茵陈多糖对妊娠胆汁淤积大鼠肝脏氧化损伤的保护作用研究

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[摘要] 目的 探讨茵陈多糖对妊娠胆汁淤积大鼠肝脏氧化损伤的保护作用。 方法 采用随机数字表法将32只妊娠SD大鼠分为对照组、模型组、低剂量组及高剂量组，妊娠16周除对照组外均采用苯甲酸雌二醇注射法建立妊娠胆汁淤积大鼠模型，造模成功后低剂量组[50 mg/（kg・d）]及高剂量组[100mg/（kg・d）]分别给予茵陈多糖干预，1周后检测各组大鼠肝脏生化指标[血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、直接胆红素（direct bilirubin， DBIL）及间接胆红素（indirect bilirubin，IBLI）]及氧化还原酶[超氧化物歧化酶（erythrocuprein，SOD）、丙二醛（malonaldehyde，MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）、过氧化氢酶（catalase ，CAT）]活力变化。 结果 茵陈多糖干预1周后，低剂量组及高剂量组血清ALT、AST、ALP、DBIL及IBLI水平明显低于模型组（P < 0.05），低剂量组及高剂量组间差异有统计学意义（P < 0.05）。低剂量组及高剂量组肝组织匀浆MDA水平低于模型组（P < 0.05），SOD、GPx，、CAT平高于模型组（P < 0.05），低剂量组同高剂量组间差异有统计学意义（P < 0.05）。 结论 茵陈多糖能够减轻妊娠胆汁淤积大鼠肝脏氧化损伤，发挥对肝功能的保护作用。

[关键词] 茵陈多糖；妊娠胆汁淤积；肝功能；氧化损伤

[中图分类号] R714.255 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）03（a）-0011-03

妊娠胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）是女性妊娠期间常见的并发症，ICP不仅引起孕妇肝脏功能损伤，胆汁酸的毒性作用也是不良妊娠结局的原因之一[1-2]。茵陈作为利湿退黄的中药在ICP的治疗中具有独特的功效，茵陈中具有多种有效成分，其中茵陈多糖是具有生物活性的组分之一[3]。本文就茵陈多糖对ICP大鼠肝脏氧化损伤的保护作用进行研究。

1 材料与方法

1.1 药品与仪器

茵陈多糖（课题组萃取提纯），超氧化物歧化酶（erythrocuprein，SOD）、丙二醛（malonaldehyde，MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）、过氧化氢酶（catalase ，CAT）检测试剂盒（南京建成生物功臣研究所），分光光度计（常州医用仪器厂）。

1.2 动物造模及干预

32只雌性清洁级SD大鼠由南方医科大学实验动物中心提供，鼠龄6～8周，体重（180±25）g，采用随机数字表法将其分为对照组、模型组、低剂量组及高剂量组，每组8只，分笼饲养，间断光照，定量给食，自由饮水。大鼠适应环境后模型组、低剂量组及高剂量组采用苯甲酸雌二醇注射法建立妊娠胆汁淤积大鼠模型，5 mg/kg苯甲酸雌二醇（1 mg/mL）颈部皮下注射，对照组大鼠给予等剂量生理盐颈部皮下注射，7 d后模型组、低剂量组及高剂量组大鼠毛皮黄染表示造模成功。高剂量组[100mg/（kg・d），100 mg/mL]及低剂量[50mg/（kg・d），50 mg/mL]别给予茵陈多糖生理盐水溶液腹腔注射，对照组及模型组每日腹腔注射等体积生理盐水，连续7 d。

1.3 标本采集

茵陈多糖及生理盐水干预7 d后在氯胺酮麻醉下开胸剪开心脏采集血液标本，低温分离血清，深低温冻存。开腹采集肝脏中叶组织标本，制备组织匀浆。

1.4 肝组织匀浆制备

大鼠肝脏组织标本冰盐水漂洗、剪碎，制备组织匀浆，匀浆介质为蒸馏水1 000 mL pH 7.4，EDTA-2Na 0.01 mol/L，Tris-HCL 0.1 mmol/L，0.8% NaCl溶液，蔗糖0.01 mmol/L，组织匀浆后低温高速离心，留取上清液待测。

1.5 标本检测

大鼠冰冻血清解溶后采用自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、直接胆红素（direct bilirubin， DBIL）及间接胆红素（indirect bilirubin，IBLI）水平。肝组织匀浆上清液采用比色法检测SOD、MDA、GPx，、CAT浓度，标准品绘制标准曲线，依据浓度曲线计算样品浓度，检测过程严格按照试剂使用说明书进行。

1.6 统计学方法

采用SPSS 11.5统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用q检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠肝功能生化指标比较

模型组大鼠血清ALT、AST、ALP、DBIL及IBLI水平均高于对照组（均P < 0.05）；低剂量组及高剂量组大鼠血清ALT、AST、ALP、DBIL及IBLI水平均低于模型组，高于对照组（均P < 0.05），低剂量组大鼠血清ALT、AST、ALP、DBIL及IBLI水平均高于高剂量组（均P < 0.05）。见表1。

2.2 各组大鼠肝组织氧化还原酶系活力比较

低剂量组及高剂量组大鼠肝组织匀浆MDA活力均高于对照组（P < 0.05），低于模型组（P < 0.05）；低剂量组肝组织匀浆MDA活力高于高剂量组（P < 0.05）；低剂量组及高剂量组大鼠肝组织匀浆SOD、GPx，、CAT活力高于模型组（P < 0.05），低于对照组（P < 0.05）；低剂量组肝组织匀浆SOD、GPx，、CAT活力低于高剂量组（P < 0.05）。见表2。

3 讨论

ICP是一种在妊娠中晚期出现，以皮肤瘙痒及黄疸为特点的妊娠期并发症。ICP的发病与多种因素有关，近年来的研究结果显示，遗传易感性、内分泌激素代谢异常及免疫功能异常等均参与ICP的发病[4-5]。ICP的发生有地域、种族及家族聚集倾向，肝毛细胆管转运器突变基因以及酶类表达异常等均参与发病。在妊娠期雌激素水平上升引起肝细胞的能量代谢障碍，能够导致细胞膜的流动性下降及胆盐代谢障碍，雌激素受体也能够同胆汁酸竞争性结合转运载体，同时胆管系统的通透性升高，引起胆汁的淤积及返流，导致胆汁淤积[6-7]。

ICP不仅对母体的多器官功能损害，高胆红素血症也是引起流产、死胎等不良妊娠结局的原因之一[8]。ICP的发病机制目前尚不完全清楚，保肝、退黄等对症治疗是目前的主要治疗措施。中医药在ICP的治疗中具有独特的疗效，茵陈是退黄的主要药物之一，大部分治疗ICP的中药方剂中都以茵陈为主要组分。伴随现代药理学的发展，中药的组分及其药理、药效的研究不断深入，发现茵陈中含有80余种有效成分[9]，包括酮类、萜类、多糖类等组分，其中，多糖是茵陈中含量较高的组分，也是有效的药用成分之一。

本研究采用茵陈多糖对妊娠胆汁淤积大鼠模型干预结果显示，妊娠胆汁淤积大鼠模型给予茵陈多糖干预后，AST、ALT及ALP水平较模型组降低，大鼠的黄疸减轻，IBIL及DBIL水平较模型组亦降低，提示妊娠胆汁淤积大鼠的肝脏损伤及胆汁淤积均获得明显改善，并且呈现明显的剂量依赖性，高剂量组的改善效果优于低剂量组。对茵陈多糖改善胆汁淤积大鼠肝脏功能及瘀胆的原因进一步分析发现，在高、低剂量组，大鼠肝组织匀浆还原酶系SOD、GPx及CAT的活力明显高于模型组，而氧化酶系MDA的活力低于模型组，提示茵陈多糖能够减轻妊娠胆汁淤积大鼠的肝脏氧化损伤，并且伴随剂量提高改善效果。既往研究结果显示，植物多糖具有强大的抗氧化功能[10]。茵陈的多糖组分具有抗氧化作用，能够清除氧自由基，减少组织及细胞的氧化损伤[11]。对梗阻性黄疸大鼠的研究发现，茵陈多糖能够减轻胆汁淤积所致的肝脏氧化损伤[12]，改善肝脏功能，其对氧化损伤的拮抗作用可能是茵陈多糖改善妊娠胆汁淤积大鼠肝脏功能损伤的机制之一。

[参考文献]

[1] 冯丽霞，胡珊，李力.妊娠肝内胆汁淤积症病因及对母婴危害的研究[J].国外医学：妇幼保健分册，2004，15（4）：223-225.

[2] 刘民甫，孙先，鄢碧玉，等.202例妊娠期肝内胆汁淤积症的妊娠结局分析[J].现代妇产科进展，2007， 16（3）：226-227.

[3] 刘晓河，梁惠花，谭晓红，等.茵陈中多糖的含量测定[J].中草药，2003，6（6）：519-520.

[4] Humberto R，Maria EB，Manuel CG，et al. Selenium， zinc and copper plasma levels in intrahepatic cholestasis of pregnancy，in normal pregnancies and in healthy individuals，in Chile [J]. Journal of Hepatology，2000，32（4）：5425-5454.

[5] Sookoian S，Castano G，Burgueno A，et al. Association of the multidrug-resistance-associated protein gene （ABCC2） variants with intrahepatic cholestasis of pregnancy [J]. J Hepatol，2008，48（1）：125-132.

[6] Vallejo M，Briz O，Serrano MA，et al. Potential role of trans-inhibition of the bile salt export pump by progesterone metabolites in the etiopathogenesis of intrahepatic cholestasis of pregnancy [J]. J Hepatol，2006，44：1150-1157.

[7] Carreras FI，Lehmann GL，Ferri D，et al. Defective hepatocyte aquap-orin-8 expression and reduced canalicular membrane water permeability in estrogen-induced cholestasis [J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2007，292：905-912.

[8] 王晓东，彭冰，姚强，等.妊娠肝内胆汁淤积症1210例围生结局分析[J].中华医学杂志，2006，86（7）：446-449.

[9] 严泽群，张秀兰.艾蒿挥发油化学成分的研究[J].信阳师范学院学报，2008，21（2）：206-210.

[10] Zhu MY，Wang CJ，Gu Y，et al. Extraction，characterization of polysaccharides from Morinda officinalisand its antioxidant activities [J]. Carbohydrate Polymers，2009，78 （3）：497-501.

[11] 戴喜末，熊子文，罗丽萍.响应面法优化野艾蒿多糖的超声波提取及其抗氧化性研究[J].食品科学，2011，32（8）：93-97.

[12] 李源渊，赫长胜，侯建敏，等.茵陈多糖对梗阻性黄疸幼鼠肝损伤的保护作用[J].河北医药，2012，34（8）：1128-1130.

（收稿日期：2012-10-18 本文编辑：程 铭）