虎杖炮制后成分的研究

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中图分类号：R932 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2011）04-0119-03

虎杖不仅供观赏，也做食品，嫩茎做蔬菜，根做冷饮料，置凉水中镇凉（冰箱冰镇尤佳》名，“冷饮子”，清凉解暑代茶。它的液汁可染米粉，别有风味。食用以其味酸故也称“酸汤杆”。虎杖含有蓼甙、有机酸、葡萄糖甙、多糖类等。有清热解毒、清凉解署、健胃清食作用。虎杖Rhizoma Polygoni Cuspidati。别名:花斑竹、酸筒杆、酸桶笋、酸汤梗、川筋龙.本品为蓼科 Polygonaceae 植物虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.，的干燥根茎和根。

虎杖来源于蓼科植物的根及根茎，主要含有虎杖甙、白黎芦醇等羟基蒽醌类化合物及鞣质等成分，具有祛风利湿、散寒止痛的功效。中医临床常用来治疗关节痹痛、湿热黄疸、经闭、瘕、水火烫伤、痈肿疮毒。根据中药炮制炒炭可增强药物收敛作用的理论，结合临床虎杖用于治疗烧伤的作用，本文探讨了炒炭对虎杖主要活性成分含量的影响。现将实验结果报告如下：

1 仪器、试剂与试药

UV－256FW紫外分光光度仪；TG－328B分析天平；1，8－二羟基蒽醌；铬黑T （德州市助剂厂）；乙二胺四醋酸二钠（德州市助剂厂）；氯化铵，醋酸锌；实验所用试剂均为分析纯。

铬黑T指示液：称取铬黑T0.5g，加pH10的NH3－NH4CL缓冲液10mL溶解后，再加适量的乙醇成100 mL，摇匀。氨－氯化铵缓冲液（pH 10）：称取氯化铵60 g，置1000 mL容量瓶中，用适量蒸馏水溶解，加570 mL浓氨水用蒸馏水稀释至刻度。1M醋酸锌标准溶液：称取Zn（CH3COO）2•H2O 219.50 g置1000 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。0.05 M乙二胺四醋酸二钠溶液：称取EDTA•2Na•2H2O 18.6 g加适量水溶解稀释至刻度1000 mL，摇匀。

虎杖购自山东省药材公司，经鉴定为蓼科蓼属植物虎杖polygonum cuspidatum sieb et zucc 的根及根茎。按文献方法[1]炒炭，即用武火加热，炒至表面呈焦黑色，内部焦褐色，取出，放凉，作为虎杖炒炭样品。

2 方法与结果

2.1 浸出物的测定[2]

2.1.1 水浸出物的测定（热浸法）：取虎杖炒炭样品4克，3份，称定重量（精密至0.01g）置250ml锥形瓶中，加水100ml，塞紧，静置1h，回流加热至沸1h，冷却后于105℃干燥3h，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称重，以干燥品重量计算样品中含水浸出物的百分数，结果见表1 。

2.1.2 醇浸出物的测定[3]：

照水浸出物测定方法测定，以70%乙醇代替水，结果见表1 。

2.2 蒽醌的测定[4]

2.2.1 标准曲线的绘制：精密称取25 mg 1，8二羟基蒽醌，置250ml容量瓶中，用氯仿溶解并稀释至刻度。精密量取上述标准液0.50 、1.00 、2.00 、3.00 、4.00 、5.00 mL分别放入25 mL容量瓶中，在水浴上蒸去氯仿，加入5％氢氧化钠－2%氢氧化铵混合碱液至刻度，摇匀，30 min后在520.6 nm处测定光密度（A），以混合碱液为空白对照，绘出光密度（A）－浓度的关系曲线，计算得该曲线的回归方程为A＝0.0198C+0.0022 。

2.2.2 游离蒽醌的测定 ：精密称取样品100 mg置索氏提取器中，以50 mL氯仿回流提取至无色，将提取液加入分液漏斗中，冷却至室温，以5%NaOH－2%NH3H2O混和液萃取至无色，合并碱液，用少量氯仿洗涤，弃去氯仿，将碱液调整至一定体积250 mL，若不澄清可用少量氯仿垂溶漏斗过滤，溶液沸水中加热4 min，用冷水冷至室温（注意补定体积），30 min后在520.6 nm处测定光密度（A）以混合碱液为空白，由标准曲线计算含量。结果见表1。

2.2.3 总蒽醌的测定：精密称取样品100 mg，加20 mL混和酸和10 mL冰醋酸，再加入2 mL25%盐酸，溶于100 mL三角瓶中，回流3h，冷后加30 mL氯仿，续回流20 min，提取液用滤纸过滤到分液漏斗中，用少量水洗涤氯仿，氯仿液用混和碱液同上萃取测定，测定含量为总蒽醌。结果见表1。计算公式（C×T/W）×100%（其中，C为游离蒽醌浓度mg.mL-1，T为样品稀释度，W为干燥样品重）。

2.3 鞣质的测定[5]

取虎杖炒炭样品粉末约4g（含鞣质约1 g），精密称定，置锥形瓶中，加水150 mL，于水浴上加热30 min，趁热过滤。精密吸取1M醋酸锌标准溶液10 mL，置250 mL容量瓶中，加浓氨水7 mL。摇匀，使白色沉淀溶解。将上述含鞣质的提取液置（35±2）℃水浴中片刻，然后全部转入含标准锌盐溶液的容量瓶中，振摇1 min，置上述温度的水浴中温热30 min，间歇振摇数次，冷却数次，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀后用滤纸过滤，初滤液弃去。精密吸取续滤液20 mL，置500 mL锥形瓶中，加蒸馏水300 mL，pH 10的氨－氨化铵缓冲溶液250 mL及铬黑T指示液1 mL，以0.05M乙二胺四醋酸二钠溶液滴定至溶液由紫红色变为纯兰色。按下式计算鞣质含量。结果见表1 。

鞣质%＝0.1556×V/W×100%式中，0.1556 为滴定度（经验数据）；V 为1 mol.L-1醋酸锌标准溶液用于形成络合鞣质消耗的量，V＝20×MZn－25×ME×Q，其中，25为锌液稀释倍数，MZn为醋酸锌标准溶液的浓度，Q为EDTA－2Na标准溶液消耗的毫升数；W为样品重。

3 结论与讨论

3.1 虎杖生品水溶性浸出物为11.3% ，醇溶性浸出物含量为12.25%，而炒炭后分别减少12.7% 、4.7% ，是由于高温对虎杖中的水溶、醇溶成分有破坏从而使含量降低。

3.2 结果表明， 虎杖总蒽醌生品为0.592% ，炒炭后为0.518% ，减少12.5% ；游离蒽醌生品为0.16%，炒炭后0.078%，减少51.3% 。说明总蒽醌，游离蒽醌炒炭后均有破坏，尤其以游离蒽醌减少明显，这是由于游离蒽醌具有一定的升华性，经高温炒炭后挥发损失所致。

3.3 实验结果表明，生品鞣质含量为23.96% ，炒炭后为39.75% ，提高了65.9% ，可能是由于炒炭使大部分有机成分破坏，而鞣质相对耐高温，相对使其含量提高。

3.4 鞣质具有收敛作用，可与组织中蛋白质结合而生成沉淀，收缩毛细血管，保护创面，防止感染，加之炒炭后，炭素的吸附作用和其它作用，从而加速了创面的愈合，有关药理及临床有待进一步研究探讨。

参考文献

[1] 陈绍民，等.山东省中药饮片炮制规范，2010.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典，2000版 一部.北京化学工业出版社，附录X.

[3] 金铃.不同产地虎杖炮制品醇浸出物测定[J].中成药，1991，19.

[4] 蔡宝昌.中药炮制学[M].中国中医药出版社，2008，9.

[5] 沙世炎.中草药有效成分分析法[M].北京:人民卫生出版社，1982.