LDP―294葡萄砧木组培快繁
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摘 要：针对少LD P-294砧木不易生根繁殖的问题，试验采用组培快繁方法加以解决。结果表明，适宜启动的培养基为1/2 MS+IBA0.2 mg/L，在1/2 MS+IBA1mg/L的培养基上处理2 d，再转到GS培养基上生根率可达76 %，培养条件为光照12 h，光强2 000～3 000 Lx.
中图分类号：S663.1 文献标识码：B 文章编号：1003-6997（2012）23-0026-01
LDP-294砧木，是由甘肃农业大学植物生理生化研究室从甘肃子午岭的野生少毛变叶葡萄（Vitis piasezkii maxin var pagnucii）种子实生分离选育而得到，生长旺盛，抗寒性强，雄株。位于兰州市安宁区黄河北岸的试验地，海拔1 524 m，年均温8.0～9.6 ℃，年绝对低温为-20.6～-23.6 ℃，极端最高温度为36～39 ℃，一般的葡萄品种越冬需埋土。在LDP-294砧木上嫁接的红提葡萄，可在此环境中不埋土安全越冬，初步表现出良好的越冬抗寒能力。LDP-294砧木具有野生葡萄不易扦插生根的习性，为扩大试验应用范围，为我省广大葡萄产区提供更多的优良抗寒砧木，减轻根系冻害、节省防寒用工和土方量、促进葡萄生产的健康发展，开展LDP-294砧木组培快繁具有十分重要意义。
1 实验材料与方法
1.1 外植体的采集和消毒
从甘肃农业大学植物生理生化研究室葡萄园采取葡萄砧木品种LDP-294当年生嫩梢。将采集的嫩梢先用流水冲洗15 min以除去表面灰尘，而后用饱和漂白粉上清液震荡消毒10 min，用无菌水冲洗1～2次。在无菌条件下70 %的酒精快速消毒10 s，立即用无菌水冲洗3～4次，0.1 %的升汞连续震荡消毒8 min后，用无菌水冲洗5次以清除残留在枝条表面的升汞。将消毒好的枝条剪成单芽茎段，接入初代培养基中。
1.2 培养基的制备
采用MS、1/2 MS（MS基本培养基大量元素和微量元素浓度减半，铁盐浓度不变，其它各成分同于MS，下同）、GS（曹孜义，1986）、制成不同激素配比的培养基，附加2 %的食用白糖，5.0 g/L的琼脂，pH调至5.8。配制好的培养基在121 ℃下高压灭菌20 min备用。
1.3 培养条件
将接种好的材料放在培养架上，培养温度25～27 ℃，光照12 h/d，光照度40 umol/m2・s-1。
2 初代培养
在MS培养基中加入0.2～0.5 mg/LIBA，接入供试品种的外植体，以选择最佳的初代培养。经观察0.2 mg/LIBA上7 d可萌发健壮正常地嫩芽，接种基部愈伤组织小，而在其它培养基上基部愈伤组织大，芽体随着培养时间的延长表现为愈伤化，不利于培养。
3 继代培养
一个月后，将新梢分别剪下，接入MS+0.2 mg/LIBA培养基中，约10 d后不定芽产生，40 d后，有1个芽体长至5～6 cm的嫩梢，此时可转瓶剪段在新鲜MS+0.2 mg/LIBA培养基中继续继代扩繁。
4 生根培养
本葡萄砧木很难生根，需两步生根法进行培养。将嫩茎剪成1.5～2 cm小段，接入1/2 MS+1 mg/L IBA的培养基进行培养，2 d后，转入GS培养基上培养，约20 d长出不定根，30 d后多数试管苗生1～3条根，生根率76 %。
5 炼苗与移栽
将高5 cm具有1～3条根的试管苗，剪除茎尖培养7 d后，闭瓶逐步移到散射光的自然环境中炼苗7 d后，从瓶中取出，于35 ℃以下以温水洗净根部培养基，再用72#穴盘装腐殖质基质进行移栽，在智能温室条件下中，相对湿度控制在85 %左右，温度控制在26 ℃下培养炼苗，试管苗成活率达85 %以上。
6 结论
上述组培快繁试验表明，LDP-294砧木适宜启动和继代培养基为1/2 MS+IBA0.2 mg/L，在1/2 MS+IBA1 mg/L的培养基上处理2 d，再转到GS培养基上生根率可达76 %，应用穴盘在智能温室中炼苗成活率可达85 %。
参考文献：
[1]张金林.葡萄砧木特性及微繁殖技术的研究[D].兰州：甘肃农业大学，2003.（责任编辑 钟 琴）