P16在乳腺癌及乳腺腺病中的表达及其临床意义

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇P16在乳腺癌及乳腺腺病中的表达及其临床意义范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

[摘要] 目的 探讨p16在乳腺癌及乳腺腺病中的表达变化与临床病理意义。方法 应用免疫组织化学方法,分别检测乳腺癌52例及乳腺腺病15例组织中P16的表达情况,分析其与临床病理参数的关系。结果 P16在乳腺癌中的阳性表达率为44.2%(23/52),乳腺腺病为73.3%(11/15),其差异有统计学意义(P

[关键词] P16; 乳腺癌; 乳腺腺病; 免疫组织化学

[中图分类号] R737.9 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)07-138-02

Study of Expression of P16 in Breast Cancer and Adenosis

WEI Maofu1 YANG Yanli2 LIU Jingwen1

1.Department of Pathology;2.Department of Medicine,Humen Hospital,Dongguan 523900,China

[Abstract] ObjectiveTo investigate the relationship between the expression of P16 in the breast cancer and adenosis and clinicopathologic features. MethodsThe expression of P16 was detected in 52 patients with breast cancer,15 patients with adenosis by the immunohistochemical staining. ResultsThe frequency of P16 staining in breast cancer was 44.2%(23/52),being significantly higher than that of in adenosis73.3%(11/15)(P

[Key words]P16; Breast cancer; Adenosis; Immunohistochemistry

乳腺癌的发生、发展是多基因参与的复杂过程,其中包括癌基因的异常激活和抑癌基因的失活,到目前为止,已经有100多种癌基因和10多种抑癌基因被分离。近年来分离出的一个重要的抑癌基因P16在很多肿瘤细胞中存在缺失和突变[1,2],在体外实验培养的细胞P16环状DNA转染实验证明此基因有抑制细胞增值的功能[3]。本实验研究目的在于探讨P16在乳腺癌、乳腺腺病中的表达与临床病理之间的关系。

1 资料与方法

1.1 标本来源

收集我院2000年3月～2008年3月手术切除经病理证实的乳腺癌标本52例,另外选取乳腺腺病标本15例作为对照观察。52例乳腺癌标本中,年龄28～72岁,平均年龄52岁,术前均未作任何抗肿瘤治疗。低级别乳腺癌12例,高级别乳腺癌40例,其中25例乳腺癌有淋巴结转移。

1.2 试剂及免疫组化染色方法

鼠抗人P16单克隆抗体、抗体稀释液及试剂盒均购自基因公司。其稀释度为1∶50。所有标本均用10%中尔马林固定,石蜡包埋,4μm连续切片,按二步法进行免疫组化染色,染色前标本切片进行抗原修复处理,一抗在室温下孵育1h,二抗在室温下孵育0.5h,DAB显色,苏木素复染。用已知阳性的乳腺癌标本作阳性对照,用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。

1.3 判断标准

所有免疫组化片子用奥林帕斯BX50显微镜进行定性和半定量评估。请三个高职称病理医生在不知道临床信息的情况下独立的对所有免疫组化片子进行评估。阳性判断标准为细胞核和(或)细胞浆出现了黄色或棕黄色颗粒状,并用阳性片作为对照。每张切片随机选择10个视野,40×10高倍显微镜下观察计数。根据染色强度、阳性细胞百分比分别记分[4]:(1)染色强度:不着色为0分,淡黄色为1分,黄色为2分,棕黄色为3分;(2)阳性细胞所占百分率:75%为4分。计算染色强度与阳性细胞百分比得分之积并分为4级,即(-)为0分,弱阳性(+)为1～2分,阳性(++)为3～4分,强阳性(+++)为5～6分。

1.4 统计学方法

统计学处理应用SPSS10.0软件进行χ2检验和Fisher确切概率法,P

2 结果

P16阳性表达主要表现为细胞核和(或)细胞浆染色。52例乳腺癌中阳性(+)23例表达率为44.2%;15例乳腺腺病中阳性(+)11例,表达率为73.3%,乳腺腺病与乳腺癌的阳性表达率差异有统计学意义(P

3 讨论

P16基因编码的蛋白质由148个氨基酸组成,它的分子量约为16kD,所以称为P16蛋白。P16蛋白含有4个重复结构的锚蛋白,其抑制活性与该结构有关。最近相关实验表明,P16基因有比较复杂的结构和调节转录机制。在很多肿瘤中P16基因出现高频率的缺失和突变,最近几年来实验表明P16基因失活的另一个重要机制可能是DNA的甲基化[5,6]。抑癌基因编码的P16蛋白与细胞周期蛋白D1竞争CDk4/6的结合,阻止抑癌基因Rb的磷酸化,最终抑制细胞的分裂增殖,对细胞生长有负调控作用[7]。基因的变异引起P16蛋白的异常表达时,其抑制作用消失,细胞分裂增殖活性增高,从而导致肿瘤的发生。本研究显示:52例乳腺癌中阳性(+)23例,表达率为44.2%;15例乳腺腺病中阳性(+)11例,表达率为73.3%,乳腺腺病与乳腺癌的阳性表达率差异有统计学意义(P

[参考文献]

[1] Kamb A,Gruis NA,Weaver-Feldhaus J,et al. A cell cycle regulator potentially involvedin genesis of many tumor types[J]. Science,1994,264(5157):436-440.

[2] Nobori T,Miura K,Wu DJ,et al. Deletion of the cyclin-dependent kinase 4 inhibitor gene in multiple human cancers[J]. Nature,1994,368(6473):753-756.

[3] Okamoto A,Demetrick DJ,Spillare EA,et al. Mutationand altered expression of p16 in human cancer[J]. Proc Nad Acad Science USA,1994,91(23):11045-11049.

[4] Liu WH,Kaur M,Wang G,et al. Inverse PCR-based RFLP scanning identifies low-level mutation signatures in colon cell and turmors[J]. Cancer Res,2004,64:2544-2551.

[5] Lee TL,Leung WK,Chan MW,et al. Detection of gene promoter hypermethylation in the tumor and serum of patients with gastric carcinoma[J]. Clin Cancer Res,2002,8(6):1761-1766.

[6] Bian YS,Osterheld MC,Fontolliet C,et al. p16 inactivation by methylation of the CDKN2A promoter Occurs early during neoplastic progression in Barretfs esophagus[J]. Gastroentero1ogy,2002,22(4):1113-1121.

[7] Kamb A,Liu QY,Harshman K,et al. Rates of P16(MTS1)mutation in primary tumors with 9p lose[J]. Science,1994,265(16):425.

(收稿日期:2009-12-16)