微量离心柱法检测AFP—L3的临床应用

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇微量离心柱法检测AFP—L3的临床应用范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

【摘要】　目的　本文旨在探讨微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体（afp-l3）在肝癌预警及良恶性肝病鉴别诊断中的临床应用价值。方法　应用装有耦联小扁豆凝集素（LCA）的微量离心柱分离200例肝病患者的AFP-L3，采用化学发光法检测AFP及AFP-L3，计算AFP-L3占总AFP的比率（判断标准以AFP-L3%≥10%者为阳性）。结果　①原发性肝癌组AFP-L3（%）均值和阳性率明显高于肝硬化组和慢性肝炎组（P

【关键词】　微量离心柱法；甲胎蛋白异质体；临床应用

由于采用了血清甲胎蛋白（AFP）检测联合超声显像对肝癌高危人群的监测的方法，使肝癌在亚临床阶段就可被诊断出，这使得早期切除的远期效果尤为显著，加之积极综合治疗，使肝癌的五年生存率有了显著提高。甲胎蛋白（AFP）是诊断原发性肝癌（PHC）的重要指标，但仍有20%-40%的PHC患者AFP阴性或水平较低，这给原发性肝癌的早期诊断带来困难［1］。因此寻找更特异、敏感的肿瘤标志物和诊断方法是研究肝癌的重要课题方向［2］。临床医学通常把血清甲胎蛋白　（AFP）分为LCA非结合型（AFP-L1、AFP-L2）、LCA结合型（AFP-L3）两种。LCA非结合型血清甲胎蛋白中，AFP-Ll一般常在良性肝病中被发现，而AFP-L2则是妊娠期女性特有的。现代医学诊断表明，只有肝癌细胞才会产生AFP-L3［3］，我们通常所说的AFP异质体，确切地说指的是与LCA结合的AFP-L3［4］。在一次国际权威的肝癌医学学术会议上，与会专家一致认为可以将AFP-L3作为临床诊断原发性肝癌的标记物之一。国内对于肝癌研究和临床治疗方面目前只限于个别的临床实验室能够测定AFP异质体。该实验成本较高，对于操作者的技术要求严格，因而不适合大量推广。笔者在此应用的是国产微量离心柱法来分离甲胎蛋白异质体（AFP-L3），由于是最新研究成果，所以并不常见。本次研究应用化学发光法对某医院院最近200例肝癌、肝硬化以及慢性肝炎患者的血清进行了联合检测，用详细的临床数据来评估AFP-L3在鉴别良恶性肝病和肝癌预警方面的临床价值。

1　资料与方法

1.1　一般资料　此次研究选取某医院2011年6至2012年10月期间，包括体检、门诊及住院患者在内共200例患者作为研究对象。其中，男性患者146例，女性54例；年龄分布在18-79岁之间，平均50.2岁。从病情来看，罹患肝癌的有80例（HCC组），肝硬化66例（肝硬化组），慢性肝炎54例（慢性肝炎组）。此次研究选取的200例患者的临床诊断标准全部符合HCC诊断标准。

1.2　试剂与仪器　AFP、AFP-L3检测采用郑州安图化学生产的化学发光分析仪，其中AFP-L3分离采用先进的亲和离心管法，检测中所使用到的试剂盒产自北京热景生物技术有限公司，检测过程严格按说明书操作。

1.3　方法　要求患者禁食12小时后于次日一早空腹采集静脉血5ml，使用离心柱调节转速至3000r／min离心10分钟，使血清完全分离后，放入低温（-20℃）冰箱中冰冻保存。本研究使用北京热景生物技术有限公司提供的离心柱采取微量离心柱法分离AFP-L3，离心柱内装有耦联凝集素微球，受检患者血样中含有肝癌细胞时，可以特异结合AFP-L3，当血清流过离心柱时，与LCA亲合力强的AFP-L3结合于柱中，这时候再把不结合的AFP清洗掉，再经过浸泡获得AFP-L3。最后使用郑州安图LUMO化学发光分析仪来检测血清中的AFP总量和AFP-L3的含量，再计算出AFP-L3在总AFP中占的比例，以AFP-L3%≥10%作为临床判断AFP-L3异常升高的标准数值。

1.4　统计学分析　本次研究中所有资料均采用SPSS13.0软件进行统计学分析，所用到的计量资料采用均数±标准差（χ±s）表示，涉及到的组间资料比较采用t检验，计数资料比较用x2检验，只要P

2　结果

2.1　原发性肝癌组、原发性肝癌（AFP＜200ng/ml）、肝硬化、慢性肝炎患者AFP-L3（%）和χ±s测定，结果见表1。

2.2　不同AFP浓度的原发性肝癌患者AFP-L3（%）测定结果　见表2。

3　讨论

原发性肝癌（PHC）是临床上常见的恶性肿瘤之一，死亡率极高，在所有的恶性肿瘤中居第三，仅次于胃癌和肺癌。全世界每年因罹患肝癌而致死的患者中，我国的肝癌患者近半数，严重威胁到人们的生命，影响人民的健康。目前临床医学对于原发性肝癌还没有找到更好的预防、治疗方法，迄今为止，国内临床上仍然将AFP升高作为检测原发性肝癌最特异的指标，但有关临床数据显示，有的普通肝病患者的AFP有时候也会发生不同程度的升高现象［6］。这是因为肝细胞分裂生长时也会产生一定量的AFP，这对临床上以AFP变化来诊断原发性肝癌造成了干扰。加之有些原发性肝癌患者血清中的AFP浓度本来就很低，单靠检测AFP很难与肝硬化、慢性肝炎等良性肝病区别。所以，与之相比较，AFP异质体检测的优越性就充分地体现出来。

本研究结果显示：以AFP-L3≥10%作为肝癌的诊断标准。原发性肝癌组AFP-L3检测的敏感性为87.5%、均值22.15%，与肝硬化组和慢性肝炎组的敏感性为25.8%、24.1%，均值10.13%、7.58%相比，差异具有统计学意义（P＜0.001），尤其在甲胎蛋白低浓度肝癌（AFP

此次研究所使用的试剂与检测仪器均为国产，通过实践证明可以同样获得AFP-L3的组分，此检测方法简单易行，成本容易控制，值得在临床上大力推广。

参考文献

［1］　Debrugne　EN　Delanghe　JR.Diagnosing　and　monitoring　hepatocellular　carcinoma　with　alpla-fetoprotein：new　aspects　and　applications［J］.clim　Acta，2008，395（1-2）：19-26.

［2］　汤钊猷.现代肿瘤学［M］.第2版.上海：上海医科大学出版社，2001：553.

［3］　孙艳虹，姜傥.肿瘤标志物在临床上的应用（上）［J］.新医学，2008，39（2）：121-123.

［4］　郑小华，曹颖平.甲胎蛋白异质体的检测与临床应用的研究进展［J］.医学综述，2008，14（18）：2808-2811.

［5］　彭承宏，李松岗，刘颖斌，等.肝癌研究现状［J］.肝胆外科杂志，2001，9（5）：386-388.

［6］　屠振兴，吴孟超，崔贞福.甲胎蛋白异质体对原发性肝癌早期诊断的研究［J］.第二军医大学学报，1985，4（6）：193-196.

［7］　郑颖，单晓洁，任茗睿，等.微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体对原发性肝癌诊断的意义［J］.浙江实用医学，2009，14（1）：3-4.

［8］　胡敏华，陈燕，梁亚嘉，等.新微量离心柱法测定甲胎蛋白异质体对原发性肝癌诊断的价值［J］.福建医药杂志，2009，31（4）：95-96.

［9］　熊彪，蔡其浩，蒙凯.三项生化指标联合甲胎蛋白诊断原发性肝癌的研究［J］.当代医学，2008，14（14）：37-38.

［10］　Purves　LR，Merwe　VE，Besohn　L，et　al.Variants　of　Afetorotein.Lancet，1970，2：460.

［11］　Shiraki　K，Takse　K，Tameda　Y.A.Clincial　study　of　lectinreactive　alpha-fetoprotein　as　an　early　indicater　of　hepatocellular　carcinoma　in　the　fellow　up　of　cirrhotic　patients.Hepatology，1995，22：802.

［12］　屠振兴，殷正丰，崔贞福.甲胎蛋白异质体预测肝癌发生的临床价值.第二军医大学学报，1991，12：417.

［13］　蔡志昌，沈霞.AFP　异质体在肝癌诊断中的应用.中国实验诊断学，2001，5：189-190.

［14］　Ya　mashita　F，Tanaka　M，Satomura　S，et　al.Prognostic　significance　of　Lens　culinaris　agglutinin　A-reactive　alpha-fetoprotein　in　small　hepatocellular　carcinoma　［J］.Gastroenterology，1996，111（4）：996-1001.

［15］　青柳丰.肿瘤标志物的临床临床诊断意义及展望-甲胎蛋白（AFP）-L3组分［J］.日本医学介绍，2005，26（12）：49-50.