哮喘患儿血清IL-10和ET-1的检测及

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【摘要】 目的 探讨支气管哮喘患儿不同时期血清白细胞介素（IL）-10、内皮素（ET）-1与IgE水平的变化及临床意义。方法 采用酶联免疫（ELISA）法测定不同时期支气管哮喘患儿血清il-10、et-1和IgE水平，并与正常对照组进行统计分析。结果 哮喘急性发作组血清IL-10水平显著低于缓解组和对照组（P

【关键词】 支气管哮喘 IL-10 ET-1 IgE

Clinical significance of serum levels of IL-10 and ET-1 LI Guo-fen.Nanyang Cetral Hospital in Henan Province,Nanyang 473000,China

【Abstract】 Objective To investigate the different periods of bronchial asthma in children with serum levels of interleukin （IL）-10, endothelin （ET）-1 and the changes in IgE levels and clinical significance.Methods Using enzyme-linked immunosorbent （ELISA） was used to determine the serum of asthmatic children during IL-10, ET-1 and IgE levels, and with the control group for statistical analysis.Results Of acute asthma levels of serum IL-10 significantly lower than the remission group and control group （P

【Key words】 Bronchial asthma IL-10 ET-1 IgE

支气管哮喘是一种常见的、多发的呼吸系统疾病，是以嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞浸润为特征，有多种细胞因子及炎性介质参与的气道变态反应性炎症［1］。随着分子生物学的不断发展，许多与气道炎症有关的细胞因子受到越来越多的重视，白细胞介素（IL）-10和内皮素（ET）-1均参与了调节气道的炎症反应。笔者检测了支气管哮喘患儿不同时期血清IL-10、ET-1及IgE水平，探讨它们之间的关系及临床意义。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 患儿系笔者所在医院门诊及住院患者，诊断标准均符合中华医学会呼吸学会制定的“支气管哮喘防治指南”标准［2］，排除心、肝、肾等疾病。哮喘急性发作组26例，其中男16例，女10例，年龄5个月～13岁，平均（6.7±3.2）岁。哮喘缓解组24例，其中男15例，女9例，年龄6个月～13岁，平均（6.3±2.7）岁。两组患者抽血前一个半月内无肾上腺皮质激素治疗史，急性发作组无发热。正常对照组20例，为同期健康体检儿童，男11例，女9例；年龄6个月～13岁，平均（6.0±2.9）岁,均无心肺疾病及过敏性疾病史。

1.2 方法 各组均于早晨抽取空腹血样（4 ml/人），离心取血清于-20 ℃冰箱冻存待检。IL-10及ET-1试剂盒为法国Coulter公司产品，IgE试剂盒为中国医学科学基础所提供，均采用酶联免疫法（ELISA）测定，操作步骤：（1）预实验确定标本稀释倍数，系列稀释ET-1标准品及IL-10标准品。（2）将待测血清或不同浓度ET-1或IL-10标准品溶液中至反应孔中，孵育、洗涤。（2）每孔加生物素化ET-1或IL-10检测抗体、室温孵育、洗板；（4）每孔加HRP标记的链霉亲和素结合液避光孵育；（5）加底物液避光孵育；（6）加终止液混匀后置ELX800全自动酶标分析仪上测各孔450nmOD值。根据不同浓度标准品OD值作标准曲线，最后分别求出待测血清ET-1和IL-10浓度。

1.3 统计学处理 采用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用方差分析和q检验，采用Spearman相关性分析。

2 结果

2.1 IL-10、ET-1、IgE检测结果 支气管哮喘患者急性发作组血清IL-10水平显著低于缓解组和对照组，差异具有统计学意义（P

2.2 IL-10、ET-1与IgE之间的关系 哮喘发作期IL-10、ET-1与IgE含量之间进行Spearman相关性分析，结果显示IL-10与IgE之间呈负相关（r-0.574，P

3 讨论

研究表明，炎性细胞释放众多细胞因子相互联系，相互制约，构成了复杂的细胞因子网络，参与了支气管哮喘的发病，它们相互影响、相互诱导、相互制约或协同，并和炎性细胞相互作用，调节气道炎症的发生、发展［3］。内皮素（ET）是哮喘发病过程中的重要因子。

IL-10对细胞因子具有调节作用，IL-10主要通过抑制抗原递呈细胞（APC），诱导T细胞不应答和对呼吸道内炎性细胞直接抑制而在支气管哮喘呼吸道炎症发展中起着负调节作用。研究发现IL-10可以抑制IgE的产生，促进IgG4的合成，从而说明IL-10在过敏性哮喘的病理生理过程中发挥着重要作用。用抗原激发哮喘患者呼吸道炎症，结果也发现哮喘患者IL-10表达显著减少且表达量与痰中嗜酸性粒细胞计数呈负相关。这可能是哮喘患者存在IL-10在转录水平的合成障碍，从而导致哮喘患者血液和BALF中IL-10的水平降低。通过检测BALF或血液中的IL-10水平，能够有利于估计哮喘患者的病情及预后。本研究发现哮喘急性发作期血清IL-10水平明显低于健康对照组，而哮喘缓解期与对照组比较虽无统计学差异，但其数值仍偏低，进一步证实支气管哮喘的发病与血清IL-10密切相关。血清IgE水平在哮喘急性发作期和缓解期均明显高于对照组。哮喘患儿血清IL-10与IgE呈负相关，也进一步证实IL-10对IgE的抑制作用，可以推断IL-10的缺乏可能是导致哮喘发作的重要因素之一。

ET是是迄今为止发现最强的支气管平滑肌收缩剂，ET与效应细胞上的ET受体结合，激活磷脂酶A2产生花生四烯酸，继而产生前列腺素发挥平滑肌收缩作用［4］。另一途径与受体结合后激活磷脂酶C产生三磷酸肌醇酯，使胞内钙离子增加，影响蛋白激酶，Na+-K+-ATP酶促进离子交换，激活离子通道而起作用［5］。应用离体培养的气道上皮细胞及支气管成纤维细胞和转基因等技术进行的研究结果显示，气道上皮细胞损伤后内ET-1的过表达，可能在哮喘气道EOS的聚集，活化及炎症过程中发挥重要作用，损伤的上皮细胞与上皮下成纤维细胞新的信号交流，可以诱导成纤维细胞释放ET-1增多，从而诱导和促进气道结构细胞和气道壁的重塑。本研究显示哮喘急性发作期血清ET-1水平明显高于对照组，与IgE水平呈正相关。血清ET-1的水平是反应支气管哮喘发病状态的重要指标，急性发作期血清ET-1水平明显升高，说明其与支气管哮喘急性发病密切相关。

参 考 文 献

［1］ Kankaanranta H,Lindsay MA,Giernbycz MA,et al.Delayed eosinophil apoptosis in asthma.J Allergy CIin lmmunol,2000,106（1 Pt 1）:77-83.

［2］ 中华医学会呼吸病学会哮喘学组.支气管哮喘防治指南（支气管哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案）.中华结核和呼吸杂志,2003,26（3）:132.

［3］ Spiropoulos K, Frakada G, Nikolaou E, et al. Endothelin-l levelsin the pathophysiology of chronic obstructive pulmonary disease and bronchial asthma. Respir Med,2003,97（8）:983-989.

［4］ Nikolaou E, Frakada G,Prodronmkis E.et al.Evaluation of artc-rial endothelin-1 levels,before and during a sleep study in patients with bronchial asthma and chronic obstructive pulmonary disease. Respiration,2003,70（6）:606-610.

［5］ Dsoanjla A.Zuraw B.Endothelin-l（ET-1）decreases human bronchial epithelial cell migration and proliferalion:inaplications for airway remodeling in asthma.Asthma, 2003,40（8）:883-886.

（收稿日期：2011-04-08）