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三种红毛七提取物的抗炎镇痛作用实验研究

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【摘 要】 目的 初步探讨红毛七的乙醇、氯仿和正丁醇提取物的抗炎、镇痛作用,以了解红毛七产生镇痛抗炎作用的有效成分。方法 取红毛七的乙醇、氯仿和正丁醇提取物,应用大鼠足跖肿胀法、小鼠耳廓肿胀法及小鼠去除双侧肾上腺素耳廓肿胀法、小鼠扭体法和热板法研究其抗炎镇痛作用。结果 红毛七的乙醇和氯仿提取物对蛋清所致大鼠足趾肿胀有明显抑制作用;红毛七的乙醇、正丁醇提取物对二甲苯引起的耳廓肿胀有明显抑制作用;但对去除双侧肾上腺素的小鼠耳廓肿胀无明显作用;红毛七的乙醇、氯仿和正丁醇提取物能减少醋酸所致的小鼠扭体次数,延长小鼠热痛阈值。乙醇提取物的作用强于其他有机提取物。结论 红毛七乙醇提取物有明显的抗炎、镇痛作用。

【关键词】 红毛七;提取物;抗炎;镇痛

Experimentalstudyonanti-inflammatoryand analgesic effectsofthreekindsoforganicextracts ofLeontice robustumoYANG Ping,CHEN Sen-zhou,YANG Hong-yao,et al.Medical College of Guilin,Guilin 541004,China

【Abstract】 Objective To investigate the anti-inflammatory and analgesic effects of extract of Leontice robustum and understand effective composition foranti-inflammatory and analgesic effects of Leontice robustum.Methods The anti-inflammatory and analgesic effects of ethanol extract,chloroform extract and n-Butyl alcohol extract from Leontice robustum were observed by using the methods of egg white induced edema of hind paw in mice,the swelling of ear inflammation and the swelling of ear by the removal of the adrenal glands at both sides in mice,body twisting and hot-algesiain mice.Results It was found that alcohol and chloroform extracts of Leontice robustum had marked inhibition effects on rat′s paw edema;alcohol and n-Butyl alcohol extract had marked models such as swelling of mouse ear inflammation,butit had no effect on the removal of the adrenal glands at both sides;extract of Leontice robustum had markedly reduced analgesics action on the reaction of writhes in mice induced by acetic acid and significantly increased the pain threshold in mice induced by hot plate.The action of alcohol extract was better than other organic extracts.Conclusion The alcohol extract from Leontice robustum has notableeffectsonanti-inflammatory and analgesic effect.

【Key words】 Leontice robustum;Extracts;Anti-inflammation;Analgesia

红毛七(Leontice robustum)属小檗科牡丹属植物,主要分布于长白山地区,其根茎有祛风通络、活血调经作用[1],红毛七常作为民间治疗风湿性关节炎的药物。姜红等[2]对其水煎剂进行实验,报道其有一定的抗炎、镇痛作用。杨苹等[3]报道红毛七根茎的乙醇提取物(HMT)有抗炎镇痛作用,但目前对其他有机提取物的文献报道甚少,本文用红毛七根茎的乙醇提取物(HMT)、氯仿提取物(HM CHCl3)和正丁醇提取物(HM n-BuOH)来探讨其对动物镇痛、抗炎作用的影响,以了解红毛七中产生镇痛、抗炎作用的有效成分。

1 材料与方法

1.1 动物 昆明种小白鼠、 Waster大白鼠,雌雄兼用,均由桂林医学院动物室提供。

1.2 药物与试剂 三种红毛七提取物均由本校药学院天然药物教研室提供;地塞米松磷酸钠注射剂由四川长征制药厂生产;阿司匹林(原料药)由山东新华制药股份有限公司生产;醋酸(36%分析纯)由广州化学试剂二厂生产;二甲苯(分析纯)由广东西陇化工厂生产。

1.3 仪器 日本产电子分析天平SARTORIUS-BP211S。

1.4 方法

1.4.1 对新鲜鸡蛋清致大鼠足肿胀的影响[4] 取体质量180~220 g的大白鼠50只,雌雄各半,随机分为阴性对照组(生理盐水等量)、阳性对照组(地塞米松0.05 g/kg)、HMT组(10 g/kg)、HM CHCl3组(10 g/kg)、HM n-BuOH 组(10 g/kg)5组,每组10只,灌胃给药,2次/d,连续3 d。末次给药1 h后,试验前在各鼠左后足处作标记,用大鼠容积测定仪测定各鼠足容积2次,取平均值作为各鼠给药前正常足容积。同时每鼠左后足跖皮下注射新鲜鸡蛋清 0.2 ml,于致炎后0.5、1、2、3、4 h测定各鼠左后肢足跖容积,其中炎性肿胀度等于致炎后不同时间的体积减去给药前的体积。

1.4.2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响[5] 取体质量18~22 g小白鼠50只,雌雄各半,按表2随机分为5组,每组10只,给药方法同上。末次给药后1 h将混合致炎液均匀涂布于各鼠右耳前后两面致炎,每鼠100 μl。致炎4 h后脱颈椎处死,用6 mm直径打孔器分别在左右两耳同一部位打下圆耳片,精密称重,以左右耳片重量差作为肿胀度,计算右耳廓肿胀度及肿胀抑制率。

1.4.3 对去除双侧肾上腺小鼠二甲苯致耳廓肿胀的影响[4] 取体质量20~24 g健康小白鼠,雌雄各半,在戊巴比妥钠麻醉下,于背部作切口摘除两侧肾上腺,缝合伤口,5%糖盐水自由饮用,3 d后将存活的小鼠按表3随机分为4组,每组10只。给药方法同上,末次给药1 h后,以下操作同1.4.2 。

1.4.4 对醋酸致小鼠扭体次数的影响[6] 取体质量18~22 g小白鼠50只,按表4随机分为5组,每组10只,雌雄各半。给药方法同上,末次给药后1 h各小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml。观察注射后15 min内出现扭体次数。结果采用组间t检验进行统计学处理。

1.4.5 对热板致小鼠痛阈的影响[4] 取体质量18~22 g雌性小白鼠,热板(55±0.5)℃,观察小鼠舔后足的潜伏期,作为痛阈指标,选择痛阈在10~25 s的小鼠50只,记录给药前出现舔后足的潜伏期。按表5随机分为5组,给药方法同上,最后1次给药0.5 h后,取小鼠置恒温烧杯内,分别记录给药后30、60、90、120 min出现舔后足的潜伏期。

2 结果

2.1 抗炎实验

2.1.1 对新鲜鸡蛋清致大鼠足肿胀的影响 HMT、 HM CHCl3对新鲜鸡蛋清致大鼠足肿胀有明显的抑制作用,尤以HMT作用明显; HM n-BuOH对蛋清

所致大鼠足趾肿胀有抑制作用,但与生理盐水组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结果见表1。

2.1.2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 与生理盐水组比较,HMT和 HM n-BuOH对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用;而HM CHCl3组差异无统计学意义(P>0.05)。结果见表2。

2.1.3 对去除双侧肾上腺小鼠二甲苯致耳廓肿胀的影响 HMT和HM n-BuOH对切除双侧肾上腺的小鼠二甲苯致耳廓肿胀无明显抑制作用,表明其抗炎作用可能与小鼠的垂体-肾上腺皮质功能有关。结果见表3。

2.2 镇痛实验

2.2.1 对醋酸致小鼠扭体次数的影响 与生理盐水组比较,HMT、HM CHCl3及HM n-BuOH对醋酸所致小鼠扭体有明显的抑制作用。结果见表4。

2.2.2 对热板致小鼠痛阈的影响 HMT、 HM CHCl3及HM n-BuOH对热板所致小鼠痛阈有明显的提高作用,尤以HMT作用明显。结果见表5。

3 讨论

实验结果初步表明:红毛七的抗炎作用在3种提取物中,以乙醇提取物和氯仿提取物对蛋清所致大鼠足趾肿胀有明显抑制作用,二者之间的足趾肿胀抑制作用除给药后30 min有差异,其他时间点无明显差异;乙醇提取物、正丁醇提取物对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用,但对去除双侧肾上腺的小鼠由二甲苯引起的耳廓肿胀无影响,故初步推断其抗炎作用机制可能与垂体-肾上腺皮质功能有关;红毛七的镇痛作用:其3种提取物均能明显减少醋酸所致的小鼠扭体次数及延长小鼠热痛阈值。3种提取物有显著的抗扭体作用,说明本药的镇痛作用可能与作用于脊髓水平和脊髓以上高级中枢有关[7]。

从红毛七的各种提取物药理实验表明,其镇痛、抗炎等综合药理活性主要表现在红毛七的醇溶性部分,其进一步的结果有待于采取系统提取法,以对各组分进行相应的药理活性实验。红毛七药性缓和,而且资源丰富[1],本实验研究为发掘红毛七在临床的应用提供了相关理论。

参考文献

1 江苏新医学院.中药大辞典.上海人民出版社,1977:2011.

2 姜虹,于铁力,宋红光,等.类叶牡丹根茎水煎剂镇痛作用研究.吉林医学院报,1997,17(2):8.

3 杨苹,熊娴,杨红要,等.HMT抗炎、镇痛作用实验研究.华夏医学,2006,19(6):1060.

4 徐淑云,卞如廉,陈修.药理实验方法学.人民卫生出版社,2001:911-930.

5 信红岭,闭娟,刘淼,等.奇任醇的抗炎免疫实验研究.中草药,2005,36(6):866.

6 叶丽卡,陈妍妍,任常顺,等.龟叶草抗炎镇痛作用的实验研究.中草药,2002,33(10):923.

7 何晓南,何晓敏,戴徽.坐痛宁注射液的镇痛作用.赣南医学院学报,1994,14(1):27.