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机械损伤致家兔盆腔粘连模型的建立

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本实验成功地建立了家兔盆腔粘连模型动物模型。通过肉眼观察、病理学、血液检查等观察盆腔粘连模型的复制,发现盆腔粘连病变组织造模方法、感染方式、病变特点与盆腔粘连相似,值得进一步借鉴使用。现报道如下:

1 材料

1.1 实验动物 家兔,体重2.5~3 kg,雌性,未孕。10只,由云南省中医学院动物房提供。

1.2 主要器材 医用脱脂棉:徐州利尔康卫生材料有限公司出品;医用逢合针:,批号P-1010509,上海医用逢合针厂有限公司;医用非吸收性外科缝合线:批号100412,扬州市金环医疗器械厂;持针钳、眼科镊等手术器械均为上海医疗器械(集团)有限公司手术器械厂;手术刀片,上海第二医科大学杜行医用器械厂;0号砂纸。

1.3 药品 戊巴比妥钠盐:DS179,北京鼑国昌盛生物技术有限责任公司;75%乙醇消毒液:批号100810,昆明南天化工药业有限公司出品;0.9%氯化钠注射液:批号D101123N1,昆明南疆制药有限公司;碘酊:批号100401,昆明利健消毒制品有限公司;2%强化戊二醛消毒剂,批号20100519,上海利康消毒高科技有限公司。

2 方法

健康成熟的家兔10只,用3%戊巴比妥钠盐溶液麻醉家兔,去毛备皮,在无菌条件下于下腹正中切开2 cm,暴露两侧宫角及输卵管,以0号细砂纸摩擦子宫及输卵管的浆膜层,致浆膜层明显擦伤出血。于60瓦日光灯下(距宫角及输卵管20 cm)干燥20 min,还纳于腹腔,逐层缝合。术后第14天剖腹,肉眼观察盆腔是否有粘连带形成,病理检查是否有炎症病变和血液检查盆腔微循环情况。再向输卵管-卵巢方向注射5%镁蓝溶液,同时捏紧子宫两侧,观察输卵管通畅程度(输卵管通畅的判断:通畅—注入镁蓝液无压力,见伞端有镁蓝液溢出,输卵管无局部膨大;不畅—注入镁蓝液有压力,输卵管先膨大,再见有镁蓝液溢出;阻塞—注入镁蓝液压力大,输卵管不胀,无镁蓝液自伞端溢出,有时见宫角部有蓝染。如壶腹部膨大而伞端无镁蓝液溢出则为输卵管远端阻塞)[1~2]。

3 实验结果

3.1 肉眼观察盆腔粘连情况 术后第14天剖腹,肉眼发现子宫、输卵管、大网膜全部粘连在一起,大量纤维结缔组织合成,部分输卵管增粗,整个盆腔损伤、充血,有脓性分泌物覆盖。

3.2 病理改变 取增粗的输卵管及盆腔结缔组织作病理检查,光镜下见大量纤维结缔组织明显增生,血管扩张充血,见大量炎性细胞,有淋巴细胞、浆细胞和嗜酸性粒细胞;输卵管管腔扩大,黏膜皱襞和肌层充血、水肿。电镜下细胞核核膜不清,染色质内线粒体肿胀,线粒体固缩。无纤毛细胞胞膜破坏,线粒体固缩,胞核密度模糊不清。

3.3 观察血液流变学 测家兔的血液黏度、血浆黏度及血沉和正常家兔比有统计学意义(P

3.4 观察输卵管通畅程度 双侧输卵管通畅1只;双侧通而不畅1只,双侧阻塞2只,一侧通畅、一侧阻塞2只;一侧通畅,一侧通而不畅2只。一侧通而不畅,一侧阻塞2只。

4 讨 论

4.1 技术要求 此模型制作过程中,在摩擦浆膜层时,因家兔盆腔组织脆弱,故要求用力轻,不能损伤子宫和输卵管肌肉层,尽量不影响输卵管管腔和子宫腔的组织结构,以达到只是盆腔粘连而无宫腔粘连的目的;摩擦面要覆盖整个子宫及输卵管的浆膜层,使整个盆腔全部粘连。如果需要的粘连面积小,则可以减少摩擦面积。

4.2 造模机制 盆腔粘连形成主要是由于损伤引起浆膜表面的炎性反应伴间质丧失,产生炎性细胞和血液渗出。渗出物在3天以上不溶解,其中发生纤维细胞增生,引起粘连形成[1]。

4.3 意义 异物刺激的机械损伤是引起盆腔粘连的原因之一。盆腔粘连发生在2/3开腹术患者中。目前多认为是由手术创伤、感染、异物反应、组织缺血等引起的炎症反应[3]。该方法可造成明确的盆腔粘连模型,或并伴有输卵管的异常。该复制方法简便易行,成功率高,可复制性强,笔者曾用此方法复制模型来观察多途径中药外治法治疗盆腔粘连的作用,

效果满意。进一步证实了模型的可重复性和实用性。盆腔粘连目前是临床常见疾病,复制该模型为临床深入开展盆腔粘连的治疗提供借鉴方法。

参考文献:

[1]尤昭玲.妇产科实验动物学[M].北京:中国中医药出版社,2007:93~94.

[2]黄河玲 兔慢性输卵管炎动物模型的建立[J].现代中西医结合杂志,2000,20(9):1982~1983.

[3]张巧利,吕淑兰,余姗姗.腹腔粘连、慢性盆腔痛与粘连松解术.中国妇幼健康研究[J],2006,17(3):224~226.