沈阳市结核菌分离培养及影响因素的研究
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【摘 要】目的 分析2011年沈阳市肺结核细菌分离培养的情况及影响因素。方法 针对结核菌分离培养，从标本收集、实验室操作、试剂培养基质控、实验室设备设施及生物安全等方面进行分析。结果 通过对影响肺结核细菌分离培养因素的有效控制达到了培养阳性率大于90%，污染率小于5%的要求。结论 肺结核细菌分离培养的影响因素一是实验室设备设施、试剂培养基质量等，二是人员的操作技术，业务素质，更为重要的是相应的操作规程、管理工作的严格执行。
【关键词】结核；细菌培养；影响因素
结核病是危害人类健康的重要传染病，我国是全球结核病高负担国家之一[1]。肺结核病防控的关键主要是提高发现率和治愈率消灭传染源。2011年沈阳市疾病预防控制中心开展了以提高发现率为目的的结核菌分离培养工作。选取了辖区内的5个结核病防治所承担病例纳入、病史采集、实验室涂片和阳性痰标本上送市疾病预防控制中心等任务。市疾病预防控制中心承担结核菌的分离培养工作。
1 材料和方法
1.1 对象
选取沈阳市13个区县结核病防治所中的5个区做为监测点，沈阳市内和平区和沈河区2个区，于洪区、新民市和法库县3个郊区进行结核菌分离培养。根据2010年各个区实验室涂片结果计算得出在2011年半年时间内这5个区理论上能够完成每个区共计51例病例。累计培养初治病例38例，复治病例13例。
1.2 方法
5个区结核病防治所承担病例纳入、病史采集、实验室涂片和阳性痰标本上送市疾病预防控制中心等任务。市疾病预防控制中心承担结核菌的分离培养工作。纳入病人的涂阳病例的痰标本全部保留，若三份痰标本均为涂片阳性，任选择两份进行培养；若三份痰标本涂片两份阳性，一份阴性，选择两份阳性痰标本进行培养；若三份痰标本一份阳性，两份阴性，选择一份阳性和任选一份阴性进行培养。
2 结果
2.1 病例纳入情况
2011年下半年从七月到十二月共完成了250例病例标本的采集，病例的采集各个月份相差不多，但主要集中在十月份及十一月份，分别为48例和53例。十二月份较少为31例，七月份和八月份同为39例，九月份为40例。
2.2 5个区各区每月病例纳入情况
和平区4个月完成了51例病例的纳入，沈河区和于洪区6个月完成了病例纳入，法库县用了7个月，新民市在2012年2月份完成了要求病例的纳入。
2.3 5个区结核菌分离培养结果
5个区中和平区的污染率最高8.33%（经调查是其存放标本的冰箱温度太高，经改正后，污染减少），于洪区污染率为零，另外3个区污染率也控制在允许范围之内。
2.4 影响因素
结核菌分离培养的影响因素的研究主要包括以下几个方面：痰涂片阳性标本的收集，保存及运输；培养基的质量保证；操作的规范性；实验室的设备设施；生物安全防护等。区（县）结核病防治所承担的工作是该项目的首要环节，项目能够顺利开展的第一步。
人员方面：承担结核菌分离培养的实验室人员要参加过相关的培训并且从事过细菌或病毒的分离培养工作，如果以往从事过结核菌的培养将对工作更加有利。承担该工作的人员要身体健康，项目开展前要进行一次全面的体检。另外，该人员心理要有一定的承受能力，要不怕脏（痰标本多数为脓痰、干酪样痰），不怕危险（做结核菌培养工作就有被感染的可能性，本项目沈阳市需要做255名患者，接种1020管培养基，阳性率不低于90%），同时要有耐心（标本送来后要立即培养，每份标本要定期观察，阴性标本要培养至少2个月）。
用于细菌分离培养的试剂主要是4%的氢氧化钠，培养基为贝索公司购买的酸性罗氏培养基。温箱、冰箱、生物安全柜的设备均达到项目的要求。按照标准的操作规程进行分离培养。为保证项目的完成质量省、市、区（县）要及时沟通发现问题尽快解决。
3 讨论
结核菌耐药情况的调查研究对提高结核病人的治疗以及结核病的防控有着非常重要的作用。能够从涂阳患者痰标本中分离出结核菌是开展该项目的关键，本文仅仅从影响结核菌细菌分离培养的相关因素进行研究来保证分离的阳性率和降低污染率，从而保证该项目能够顺利完成。达到了分离率不低于90%，污染率小于5%的要求。
通过研究我们发现，该项目的结核菌分离培养的影响因素既有同其他细菌分离检测的相同影响因素，又有其不同之处。从分离高致病性细菌来说，它与从事布鲁氏菌、炭疽芽孢杆菌的分离培养一样都需要二级以上的生物安全防护及相应的设备设施，需要操作人员具有相应的专业知识及实践经验，需要按照要求进行标本采集、保存、运输，对试剂、培养基进行质量控制保证以及按照标准的操作程序进行操作。而不同其他的细菌分离培养之处是，该项目涉及到省、市、区（县）3个部门，3个部分分工不同，每个部分的工作出现失误整个项目就将失败。因此，相应的管理工作显得尤为重要，省里在项目实施前做了相应的项目实施方案及细则，我们市里在此基础上又制定了我们的相关的操作规程并且也给区（县）提出了具体的要求。而最为重要的工作就是能够把省、市提出的要求各个部门严格执行，保证执行的质量一是靠各级人员的业务素质，更重要的是要靠从省到市到区（县）的业务督导，区（县）到市到省的工作反馈这一动态的沟通管理工作。
参考文献
[1] 闫蓓，蔡凤珠，白云，孙乔.上海市蒲东新区第五轮中国全球基金流动人口结核病防治项目实施2年效果分析[J].中国防痨杂志，2011，33（3）：137―140.