高效液相色谱法测定白酒中安赛蜜含量的方法研究

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【摘　要】通过高效液相色谱法测定各种类型白酒中安赛蜜的含量分析方法。为白酒中安赛蜜测定结果提供科学的可溯源数据。分析方法如下，通过C-18色谱柱分离预处理的样品,进行梯度洗脱,流动相为甲醇（20mol/L）乙酸铵水溶液。单次进样分析所需时间为十分钟左右。以优化后的条件进行测定,安赛蜜线性范围在0.05～5.0mg/L内,线性相关系数大于0.9947。得到安赛蜜检出限为0.05mg/L。方法准确可靠、可达到检测安赛蜜的目的。

【关键词】高效液相色谱法；白酒；安赛蜜

0.引言

安赛蜜的分子式：C4H4KNO4S；分子量：201.24。安赛蜜是一种食品添加剂，类似于糖精，易溶于水，20℃时溶解度为27克。它和其它甜味剂混合使用能产生很强的协同效应，一般浓度下可增加甜度30%～50%。是目前世界上稳定性最好的甜味剂之一。但是有些白酒生产企业为了追求白酒的口感，味道而故意添加此种添加剂。在我国GB2760-20ll《国家生标准》中明确规定：配制酒不得添加安赛蜜。作者采用超高压液相色谱Agilent1100型高效液相色谱仪检测器，Agilent1200色谱工作站,针对白酒中的微量安赛蜜,开发的检测方法,该方法快速简便，定量准确,灵敏度极高。

1.材料与方法

1．1仪器与试剂

Agilent1100型高效液相色谱仪检测器，Agilent1100色谱工作站)美国安捷伦公司;电子天平，氮吹仪，安赛蜜标准品(中国标准物质中心)浓度为1000μg/mL，含有安赛蜜的白酒样品。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，试验用水为一级水。

1．2色谱条件

流动相为0.02mol/L的乙酸铵-甲醇（90:10），流速1.0mL/min；柱温25℃；进样量为20μL；检测波长220nm，以保留时间定性，峰面积定量。

1.3以及标准曲线的绘制

准确移取浓度为1000μg/mL的安赛蜜10mL于100mL容量瓶中，用水定容至刻度，此混合中间液的浓度为100μg/mL。吸取混合中间液0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、25.0、50.0mL用水定容至100mL，构成系列浓度为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、25.0、50.0mg/L的标准使用液。

2.结果与讨论

2.1流动相的选择

本文选择甲醇和0.02mol/L乙酸铵溶液作为流动相。甲醇和乙酸铵在流动相中的比例的少量变化会使安赛蜜和糖精钠的保留时间发生显著改变，减少甲醇含量各组分保留时间变长，结合实际样品测定时的情况，综合灵敏度和分离度两项指标，选择流动相最佳配比为甲醇：乙酸铵溶液=10：90（体积比）。

2.2检测条件的选择

由于不同物质的分子结构各异，特征吸收峰的波长自然各不相同。采用二极管阵列检测器在190～400nm之间进行扫描，安赛蜜的最大吸收波长分别在224.0nm处，本实验选用220nm作为检测波长。安赛蜜是一种易容于水而难溶于乙醇等有机溶剂的物质，因此选择超纯水作为安赛蜜的提取。

2.3线性范围

在确定的最佳色谱分离条件下对一系列不同浓度的混合标准溶液进行色谱测定，获得组分的峰面积(A)，以峰面积为纵坐标，浓度(C/(mg/L)为横坐标进行线性回归。组分方程、相关系数、线性范围见下表。从表1可以看出组分在线性范围内，线性关系良好。

组分的线性范围:

组分线性范围(mg/L)线性方程相关系数r相关系数r

安赛蜜0.5～50.00.5～50.0y=798657x+276790.99950.9997

2.4试样前处理

安赛蜜是一种易容于水而难溶于乙醇等有机溶剂的物质，因此选择超纯水作为安赛蜜的提取溶剂。对于大多数白酒，根据安赛蜜的理化性质可以选择水作为溶剂，并用超声波震荡使分子加快运动，促进液固之间的接触，使溶液更均匀。按照GB/T5009.28-2003[13]规定的配制酒样品前处理方法，取10.0g白酒样品，放小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水(1+1)调pH值约7，加水定容至20mL，经0.45μm滤膜过滤后进液相色谱分析，用旋转蒸发仪减压蒸发至近干后用水定容至10mL，进液相色谱分析，能保证较高的回收率，又能起到将待测组分浓缩的目的，采用选定的色谱条件及前处理方法，样品中的杂质及溶剂峰不干扰白酒中安赛的测定.

2.5方法的精密度及加标回收率

移取1000μg/mL的安赛蜜、糖精钠标准溶液各1.0mL加入到质量为500.0g的白酒中，按3.4的方法对样品进行前处理，按选定的液相色谱条件进行分析，平行测定10次，加标回收率进样5次，结果如表2所示。被测样品加标回收率安赛蜜为94.7%，安赛蜜的RSD为3.59%，测定结果准确可靠.

组分回收率本底标准添加值(mg/kg)测定值(mg/kg)平均回收率（%）本底值(mg/kg)RSD（%）

安赛蜜1.133.592.003.0494.7

2.6检出限

选取不含安赛蜜的白酒样品添加安赛蜜标准溶液，使添加量为2.0mg/kg，按2.4的方法对样品进行前处理，按选定的液相色谱条件进行分析。在记录的色谱图中，根倍噪声所对应的浓度值计算出方法的检出限：安赛蜜为0.016mg/kg.

3.结论

安赛蜜属盐类化合物，熔点很高，难于挥发，采用沸水浴测定时不会发生损失。因此，可通过减压蒸发浓缩达到富集安赛蜜的目的，从而提高了方法的检测灵敏度，使安赛蜜的检测限低至0.016mg/kg；且采用该方法富集样品中待测组分，无需固相萃取柱及试剂，成本较低。综上所述，本方法简便、快速、准确，具有较高的准确度、精密度和回收率，线性关系好，检测成本低，适合在检测过程中推广应用。

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