胶体金免疫法粪隐血阴性结果的分析处理

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[摘要] 目的：在临床检验工作中发现部分胶体金免疫法粪隐血阴性结果与临床诊断不符，其阴性结果有待于进一步分析处理。方法：将临床工作中胶体金免疫法粪隐血阴性标本分成外观正常组和异常组两组，用匹拉米同化学法进行复检，以发现免疫法中的假阴性结果。结果：胶体金免疫法粪隐血阴性颜色正常组与化学法匹拉米同复检结果一致，而胶体金免疫法粪隐血阴性颜色异常组与化学法存在较大差异。结论：对胶体金免疫法粪隐血阴性而颜色异常时需结合运用化学法进行复检，以避免假阴性结果。

[关键词] 粪隐血试验；胶体金免疫；假阴性；匹拉米同

[中图分类号] R446.13 [文献标识码] C[文章编号] 1674-4721（2011）03（b）-085-02

Analysis and processing of colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative results

CHEN Tinghong

Department of Medical Laboratory, Benniu Hospital of Wujin District, Jiangsu Province, Changzhou 213131, China

[Abstract] Objective: In the clinical laboratory work, we had found that the results of some of colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative were different from those of the clinical diagnosis, and its negative results needed to be further analysed and processed. Methods: In clinical work, colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative samples were divided into normal and abnormal appearance of two groups, and Pyramidon chemical re-examination conducts a review to find false negative results of immunosorbent assay. Results: Colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative group with normal color was consistent with pyramidon results with chemical re-examination, but colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative group with the abnormal color was quite different from chemical method. Conclusion: Colloidal gold immunoassay fecal occult blood negative for the abnormal color needs to combine chemical methods to re-examine, It can conduct a review in order to avoid false negative results.

[Key words] Fecal Occult blood test; Colloidal gold immunoassay; False-negative; Pyramidon

粪便隐血试验是诊断胃肠道出血性疾病的一个重要指标，当胃肠道少量出血时，粪便外观可无明显变化，肉眼不见血色。因少量红细胞被消化分解，以致显微镜下也无从发现，这种肉眼和显微镜均不能证实的出血称为隐血。隐血试验可作为消化道恶性肿瘤普查的一个筛选指标，其连续检测对早期发现结肠癌、胃癌等恶性肿瘤有重要的价值[1]，因此隐血试验成为人们不断深入研究的热点。 胶体金免疫层析法，将单克隆技术与胶体金技术结合，利用抗人血红蛋白或抗人红细胞基质的单克隆抗体与人血红蛋白或人红细胞有高度特异性的特点检测粪便隐血。由于不受饮食限制，灵敏度和特异性高，反应快速，血红蛋白为0.2 μg/ml时即可阳性[2]，在临床得到大力推广。但在实际应用中发现有部分粪便外观明显酱黑色，临床有明确出血诊断，胶体金法检测为阴性[3]，以致患者和临床医生对检验结果产生质疑，因此笔者对胶体金免疫法粪隐血阴性结果用匹拉米同化学法进行复检，报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

2009年2月～2009年7月本院住院患者胶体金免疫法粪隐血阴性标本153例。按照粪便颜色分为两组，一组为外观正常组，粪便为黄色，共记录100例；另一组为外观异常组，粪便表现为棕色、褐色、鲜红带血便和酱黑色，记录53例。

1.2 试剂

大便隐血胶体金检测试剂条，上海凯创生物技术有限公司；匹拉米同试剂，珠海贝索公司的贝索粪便隐血2号试剂盒（Fecal OB-Ⅱ）。

1.3 操作方法

胶体金法样品处理管中加入0.6 ml蒸馏水，用专用取样棒从患者粪便不同部位取样，以沾满专用取样棒前端的小圆环为准，插入样品管充分搅拌均匀，以试剂条加样端浸入15 s取出平放，3～5 min判读结果，如测试线和质控线都出现紫红色时为阳性；如质控线出现紫红色，测试线不显色时为阴性；如果质控线无红线出现，表示结果无效。匹拉米同法利用纸卡作为粪便检体的输送容器，其阳性反应最终呈色为紫红色，匹拉米同法阳性患者素食3 d后再次化学法复检。化学试剂不稳定，久置后可使反应减弱，检测前需检测试剂,将过氧化氢滴血片上应产生泡沫；或滴加于重铬酸钾硫酸液，显褐色有效。

2 结果

100例胶体金粪隐血阴性颜色正常组标本经匹拉米同法复检，结果均为阴性；而外观异常组53例经匹拉米同法复检有33例阳性，素食3 d后仍有21例阳性，与临床联系均有消化道出血诊断。

3 讨论

免疫法特异性地检测人体血红蛋白部分，不会被食物的其他因素所影响，具有快速、方便、灵敏度和特异性高等众多优点，检测不受饮食限制，在临床工作中得到广泛应用，被世界卫生组织和世界胃肠镜检查协会推荐作为粪便隐血试验的一种较为准确的方法。但如果血红蛋白在胃肠道停留时间过长，被消化酶及细菌作用后分解而使免疫原性减弱、消失或改变，其于胶体金试纸上包被的抗体的相应抗原受到破坏时就会出现假阴性。故免疫法主要用于下消化道出血检验，而40%～50%上消化道出血不能检出；另外，大量出血时，血红蛋白（抗原）浓度过高造成的与单克隆抗体不匹配（即后带现象），亦可出现假阴性[4]，此两种情况大便外观通常会有明显改变。而化学法是利用血红蛋白中的含铁血红素有类似过氧化物酶的作用，其可将供氢体（色原）中的氢转移给H2O2生成水（H2O），供氢体脱氢（氧化）后形成发色基团而呈色，呈色的深浅可反映血红蛋白（出血量）的多少。故在临床检验工作中，免疫胶体金粪隐血阴性，而外观明显为酱黑色、鲜红带血或为棕褐色不正常的大便，而临床又疑为上、下消化道出血、溃疡病、消化道肿瘤等[5]，应同时用化学法检查。化学法为阳性，以化学法报告并通知临床，临床医生可根据病情综合考虑，建议在饮食控制2～3 d后复查，并且不要服用维生素C等还原性的药物。临床工作中亦可将标本稀释后用胶体金复检[6]，但稀释倍数没有标准，需多次稀释，工作繁琐，成本较高；若抗原被破坏，稀释后仍然阴性。此外由于家族肉或直肠癌可能不出血，或间断性出血，或出血在粪便中分布不均匀[7]，都可造成阴性结果，故本法只能作为筛选或辅助诊断，不能替代胃镜、直肠镜、内窥镜和X线检查。

[参考文献]

[1]武得海,张修礼,杨云生.消化道出血的诊断进展[J].中国临床医生,2010,38(3):178.

[2]孙晓敏,徐淑杰.二种方法检测粪便隐血的结果分析[J].中国现代药物应用.2010,4(10):48.

[3]吴新宏.上消化道出血而免疫法粪便潜血阴性一例[J].实用医技杂志,2010,17(1):95.

[4]刘成玉.临床检验基础[M].北京:中国医药科技出版社,2004:230.

[5]方炜,岳莉.单克隆抗体胶体金法与化学法检测隐血的比较[J].检验医学与临床,2010,7(2):177.

[6]王葆昶,尚晓泓.消化道出血患者粪便潜血试验结果分析[J].北京医学,2010,32(2):157.

[7]吴鹏,李艳,陈进,等.联合免疫法和化学法检测粪便隐血的临床应用评价[J].检验医学,2010,25(3):176.

（收稿日期：2010-12-27）