五种伞形科植物提取物抑菌活性研究

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摘要：采用生长速率法测定当归（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、白芷（Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ）、窃衣（Ｔｏｒｉｌｉｓ ｓｃａｂｒａ）、柴胡（Ｒａｄｉｘ Ｂｕｐｌｅｕｒｉ）和防风（Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ）５种伞形科（Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ）植物乙醇提取物对６种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明，浓度为０．１ ｇ（干样）／ｍＬ时，除当归提取物对小麦赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）外，５种不同植物提取物对６种植物病原真菌菌丝生长有一定程度的抑制作用。当归提取物能完全抑制水稻纹枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ）、小麦纹枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ）和番茄灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）菌丝的生长。白芷提取物和窃衣提取物能够完全抑制水稻纹枯病菌和小麦纹枯病菌菌丝的生长。

关键词：伞形科（Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ）；植物提取物；病原真菌；生长速率法；抑菌活性

中图分类号：Ｓ４８２．２９ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）16－3490-02

Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｆｉｖｅ Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ Ｐｌａｎｔ Ｅｘｔｒａｃｔｓ Ａｇａｉｎｓｔ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ

ＨＵ Ｌｉｎ－ｆｅｎｇ１ａ，Ｌ?譈 Ｗｅｎ－ｙａｎ１ｂ，ＺＨＯＵ Ｌｉｎ２，ＬＩ Ｘｉａｏ１ａ

（１.Ｈｅｎａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ａ． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ； ｂ． School of Resources and Enviroment， Ｘｉｎｘｉａｎｇ ４５３００３， Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ， Ｈｅｎａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５０００２， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ Iｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ５ ｐｌａｎｔ（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ，Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ，Ｔｏｒｉｌｉｓ ｓｃａｂｒａ，Ｒａｄｉｘ Ｂｕｐｌｅｕｒ，Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ）ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ６ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ． Ｂｉｏａｓｓａｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ５ ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｈａd ｃｅｒｔａｉｎ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ６ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ０．１ ｇ／ｍＬ（ｄｒｙ ｓａｍｐｌｅ）． Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ａ. ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ， Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ ａｎｄ Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ completely． Ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ ａｎｄ Ｔ. ｓｃａｂｒａ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｒ. ｃｅｒｅａｌｉｓ ａｎｄ Ｔ. ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ； ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔ； ｐａｔｈｏｇｅｎ； ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ； ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ

当归（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、白芷（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｄａｈｕｒｉｃａ）、窃衣（Ｔｏｒｉｌｉｓ ｓｃａｂｒａ）、柴胡（Ｒａｄｉｘ Ｂｕｐｌｅｕｒｉ）和防风（Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ）都是伞形科（Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ）植物，具有一定的药用价值，主要用于活血、抗菌、消炎等。伞形科植物在抗菌活性方面的表现近年来逐渐受到研究者重视［１－５］。研究认为，伞形科植物产生的挥发油及苯丙素类化合物是其主要抑菌活性物质［６］。试验对５种伞形科植物药用部位提取物的抑菌活性进行了初步研究，测定其乙醇提取物对几种主要农作物病原真菌的抑制作用，以探索其在农用杀菌剂领域的开发和应用前景。

１ 试验材料

１．１ 供试植物样品

２００９年从河南省新乡市郊区采集供试植物，室内阴干后用植物粉碎机粉碎，过２０目筛，低温贮存备用。具体情况见表１。

１．２ 供试菌种

６种植物病原菌为棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ），小麦赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ），水稻纹枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ），苹果炭疽病菌（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ），小麦纹枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ），番茄灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）。以上菌种由河南科技学院制药工程生物测定实验室提供，试验前７ ｄ转接至培养皿平板中活化培养备用。

２ 试验方法

２．１ 植物提取物的制备

植物样品各取２００ ｇ置于３ ０００ ｍＬ三角瓶中，加入９５％乙醇溶液浸泡植物材料进行冷浸提取，浸泡３ ｄ后过滤，添加新溶液。反复浸提３次，溶剂总量４ ０００ ｍＬ。合并滤液，蒸发溶剂得各植物提取物。称量提取物质量，计算提取率（表２）。

２．２ 抑菌活性测定及数据分析

采用生长速率法［７，８］测定提取物对病原菌的离体抑菌活性。将植物提取物用丙酮和水等体积混合溶剂配制成１ ｇ（干样）／ｍＬ的提取液，取１ ｍＬ提取液用培养基定容至１０ ｍＬ，混匀后倒入直径９ ｃｍ培养皿中制成含药平板。含药平板中提取物浓度为０．１ ｇ（干样）／ｍＬ。试验设相应的溶剂为对照，每处理重复３次。用直径４ ｍｍ打孔器从活化培养病原菌的平板边缘打制菌饼，按无菌操作将菌饼倒扣接种于含药平板中央。在（２５±２）℃培养箱中培养７２ ｈ，十字交叉法测量菌落直径。按以下公式计算抑制率。