针刺“四神聪”对睡眠紊乱模型小鼠生理功能的影响

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇针刺“四神聪”对睡眠紊乱模型小鼠生理功能的影响范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

文章编号：0255-2930(2007)09-0681-03

中图分类号：R 246．6文献标识码：A

［摘 要］ 目的：探讨针刺“四神聪”穴对睡眠的影响及作用机制。方法：健康小白鼠48只随机分为四神聪组、足三里组、模型组、正常空白对照组，每组12只，前3组反复定时腹腔注射小剂量咖啡因致小鼠睡眠节律紊乱，前2组分别给予针刺“四神聪”、针刺“足三里”治疗。观察各组生活状态、昼夜活动情况，检测脑组织一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)含量。结果：针刺“四神聪”和“足三里”均可改善睡眠节律紊乱小鼠的一般生存状态、睡眠节律、睡眠质量，但四神聪组优于足三里组；针刺“四神聪”“足三里”均可显著提高小鼠脑组织NOS活性及NO含量，但“四神聪”组疗效明显优于“足三里”组(P

［主题词］ 睡眠障碍/针灸疗法；睡眠/针灸效应；一氧化氮合酶/代谢；穴，四神聪；小鼠

Effects of acupuncture at "Sishencong" (EX-HN 1) on physiological functions in the sleep disorder model mouseGAO Xi-yan, MA Qiao-lin, HU Bin (School of Acupuncture & Massage, Henan College of TCM, Zhengzhou 450008, China)ABSTRACT Objective To probe into the effect of acupuncture at "Sishencong" (EX-HN 1) on sleep and the mechanism. Methods Forty-eight white mice were randomly divided into a Sishencong group, a Zusanli group, a model group and a blank control group, 12 mice in each group. In the mice of the first 3 groups, sleep rhythm disorders was induced by repeatedly regular intraperitoneal injection of small dose of Caffeine, and the mice of the first two groups were treated by acupuncture at "Sishencong" (EX-HN 1) and "Zusanli" (ST 36), respectively. Living state and, circadian activities were observed, and nitric oxide synthase (NOS) activity and nitric oxide(NO) content in the brain were detected. Results Acupuncture at "Sishencong" (EX-HN 1) or "Zusanli" (ST 36) could significantly increase NOS activity and NO content in the brain, with acupuncture at "Sishencong" (EX-HN 1) being significantly better than acupuncture at "Zusanli" (ST 36) (P

KEY WORDS Sleep Disorders/am ther； Sleep/am eff； Nitric Oxide Synthase/metab； Point EX-HN 1 (Sishencong)； Mice

四神聪为临床常用的经外奇穴，有清利头目、安神健脑、开窍益智的作用。针刺四神聪穴治疗失眠及睡眠障碍，在古代医案、现代临床报道等文献中已有记载，但有关四神聪穴的作用机制研究尚处于初期探索阶段，一般限于临床观察，实验研究较少，而对治疗睡眠障碍方面的研究更少。本课题以反复定时腹腔注射小剂量咖啡因致小鼠睡眠节律紊乱，观察针刺“四神聪”后其生活状态、昼夜活动情况的变化，并通过检测小鼠脑组织内的一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)含量,探讨NOS、NO与睡眠的关系及针刺四神聪穴对睡眠的影响，为临床针刺四神聪穴治疗失眠及睡眠障碍类疾病提供科学依据。

1 材料与方法

1．1 材料

动物：健康昆明种小白鼠48只，雌雄各半，体重(22±2) g，由河南省实验动物中心提供(HN01-0311)。主要药品、试剂：NO、NOS试剂盒，考马斯亮蓝蛋白试剂盒(南京聚力生物医学工程研究所提供，批号分别为：050401，050309，050423)；咖啡因(天津中安药业，20050205)。主要仪器设备：精密天平(IA1103N)，电动玻璃匀浆机(DY89-1)，离心机(LD4-2)，紫外可见分光光度计(WF2UV-2000)。

1．2 方法

购买动物后在水和标准饲料充足、无干扰正常睡眠条件下饲养7 d后开始实验。雌雄分笼，称重后随机分为4组，每组12只。

针刺四神聪组(简称四神聪组)：每日清晨7时30分，经腹腔注射小剂量咖啡因(2 mg/kg)，连续注射7 d，第8 d起按程序予以针刺“四神聪”治疗。选定该穴的4处进针点，斜向“百会”针刺，进针约2 mm，进针后平补平泻手法快速捻转行针1 min，不留针。每日1次，连续7 d为全疗程。

针刺“足三里”组(简称足三里组)：每日清晨7时30分，经腹腔注射小剂量咖啡因(2 mg/kg)，连续注射7 d，第8 d起按程序予以针刺“足三里”治疗。直刺约2 mm，进针后平补平泻手法捻转行针1 min，不留针。每日1次，连续7 d为全疗程。

模型组：每日清晨7时30分，经腹腔注射小剂量咖啡因(2 mg/kg)，连续注射7 d，第8 d起按程序只抓取不注射。连续7 d为全疗程。

正常空白对照组（简称空白组）：每日清晨7时30分，经腹腔注射生理盐水（0．5 mL），连续注射7 d，第8 d起按程序只抓取不注射。连续7 d为全疗程。

穴位的定位：根据李忠仁主编的《实验针灸学》[1]，并以比较解剖和骨度分寸法为依据，小鼠“四神聪”定位：头部顶骨正中前后左右各旁开约2 mm；小鼠“足三里”定位：膝关节后外侧，腓骨小头下约1．5～2 mm处。

1．3 指标检测

实验期间对动物的毛皮整洁度光亮度(是否枯槁)、饮食、精神状态、反应能力、攻击行为等生存状态进行观察。对小鼠适应性饲养期间、造模后、治疗后等不同实验阶段的睡眠期间、活动期间分别进行观察，主要包括睡眠期间是否安卧，有无嗅、举肢、理毛、走动；活动期间饮食、嬉戏状况，有无激惹、咬斗、易受惊、反应迟钝等。于疗程结束后断头处死小鼠，即刻迅速剥离出脑(除掉小脑)备用。脑组织NOS活性、NO含量测定分别依据NOS、NO测定试剂盒使用说明书进行。

1．4 统计学处理

数据用SPSS 11．5 for Windows统计软件处理，采用方差分析。

2 结果

2．1 针刺“四神聪”对咖啡因致睡眠节律紊乱小鼠一般生存状态影响(见表1)

从表1可以看出，治疗结束后，模型组形体消瘦、皮毛枯槁、食量减少、精神萎靡、反应迟钝、攻击行为均明显；空白组小鼠一般状态正常；足三里组形体消瘦、攻击行为明显、反应迟钝；四神聪组形体消瘦，有攻击行为。提示模型组一般生存状态最差，空白组一般生存状态最好，而针刺“四神聪”和“足三里”均可改善睡眠节律紊乱小鼠的一般生存状态，但四神聪组疗效优于足三里组。

2．2 针刺“四神聪”对咖啡因致睡眠节律紊乱小鼠昼夜活动情况的影响一般情况下，小鼠“昼伏夜出”，白昼为其睡眠期，活动较少，夜间为其活动期，活动较多。小鼠适应性饲养期间及分组时睡眠较好，睡眠期间各组偶有个别小鼠嗅、举肢、理毛或轻微走动，活动期间饮食状况好，时有嬉戏。造模后，除空白组外，各组睡眠期间均不能安卧，嗅、举肢、理毛或走动增多，活动期间饮食状况差，食量下降明显，激惹，咬斗。治疗后观察，模型组睡眠期间不能安卧，且嗅、举肢、理毛、走动，活动期间饮食状况差，食量下降明显，无嬉戏，易受惊；空白组睡眠期间偶有个别小鼠嗅、举肢、理毛或轻微走动，活动期间饮食状况好，时有嬉戏；四神聪组与足三里组睡眠期间小鼠有嗅、举肢、理毛或轻微走动等，但次数少于模型组，活动期间饮食状况一般，偶有嬉戏，足三里组较四神聪组咬斗多。提示模型组睡眠节律最差、睡眠质量最差，并导致活动期各种生理活动恶化，而针刺“四神聪”和“足三里”均可改善睡眠节律紊乱小鼠的睡眠节律和睡眠质量，从而改善活动期各种生理活动状况，且四神聪组疗效优于足三里组。

2．3 针刺“四神聪”对咖啡因致睡眠节律紊乱小鼠脑NOS活性、NO含量的影响（见表2）从表2可以看出，模型组与空白组相比，脑组织NOS活性及NO含量均明显降低，差异有非常显著性意义（P

3 讨论

本课题通过观察针刺“四神聪”对睡眠节律紊乱小鼠的生活状态、活动情况、脑组织NOS活性、脑组织NO含量的影响，从而探讨脑NOS、NO与失眠的关系及针刺四神聪穴对睡眠的影响。结果显示，NO、NOS与睡眠节律及睡眠质量密切相关；针刺“四神聪”可改善睡眠紊乱小鼠的生活状态，调整睡眠节律使其趋于正常，显著提高其脑组织NO含量、NOS活性。与体穴“足三里”相比，“四神聪”具有显著的调整脑功能的作用，且对于睡眠调整具有明显的特异性，能够改善睡眠节律，提高睡眠质量，并多角度地改善整体生存质量。提示针刺四神聪治疗失眠、调整睡眠及多种精神神经症状，可能是通过增强NOS活性、提高NO含量，从而加强了对脑组织的保护作用及其正常功能而实现的。

四神聪穴处于巅顶百会穴四周，为诸阳气聚会之处，针刺四神聪穴能调节一身之阳气，虚者可实之，阳气实则阴阳平衡，亢者可平之而引阳入阴；人身有四海，脑为髓海，四神聪以其特殊的位置，可醒脑健脑，通督补髓，而脑为“元神之府”，故可治元神之疾。现代研究发现，针刺四神聪具有提高SOD活性、清除有害的自由基、保护脑组织细胞的功能[2]；可加强局部血循环，改善脑缺血、缺氧状态[3]；联合脑多肽可改善氧自由基代谢，调节NO功能，并减轻兴奋性神经毒性[4]；提高氧代谢能力，加速损伤脑组织的修复和新的功能联系的形成，在治疗神经系统疾病上有其独特功能[5]等。本课题从动物实验方面证实四神聪具有显著的调整脑功能的作用，且对于睡眠调整具有明显的特异性，能够改善睡眠节律、提高睡眠质量。

睡眠的功能在于促进脑功能的发育和发展、保存脑的能量、巩固记忆及保证大脑发挥最佳功能状态、延缓衰老、增强机体的免疫机制、保护中枢神经系统等。保持正常的睡眠对人类极为重要，失眠对人的躯体和精神均可产生不良影响，可引起交感神经功能亢进，代谢增高，影响机体机能恢复，削弱免疫机制，导致各种疾患或使原有的各种疾患加重，并影响儿童生长发育；可影响工作和学习效率，更是影响记忆、计算、逻辑推理等精神活动的重要因素，可使人情绪沮丧、焦躁，进而影响人际关系。NOS活性、NO含量等与人及动物的记忆、学习、活动能力等生理状态，精神系统、神经系统、免疫系统等各系统以及组织器官衰老情况等较多方面有密切关联，可促进大脑的记忆学习、维持正常的精神状态、维持神经系统的正常介导、维持免疫机能等。NOS在中枢神经系统（CNS）中有广泛作用，作用效果依其来源、含量、作用靶位和机体状态而异，因此有生理性和病理性双重功能。NO一方面是一种反应性极强的自由基，另一方面又兼有第二信使和神经递质作用，介导和调节多种病理生理过程[6]。因此，探讨NO、NOS与失眠的关系具有一定的临床意义。本课题研究结果显示，NO、NOS与睡眠节律及睡眠质量密切相关，进一步提示针刺四神聪治疗失眠、调整睡眠及多种精神神经症状，可能部分是通过增强NOS活性、提高NO含量，促进了脑组织的正常功能而实现的。

4 参考文献

1 李忠仁.实验针灸学.北京：中国中医药出版社，2003：329

2 朱科，曹锐.针刺治疗一氧化碳中毒迟发型脑病疗效观察.针刺研究，1999，24(2)：87

3 霍则军，任秀君，刘青云.针刺不同穴组对脑缺血再灌注大鼠保护作用研究.山西中医，2004，20(1)：74

4 唐胜修，唐萍.针刺四神聪联合脑多肽穴注治疗血管性痴呆的临床研究.医学文选，2002，22(2)：168

5 龚秀杭.四神聪穴治疗小儿乙脑后遗症.针灸临床杂志，1998，14(4)：23

6 庞战军，周玫，陈瑗，等.自由基医学研究方法.北京：人民卫生出版社，2000：243-252

(收稿日期：2006-11-20，齐淑兰发稿)