镇安合剂的质量标准研究

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇镇安合剂的质量标准研究范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

(南京中医药大学，江苏南京210046)

摘要：目的：建立镇安合剂质量控制方法。方法：采用薄层色谱法对制剂中天麻、地龙、钩藤进行定性鉴别；对组方中有效成分芍药苷用RP－HPLC法进行定量分析。结果：薄层色谱中斑点清晰，易于识别；RP－HPLC法精密度、重现性良好，芍药苷在0.768～3.84μg内均较好的线性关系，平均加样回收率为100.78％，RSD为2.29％。结论：在本研究基础上制定的质量标准可以控制本品的内在质量，其方法是可行的。

关键词：镇安合剂；芍药苷；RP－HPLC；薄层色谱法

中图分类号：R284.1　文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)05-0981-03

镇安合剂由白芍、天麻、地龙、钩藤等药物组成，具有滋阴平肝、清心安神、开郁化痰、熄风止痉的功效，主要用于肾虚肝亢，风痰内扰型小儿多发性抽动症。采用薄层色谱法对方中天麻、地龙、白芍进行薄层鉴定。白芍是方中主药，因此实验选定芍药苷为该制剂的含量测定项目，以制定该制剂的质量标准。

1仪器试剂与药品

Agilent1100高效液相色谱仪(安捷伦公司)；KQ-500E型医用超声清洗器(昆山超声仪器有限公司)；TD5A低速台式离心机(长沙湘仪离心机有限公司)；电子天平(FAll04)(上海精密科学仪器有限公司)；Lichropher C18(5μm，4.6mm ID×15cm)色谱柱(淮阴汉邦科技有限公司)。甲醇为色谱纯，其余所用试剂均为分析纯；芍药苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号为110736-200423)。天麻、地龙、钩藤、白芍等药材购自江苏省药材公司，经鉴定，符合《中国药典》(2005版一部)有关标准。

2方法与结果

2.1薄层鉴别

2.1.1天麻的薄层鉴别 取本品3.3mL，加70％甲醇5mL，超声处理30min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取天麻对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取除天麻外的其它处方量药材，按制备工艺制成缺天麻的阴性样品，取适量阴性样品制成缺天麻的阴性溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录ⅥB)试验，分别吸取上述3种溶液10μL，分点子同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯一甲醇一水(9:1:0.2)为展开系统，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇液，在105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。

2.1.2地龙的薄层鉴别　取本品6mL，蒸干，加氯仿20mL，水浴回流30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液。另取地龙对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取除地龙外其他处方量药材，按制备工艺制成缺地龙的阴性样品，取适量阴性样品，同法制成缺地龙的阴性溶液。上述3种溶液，照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述3种溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷－乙酸乙酯(9:1)为展开系统展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相同位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照液无干扰。

2.1.3钩藤的薄层鉴别　取本品40mL加氨水放置20min，加入氯仿10mL超声处理20min，重复处理3次，过滤，滤液浓缩，定容2mL。另取钩藤对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取除钩藤外的其它处方量药材，按制备工艺制成缺钩藤的阴J性样品，取适量阴性样品同法制成缺钩藤的阴性溶液。上述3种溶液，照《中国药典》2005版一部薄层色谱法(附录ⅥB)试验。吸取上述3种溶液15μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇(10:4:1)为展开系统展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。

2.2芍药苷含量测定

2.2.1色谱条件 色谱柱为Lichrospher C18(4.6mm×250mm，5μm)(淮阴汉邦科技有限公司)；流动相：甲醇：水(25:75)；柱温：30℃；流速：1mL/min；检测波长：230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。

2.2.2对照品溶液的制备和线性关系考察　精密称取在干燥器中用五氧化二磷减压干燥36h的芍药苷对照品适量，置于量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，使其浓度为0.384mg/mL，摇匀，作为芍药苷对照品的贮备液。分别取贮备液用甲醇稀释成0.0768、0.1536、0.2304、0.3072、0.384mg/mL芍药苷溶液，按上述色谱条件各进样10μL。测定峰面积。以芍药苷的峰面积为纵坐标，芍药苷的进样浓度为横坐标，回归得标准曲线：Y=16380.4622X-27.2695，r=0.9997。结果表明，芍药苷的进样量在0.768～3.84μg范围内，与其峰面积有良好的线性关系。

2.2.3供试品溶液的制备与测定　精密吸取本品1.5mL，置于蒸发皿中，蒸干，加甲醇溶解转移至离心管中，加甲醇超声，甲醇用量每次为15mL，超声10min，离心(4800r/min，10min)，上清液置于蒸发皿中，药渣再重复上述操作2次，合并3次甲醇液，于水浴上蒸干，用甲醇转移并定容至10mL容量瓶中，从该溶液中取一部分用0.45μm微孔过滤器过滤后即得镇安合剂供试品溶液。取上述供试品溶液10μL注入液相色谱仪测定峰面积。

2.2.4精密度考察 按选定的芍药苷HPLC测定条件，精密吸取同一标准品溶液，进样10μL，重复进样6次，测定芍药苷峰面积，RSD为0.18％(n=6)。

2.2.5重复性实验　精密吸取本品1.5mL，共5份，按上述供试品溶液的制备方法制备，各进样10μL，每份样品进两针，测定芍药苷峰面积，RSD为1.84％(n=5)。

2.2.6 稳定性考察　将一样品溶液，在0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10h分别进样10μL，记录峰面积，结果表明峰面积的RSD为2.39％(n=11)。说明供试品溶液在10h内是稳定的。

2.2.7加样回收实验　取已测知含量的样品适量，共6份，分别加入等同于样品中芍药苷含量80％、100％、120％的芍药苷对照品，按供试品溶液的制备与测定项下同法测定，用外标两点法计算含量。平均回收率为100.78％，RSD为2.89％。

2.2.8样品含量测定　取镇安合剂3批样品，按供试品溶液方法制备样品液，按上述色谱条件进行测定，进样量10μL，每份重复进样2次，测定镇安合剂中芍药苷含量。

3讨论

3.1《中国药典》

2005年一部白芍项下，对芍药苷进行了测定，为了更好地控制白芍质量，本实验对白芍中芍药苷进行测定，并进行了方法学考察。在进行提取及纯化方法选择实验时，曾采用《中国药典》2005年版一部的方法。但分离效果不佳，且流动相中含有磷酸不利于色谱柱的长期使用，未采用。经试验探索，采用本流动系统，简便易行，分离效果良好，重现性好。

3.2色谱条件选择参照有关文献报道

选择甲醇：水(25:75)为流动相，芍药苷在此溶液中的最大吸收在230nm，实验结果表明，在此条件下芍药苷的保留时间适宜，与相邻的色谱峰可保持良好的分离度，适合于含量测定与监控。

3.3含量测定提取溶剂选择本文采用甲醇作为提取溶剂

经过方法学考察，对芍药苷的提取效果较好，提取效率稳定。在实验中对提取方法进行了考察。结果表明，采用超声处理，比振摇、浸渍等方法提取率高。对超声时间进行了优化筛选，超声30min可保证在最短时间内将镇安合剂中芍药苷提取完全。

注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。