葛龙舒络颗粒的制备工艺研究
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇葛龙舒络颗粒的制备工艺研究范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
[摘要] 目的：研究葛龙舒络颗粒的制备工艺。方法：以干膏得率和葛根素含量作为评价指标，采用L9(34)正交试验法优选葛龙舒络颗粒的提取工艺；以颗粒吸湿性、流动性和成型性为指标，对干法制粒的工艺进行研究。结果：最佳提取工艺为：加12倍水，回流提取2次(2、1.5 h)；干压法制备得到的颗粒吸湿性、流动性和成型性好。结论：优选得到的葛龙舒络颗粒工艺稳定可行，可应用于工业化生产。
[关键词] 葛龙舒络颗粒；正交设计；制备工艺
[中图分类号] R944.2[文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2011）04（b）-056-04
Study on the preparation technology of Gelong Shuluo Granula
WANG Wenqiong, XIONG Jianqun, GAO Xiaobo
Department of Pharmacy, Jingzhou Center Hospital, Jingzhou400000, China
[Abstract] Objective: To optimize the preparation process of Gelong Shuluo Granule. Methods: The optimum extraction of Gelong Shuluo Granule was investigated by the L9(34) orthogonal experiment with hydroscopicity, fluidity and formability as the indexes, the dry granulating process was evaluated. Results: The optimum extraction procedures were as follows: adding 12 times water, the refluing extraction was carried out for 2 times (2 hours,1.5 hours). And the hydroscopicity, fluidity and formability of the granule were in accord with manufacture requirements. Conclusion: The optimized extraction and formating processes are stable and feasible, and can be used in the production.
[Key words] Gelong Shuluo Granule；Orthogonal design；Process technical
腰椎间盘突出症[1]是临床常见病，是引起腰腿疼痛的主要疾病之一，属于中医“腰痛”、“痹症”范畴。本病主要是由于肾虚、寒凝、湿滞、瘀血而致腰府筋脉痹阻，不通则痛。治疗方法以补肾、散寒除湿、活血化瘀为主。
葛龙舒络颗粒来源于临床经验方，原方由葛根、地龙、川芎和独活等药物组成，具有消肿止痛、活血通络之功效，临床以汤剂治疗腰椎间盘突出和骨质增生疗效显著。为将本方开发成中药成方制剂，本研究以中医药理论为指导，根据现代中药化学、现代药理研究成果及临床使用特点，利用现代制剂技术对葛龙颗粒的提取、浓缩、干燥和成型工艺进行了研究，确定了葛龙舒络颗粒的制备方法。现将研究报道如下：
1 仪器与试药
DZF-6050真空干燥箱（上海一恒科技有限公司）；METTLER XS205DU电子分析天平(METTLER XS205DU，瑞士)；TC-15套式恒温器（海宁市新华医疗器械厂）；RE5298A旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；Agilent 1200高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；DC-1500 喷雾干燥机（上海达程公司）；GK-70型干式造粒机制粒（江苏瑰宝制药机械厂）。
葛根、地龙、川芎、独活等药材均购于湖北省药材公司中药饮片厂，经荆州市中心医院中药师郑迎辉鉴定符合《中国药典》2005版药材质量标准；葛根素对照品(中国药品生物制品检定所，批号752-200108)；糊精、淀粉均为药用规格；甲醇、正丁醇为色谱纯试剂，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 提取工艺的研究
根据前期药理试验结果，将本方川芎和独活等药材先行提取挥发油，葛根等其他药材水提，水提液与川芎、独活等提取挥发油后的水溶液合并，浓缩干燥后，加入挥发油制成颗粒，初步药效作用显示优于诸药合煎。故本颗粒采取分开提取的工艺路线。
2.1.1挥发油提取工艺的筛选根据文献资料[2-3]，川芎、独活等药材含有较多的挥发油，且挥发性成分具有良好的活血、抗炎等药理作用，故应进行挥发油的提取。根据预试验结果，本方中挥发油可用水蒸气蒸馏法合并提取。水蒸气蒸馏法提取挥发油的主要影响因素为蒸馏时间，可按照《中国药典》2005版一部附录X D挥发油测定方法进行蒸馏提取。
2.1.2 吸水率的考察按比例称取5倍处方量的药材3份，分别加20倍量的水浸泡，每隔1 h测量一次药材吸水量，直至药材几乎不再明显吸水为止，滤过，量取滤液体积，计算药材吸水率，求得药材吸水率为200%。
2.1.3 加水量的考察按比例称取5倍处方量的药材5份，以收油量为考察指标，加不同量的水浸泡2 h，水蒸气蒸馏提取挥发油8 h，结果见表1。
表1 加水量考察结果（n=3）
由表1可见，加水量为8倍时，提取的挥发油最多。
2.1.4 提油时间的考察按比例称取5倍处方量的药材5份，加入8倍量的水，浸泡2 h，提取挥发油，记录不同时间的挥发油收油量，结果见表2。
从试验结果可知，当提取时间达到6 h时，收油量达到总收油量的87%以上，为了节省能源，确定挥发油的提取时间为6 h。
2.1.5 挥发油提取验证实验根据因素筛选试验中确定的各条件验证3批，结果见表3。
表3 挥发油提取验证试验结果
由表3结果可知，验证结果与实验结果相近，说明该工艺基本稳定可靠。
2.2 水提工艺研究
根据预实验结果，选取浸泡时间(A)，加水倍量（B），提取时间（C），作为考察因素，各取3个水平，进行L9（34）正交试验，筛选最佳工艺条件。以葛根素的提取率和干膏得率为考察指标，进行综合评价，筛选最佳工艺。因素水平见表4，实验方案见表5。
2.2.1 正交试验样品制备
按处方量的比例称取葛根、地龙等药材共9份，分别按照表5的正交试验安排进行水煎煮提取，提取液滤过、浓缩、放冷，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.2总固体物的测定
精密吸取各样品浓缩液10 ml，至已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，照干燥失重法(《中国药典》2005年版一部附录ⅨG)测定，计算干膏得率，公式如下：
2.2.3葛根素含量测定[4]
2.2.3.1色谱条件色谱柱为Phenomenex C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（25∶75）；检测波长：250 nm；流速：1 ml/min；柱温：30℃。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文
2.2.3.2 对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品10 mg置50 ml容量瓶中，加30%乙醇使溶解并稀释至刻度，精密吸取5 ml，置25 ml量瓶中，加30%乙醇至刻度，摇匀，即得（每1 ml含葛根素43 μg）。
2.2.3.3 供试品溶液的制备精密吸取样品溶液5 ml，置中性氧化铝-D101大孔吸附树脂柱（内直10 mm，树脂高12 cm，上加中性氧化铝2.0 g）上，用50 ml水洗脱除杂，再用50%的乙醇250 ml洗脱，收集洗脱液，定容至250 ml，摇匀，过0.45 μm的微孔滤膜，取续滤液，备用。
2.2.3.4 标准曲线的绘制精密量取葛根素对照品溶液（43 μg/ml）2、4、8、12、16、20 μl进样，记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积（Y）对进样量（X）进行回归，得回归方程：Y=57 817.9X-136.48，r=0.999 8。结果表明：在0.128~1.280 μg范围内，葛根素峰面积与进样量呈良好的线性关系。
2.2.3.5样品含量测定精密吸取各正交试验供试品溶液各10 μl进样，记录色谱图，根据供试品吸收度积分值与对照品积分值，外标两点法计算，即得。
2.2.4提取工艺优化葛根作为方中君药，葛根素为其有效成分之一，且其含量测定方法成熟，可以用HPLC法测定提取物中葛根素的含量，以此来评价工艺的优劣，选择其作为评价指标之一，权重系数定为0.5。而作为有效成分煎出间接控制的一个指标，药效物质提取的多少可以从得膏率的大小来判断，权重系数定为0.5。利用SPSS12.0统计软件对评分结果进行数据处理，由直观分析和方差分析判断各因素对提取效果的影响程度，筛选出在该试验条件下的优化提取参数。正交试验结果和方差分析见表5、表6.
表6 方差分析结果表
由直观分析可知，影响提取效果的因素顺序为：加水量>提取时间>浸润时间，由此得出的最佳工艺组合为A2B3C3。经过方差分析，加水量和提取时间对提取结果具有显著性影响，而浸泡时间对实验结果均无显著性影响。综合考虑到缩短生产周期，降低生产成本等综合因素，选择A2B3C3作为水提取工艺参数，即浸泡1.0 h，提取2次，加水量为12倍，提取时间第一次为2.0 h，第二次为1.5 h。
2.2.5验证实验 为确定该工艺的优劣和稳定性，据所筛选的最佳条件，验证三批，结果见表7。由表7可知，验证试验结果与正交试验优选结果吻合，说明正交试验选出的工艺条件合理，工艺条件稳定可行。
表7工艺验证实验
2.3浓缩干燥工艺的考察
中药提取液在浓缩操作中通常要求高浓缩比，高浓缩效率，又不能损失有效成分。普通常压浓缩加热时间长，耗能大，现多不采用此法。本工艺结合现有设备条件，对提取液采用减压浓缩。试验结果表明，真空度控制在-0.05~-0.07 MPa之间，可达良好的浓缩效果。
喷雾干燥技术是流化技术用于液体物料干燥的良好方法，由于其干燥效率高，对有效成分破坏少，辅料用量少，浸膏损失少，污染源少，浸膏粉可用于多种制剂的生产，提高了成品质量，有利于规模化、规范化生产，符合GMP要求等特点，近年来已经广泛的应用于中药的生产中。本实验在固定出风温度为85℃的前提下，对影响喷雾干燥的主要因素料液相对密度、进风温度和进料速度进行了考察。以粉末含水量和粉末性状作为评价喷雾干燥效果指标，利用单因素试验法选择喷雾干燥工艺参数，试验方案和结果见表8。
表8 葛根水提液喷雾干燥试验结果
由实验结果并综合考虑喷干效率和节约工时，以料液相对密度1.10，进风温度185℃，出风温度85℃，进料速度350 r/min 为宜。
2.4成型工艺研究
2.4.1 辅料选择
由于原处方临床使用剂量较大，为了使制备的颗粒剂具备适宜服用体积，故不宜于加入过多辅料。干法制粒技术可以大大减少颗粒制备的辅料用量，成型率高，制备工艺简单，因此成型工艺采用干法制粒。本文选用价廉易得的糊精和淀粉作为辅料，以干膏粉第一次通过干法制粒机所得合格颗粒的一次成型率为指标，对辅料的配比进行优选，结果见表9。
表9 不同辅料对颗粒成型性的影响考察
结果显示，加入5%和10%的糊精颗粒的一次成型率较高，分别达到31.2%和35.1%， 为了减少辅料的用量，故选择糊精用量为5%为宜。
2.4.2 颗粒制备
按上述优选的结果，取喷干粉与5%糊精混合均匀，采用干压颗粒机制粒，工艺参数为：室温25℃，相对湿度为56%，转速15 r/min，干压送样频率为25 r/min，20目搓粒，主压为4.0 MPa。干颗粒喷加川芎、独活等药材的挥发油，混匀，分装，即得。
2.4.3休止角的测定
为保证颗粒剂量装量准确，要求填充药粉有良好的流动性。试验中采用测定休止角的方法来考察药粉的流动性。取适量药粉，用固定漏斗法测定休止角，结果见表10。由表可知，葛龙舒络颗粒休止角小于40°，流动性可以满足颗粒分装的要求。
表10葛龙舒络颗粒休止角测定结果
2.4.4临界相对湿度的测定将上述颗粒干燥至恒重后，在已恒重的称量瓶底部放入约2 mm的颗粒，准确称量后置于所列的分别盛有7种不同湿度的干燥器，打开称量瓶盖，于25℃恒温培养箱中保持96 h达到吸湿平衡后，精密称重，计算吸湿百分率。以吸湿百分率数据为纵坐标，相对湿度数据为横坐标作图，绘出颗粒吸湿平衡曲线，通过作图法求得临界相对湿度，结果见表11和图1。
临界相对湿度是药物吸湿与否的临界值，根据它确定生产时的环境湿度，由实验结果可知，制成颗粒的临界相对湿度为 60%，故在生产本制剂时，车间环境的相对湿度应控制在60%以下。
3 讨论
葛根素是本方君药葛根的主要有效成分，含量较高，且检测方法简便快速，故选其作为提取工艺考察的指标进行评价[5]。
摇摆制粒、离心造粒和干压制粒都是本工艺可以选择的造粒方法，但是由于本方属于中药制剂，具有服用剂量大，易吸潮和黏性强等特点，采用干法造粒可以减少辅料用量，提高颗粒收率，节约能源等优点，确立本工艺采用干法制粒。
干法制粒时由于中药浸膏粉末黏性大，易吸潮，导致流动性差。故在本处方的浸膏粉末中加入5%的糊精作为稀释剂，增加粉末的流动性，减少吸潮[6]。同时在生产过程中应严格控制生产车间湿度，并提高颗粒包装的密封性来增加药物在储存过程中的稳定性。中药复方颗粒剂近年来发展很快，笔者参考文献资料，在试验基础上综合研究，科学地探讨了处方组成，并全面研究了葛龙舒络颗粒剂有关制剂学参数的意义与测定，成粒工艺的设备与条件，在此基础上确定了最佳处方组成及制备工艺，具有很好的开发前景。
[参考文献]
[1].中药新药临床研究指导原则[S].北京:中国医药科技出版社, 2002: 127.
[2]陈友鸿,莫尚志.川芎挥发油成分研究[J].中药材, 2004,27(8):580.
[3]杨木华，杨志文.独活挥发油提取工艺的研究[J].中药新药与临床药理,2009, 20(6):582-583.
[4]国家药典委员会.中国药典[S]. 一部.北京: 化学工业出版社,2005:233-234
[5]李洪玉,戴诗文,寿旦,等.葛粉中葛根素的高效液相色谱分析[J].中国实用医药,2009,4(1):39-40.
[6]蔡伟庆.中药颗粒剂辅料的研究进展[J].黑龙江医药,2008,5(15):88-90.
（收稿日期：2011-01-13）
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文