尿炎消冲剂对细菌性前列腺炎大鼠血IL-2、IgG及TNF-α水平的影响
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[摘要]目的：研究细菌性前列腺炎大鼠血清中IL-2、IgG及TNF-α水平以及中药尿炎消冲剂对其影响。方法：将健康雄性Wistar大鼠72只随机分为4组，分别为空白对照组、模型对照组、美满霉素阳性对照组、尿炎消冲剂组，每组18只，除空白组，其余3组全部造模。空白对照组和模型对照组给予生理盐水；阳性对照组给予美满霉素；冲剂组给予尿炎消冲剂。采用双抗体夹心法检测大鼠血清中IL-2、IgG及TNF-α水平。结果：血清IL-2水平(pg/m1)：尿炎消冲剂组为22.61±4.55，美满霉素组为18.67±5.12，模型对照组为16.39±3.45，空白对照组为24.44±4.58；血清TNF-α水平(pg/m1)：尿炎消冲剂组为12.94±2.84，美满霉素组为16.83±5.59，模型对照组为20.61±2.70，空白对照组为12.17±2.46；血清IgG水平(g/1)：尿炎消冲剂组为7.72±1.45，美满霉素组为7.76±2.14，模型对照组为4.78±1.48，空白对照组为8.17±2.43。结论：细菌性前列腺炎大鼠血清中il-2、igg显著降低，tnf-α显著升高；尿炎消冲剂能够使前列腺炎大鼠血清IL-2、IgG含量显著升高，TNF-α含量显著降低，治疗后与正常对照组无明显区别。
[关键词]细菌性前列腺炎；尿炎消冲剂；IL-2；IgG；TNF-α
尿炎消冲剂治疗前列腺炎有着很好的疗效，尤其对合并虹膜炎、关节炎的慢性前列腺炎患者疗效尤为突出，因此，我们对尿炎消冲剂免疫调节机制进行了研究。白细胞介素-2(IL-2)、IgG和肿瘤坏死因子(TNF-α)为免疫因子，我们研究了尿炎消冲剂对这些因子影响，表明尿炎消冲剂的治疗机理与这些因子有关。
1 实验材料
1.1 实验动物
wistar健康雄性大鼠72只，体重250～300g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
1.2 实验药物
尿炎消冲剂由黑龙江中医药大学附属慢性病门诊提供，黑卫药制字(1997)第0026号；美满霉素批准文号：(96)卫药准字X－196(1)号，由惠氏一百宫制药有限公司生产。
1.3 实验试剂与造模细菌
白细胞介素-2(IL-2)、IgG及肿瘤坏死因子(TNF-α)双抗体夹心法试剂盒购自北京福瑞生物工程公司；标准大肠杆菌由黑龙江中医药大学微生物教研室提供。
2 实验方法
2.1 动物分组、造模方法
造模前经一周适应性饲养，将72只大鼠随机分为4组，分别为空白对照组、模型对照组、美满霉素阳性对照组、尿炎消冲剂组，每组18只，除空白组，其余3组全部造模。每只大鼠分别进行乙醚麻醉。麻醉成功后，固定大鼠四肢于固定板上，剪去大鼠下腹部的毛，在下腹部前列腺体表部碘酒、酒精常规消毒。于大鼠尿生殖隔上方，腹中线行约1.5cm大小纵形切口，切口达腹腔，用镊子轻轻提起膀胱及两侧精囊，暴露附于精囊内侧的前列腺背叶，在两侧前列腺背叶包膜下分别注射预先配制好的大肠肝菌菌液各0.05 ml(大肠杆菌含量1×107/m1)。回纳前列腺以原位，全层缝合腹壁肌肉、皮肤后，酒精棉球擦净切口表面血迹，造模结束。用消毒纱布包扎，放回鼠笼，均自由饮食饲养。
2.2 给药方法
造模一周后，开始按下述剂量给药：空白对照组和模型对照组给予生理盐水10ml/kg/d，灌胃，一日一次；阳性对照组给药剂量为美满霉素0.018g/kg/d，临用前用蒸馏水配制成的混悬液，灌胃，一日一次；冲剂组给予尿炎消冲剂，剂量为0.6g/kg/d，用蒸馏水配制成混悬液，灌胃，一日一次；各组给药时间均连续35天，每日观察其活动、进食等情况，35天后处死动物进行相关指标的检测。
2.3 标本采集与制备
采用大鼠摘眼球法取血，每只大鼠取血约4ml，分别注入加抑肽酶的血清管和血清管(不加抑肽酶)中以3000转/分离心10min，取上层血清，于冰箱中一20℃保存测血清中IL-2、IgG、TNF-α，采用双抗体夹心法检测，按检测试剂盒说明书进行操作。
2.4 统计方法
所有数据以均数±标准差(x±s)表示，用t检验进行比较。P＜0.05为差异显著，P＞0.05为差异不显著。全部数据用SPSS11.5统计软件处理。
3 实验结果
3.1 实验大鼠的一般情况
造模后各组大鼠均有不同程度的摄食减少，精神萎靡，毛发枯黄，缺乏光泽，上述情况在一周后逐渐恢复正常。
3.2 各组大鼠血清IL-2检测情况及统计结果(见表1)
3.3 各组大鼠血清TNF-α检测情况及统计结果(见表2)
3.4 各组大鼠血清IgG检测情况及统计结果(见表3)
4 讨论
前列腺炎与免疫因素有密切关系。免疫因素引起慢性前列腺炎主要表现在两方面：一是抗原性物质刺激；二是免疫反应异常或紊乱。有人认为慢性前列腺炎的炎症反应是全身免疫功能低下的表现，还可能伴随有前列腺局部免疫功能的异常。前列腺局部的免疫功能在慢性前列腺炎的早期往往呈现异常的增强，可以迅速杀灭感染前列腺的病原体，表现为慢性前列腺炎的急性期或急性复发期；而在慢性阶段却表现出免疫功能异常低下的继发性免疫缺陷状态，病原体感染与炎症可以持续存在、反复发作或复发，不容易康复。
造成慢性前列腺炎局部免疫功能低下的原因，主要是由于病原体的反复感染或炎症反应的不断刺激，使前列腺腺泡的组织结构遭到明显破坏，出现明显的纤维化、瘢痕挛缩、腺管阻塞、前列腺液分泌量减少、腺体细胞大量死亡，使正常的抗体分泌功能和产生致敏淋巴细胞能力受到摧毁或明显抑制。前列腺组织结构的破坏，使大量的自身组织抗原(包括PSA)进入血液循环，刺激机体产生自身免疫性反应，造成前列腺的免疫性损伤，进一步加重了局部的组织破坏。所以前列腺局部免疫功能的异常，造成了前列腺炎的不同临床过程，也是导致前列腺炎久治不愈的原因。
尿炎消冲剂为纯中药制剂，由龙胆草、栀子、黄芩、柴胡、生地、车前子、泽泻、甘草、当归、扁蓄、大黄、滑石、瞿麦、丹参、熟地等中药组成。龙胆草泻肝经之热，柴胡泻胆经之热，黄芩、大黄、栀子、滑石清三焦之热，扁蓄、泽泻、车前泻小肠及膀胱之湿从小便出，瞿麦降心火，甘草调和药性，丹参活血，当归、熟地养血补肝肾，上药共奏，具有清肝利胆除湿、活血化瘀补肝肾之功。中医学认为，人是一个有机的整体，局部的病变可能是机体整体水平的失衡，主张从整体观人手，综合调理。目前对慢性前列腺炎病因病机形成的共识是湿热毒邪为病之标，贯穿于疾病的全过程，肾虚是病之本，瘀血浊邪阻滞为病之渐，病至后期往往湿热毒、虚、瘀三者并存、错综复杂。治法上采用清热利湿解毒、活血化瘀、补肾益气养血综合调理，上述治法既调节机体整体状况，又针对前列腺局部的病理变化。治法特点上既有标本兼治、缓急，又有消补兼施，治法手段与用药途径多种多样。尿炎消冲剂能够使前列腺炎模型大鼠血清IL-2、IgG含量显著升高，TNF-α含量显著降低，治疗后与正常对照组无明显区别，这表明尿炎消冲剂能抑制炎症反应，对体液免疫和细胞免疫功能进行调节，有助于病情恢复和减少病情的反复和迁延。