Unstable vanco-mycin heteroresistance is common among clinicaliso-latesofmethiciliin-resistantStaphylococcusaureus[J].J Microbio,l2005,43(5):2494-2496

[4] 张秀珍，妹.临床微生物检验问与答[M].北京：人民卫生出版社，2008（1）：509－510