丙戊酸钠对幼鼠代谢的影响及肝毒性的试验探讨

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇丙戊酸钠对幼鼠代谢的影响及肝毒性的试验探讨范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

[摘要]目的：通过观察丙戊酸钠（VPA）作用后的Wistar 幼鼠的肝功能、瘦素、胰岛素的变化分析对其影响因素。方法：选用SPF级3周龄雄性Wistar大鼠36只，平均体重48 g。并随机分为两组(每组23只) ，空白对照组：经口灌胃等量蒸馏水；VPA组：经口灌胃VPA 300 mg/(kg・d)，每周2次；3个月后检测体重变化、瘦素、胰岛素、血清ALT、血清AST、血清GST、肝MDA、肝GSH以及肝GST。结果：与空白对照组比较，VPA组AST、肝GST、瘦素、胰岛素显著升高（P

[关键词]丙戊酸钠；动物实验；毒理试验

[中图分类号] R332 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721（2009）05（a）-０59－０2

Effects of valproate on metabolism in rats and liver toxicity tests

LUO Yunhao,HUANG Hanhui,WANG Yanli

(The third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College Pharmacy，Guangzhou 510150，China)

[Abstract]Objective: To investigate the effects of valproate sodium(VPA) on hepatic injury and leptin,insulin via the observations of biochemical indicators in immature rat. Methods: Sixty 3-week-old male Wistar rats were randomly divided into two groups: experimental groups(VPA group) and negative control group (23 for each group).After 3 months,test the weight , Serumleptin, Seruminsulin, SerumALT, SerumAST, SerumGST,liver MDA, SerumGSH and the SerumGST. Results: Serum leptin , insulin, AST and liver GST levels in both experimental groups(VPA group) were remarkably higher than the of the negative control group(P

[Key words] Valproate;Animal experiment;Toxicology test

在目前的抗癫痫治疗中，因VPA对多种类型的发作都有效，尤其对失神发作，原发性全身强直阵挛发作效果较好，因此在临床上仍然作为一线抗癫痫药。但其对各种代谢尤其是脂质代谢的影响及肝脏毒性等不良反应也最令人关注[1]。本研究为VPA的长期使用对机体代谢功能及肝毒性影响提高试验依据。

1材料与方法

1.1动物分组及给药

选用SPF级3周龄雄性Wistar大鼠36只，平均体重48 g（实验动物购自广州中医药大学实验动物中心，合格证号：0080311号）。将大鼠随机分为两组(每组23只) ，空白对照组：经口灌胃等量蒸馏水；VPA组：经口灌胃VPA 300 mg/(kg・d)，每周2次。

1.2样本制备及检测

连续用药3个月后断头取血，分离血清，使用OlymPus AU 100生化仪测定血清丙氨酸氨基转移(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)；利用放射免疫分析法检测血清瘦素及胰岛素水平，试剂盒由北京总医院科技开发中心放免所提供。取肝左叶同一部位小块肝脏，备肝匀浆，离心取上清液，用分别用硫代巴比妥法、三硫代二硝基苯甲酸法测定肝匀浆中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和用谷胱甘肽二硝基苯法测定血清、肝匀浆中谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性的测定 （所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所，按说明书操作)。

1.3 统计学处理

使用SPSS 13.0软件分析处理，用单因素方差分析数据以x±s表示，P

2 结果

与空白对照组比较，VPA组AST、肝GST、瘦素、胰岛素显著升高（P

3 讨论

迄今为止，对于研究幼年期长期服用VPA对血清LEP、INS、ALT、AST、GST、MDA、GSH、GST等多因素综合水平影响的研究不多。

3.1 VPA引起体重增加、瘦素水平的具体机制

本实验观察到服用VPA的幼年大鼠，均显著出现了体重增加，同时血清空腹瘦素、胰岛素水平明显高于对照组，这与以往的试验结论相一致。国外对丙戊酸钠对瘦素的影响尚存在分歧，VPA引起体重增加、瘦素水平的具体机制尚不明确，目前初步认为[2]：①VPA可与肉毒碱结合，形成VPA-肉毒碱复合体，从而降低血浆中游离的肉毒碱浓度，导致脂肪酸代谢和糖异生受损，葡萄糖消耗增加低血糖刺激下丘脑中部神经元引起摄食增加。②VPA是脂肪酸的一个分支，可与长链脂肪酸相互竞争，使血糖水平降低，从而使下丘脑糖受体的刺激降低，影响中枢性饮食调节，使进食量增大。③VPA通过作用于下丘脑神经元而降低交感神经系统的活性，引起热能产生减少。上述三种机制最终都会引起脂肪沉积量增加，瘦素水平上升。因此笔者认为，血清瘦素水平的升高是肥胖的结果而不是引起肥胖的原因，此观点与国外学者一致。与瘦素一样，国外对VPA引起胰岛素水平变化的具体机制并未完全明了，非肥胖病人服用VPA后，其胰岛素水平亦高于对照组中的非肥胖病人，说明服用VPA后，肥胖病人的胰岛素水平的增高不仅仅是体重增加引起的结果。因此，本研究推测VPA引起体重增加的发病机制可能与胰岛素有关，胰岛素是引起体重增加的原因，而不是体重增加后的结果。

3.2 GST分布

GST是一项对肝损害特异性及敏感性均较强的酶，且肝组织含量丰富，GST和ALT的共同测定对慢性肝损害的诊断价值优于ALT。本研究结果与霍晓筠等[3]的临床报道相似，由于AST主要分布在心肌，其次在肝脏、骨骼肌、肾脏等组织中，推测药物反应可能涉及到心肌、骨骼肌、肾脏等组织。本研究用药组血清ALT和GST均未见升高，提示VPA尚未对肝细胞膜造成严重的损害。

3.3 GSH与VPA的关系

同时，本实验也观察到，VPA的作用尚未出现MDA含量的改变，但这不能否认过氧化反应在药物致肝损伤中的作用。Isojarvi等[4]研究VPA肝毒性机制时提出VPA先致肝细胞GSH耗竭到一定程度后才出现脂质过氧化，最后引起细胞毒作用。而GST是一类与肝脏解毒有关的酶[5]，催化GSH与化学物质的亲电子基团结合，最终形成硫醚氨酸排出体外。本实验中VPA对GST活性的诱导作用，推测可能通过催化GSH与VPA代谢产物4-烯-VPA结合起作用。

4 结论

长期服用抗癫痫药VPA对幼年期瘦素水平影响大，对幼年期容易引起脂代谢紊乱，影响幼年期的生长发育;VPA对幼年期胰岛素水平影响大，容易出现肥胖。胰岛素水平的升高亦增加了糖尿病、心血管疾病的发病概率，同时可引起机体抗氧化能力降低，提示临床应用时应对该两个系统加强观察，合理调整药量及时间。

[参考文献]

[1]李玉华,丰连功.102例癫痫患者丙戊酸钠血药浓度监测分析[J].中外健康文摘(医药月刊),2008,(2):14-15.

[2]Demir E,Aysun S.Weight gain associated with valproate in childhood[J].Pediatr Neurol,2000,22:361-364.

[3]霍晓筠,王富伟.丙戊酸钠对儿童肝脏酶活性的影响[J].辽宁药物与临床,2001,(3):35.

[4]Isojarvi JI,Rattya J,Mylla VV,et al.Valproate,lamotrigine and insulin-mediated risk in women with epilepsy[J].Ann Neurol,1998,43:446-451.

[5]陈智清,倪龙娟.有效血浓度丙戊酸钠对儿童肝功能的影响[J].浙江医学,2006,(10):869-870.

(收稿日期：2009-03-09)