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儿茶素与表儿茶素稳定性考察

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【摘要】目的 确定儿茶素,表儿茶素稳定性。方法 采用香草醛盐酸显色,紫外测定含量的方法进行实验,检测波长500 nm。结果 3小时内,表儿茶素x0.239s0.003RSD%1.122;儿茶素x 0.134s0.012 RSD% 8.047。结论 表儿茶素在3小时内稳定性好且优于儿茶素,宜选用。

【关键词】儿茶素 表儿茶素 标准品

中图分类号:R978.2文献标识码:B文章编号:1005-0515(2011)1-208-02

Studies onconstancy of epicatechin and catechin

PAN JIyang GONG Weihong ZHANG Xiaohua*

(School of Chinese Pharmacy,Beijing University of Chinese Medicine , Beijing 100102)

【Abstract】Objective TO determine the catechin, epicatechin stability。Methods Colouration by vaniuin-hydroehloric acid , UV method ,The test wavelength was 500nm.Result In3 hoursepicatechin0.239,s0.003,RSD% 1.122.Conclusions The constancyofepicatechin was better than catechin.

【Key words】catechinepicatechin standard

随着药物化学及制剂产品质量研究的快速发展,儿茶素,表儿茶素作为标准品被广泛采用。用HPLC法测定的条件主要有以下几种:

1十八烷基硅烷键合硅胶柱(大连依利特,4 6mm×250mm,5μm);0.04mol・L-1枸椽酸溶液 N,N二甲基甲酰胺 四氢呋喃(45∶8∶2)为流动相;检测波长为280nm;柱温35℃;流速10mL・min-1。儿茶素对照品、原儿茶素对照品[1] 。

2 色谱柱:PurospherstarRP-C18色谱柱(4 6mm×250mm,5μm,德国Merck公司);流动相V(乙腈)∶V(高纯水)∶V(磷酸)=10∶89 1∶0 9;检测波长278nm;流速1mL/min;柱温25℃;儿茶素对照品[2]

3 色谱柱色谱柱:AgilentZorbaxSB-C18(4 6×250mm,5μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(15∶84∶1),流速:0 9ml・min-1;柱温30℃;检测波长:278nm,理论塔板数以儿茶素计不低于6000。儿茶素对照品[3]。

4色谱柱:Shiseido Capcell Pak C18(4.6 mm ×150 mm,5 μm);流动相为N,N- 二甲基甲酰胺- 四氢呋喃(4∶1)-0.04 mol/L 枸橼酸溶液(13∶87);流速1 mL/min;检测波长280 nm。儿茶素对照品与表儿茶素对照品[4]。

5 色谱条件色谱柱:WatersC18色谱柱(美国Waters公司生产);流动相为体积分数为0.1%磷酸水溶液-乙腈,梯度脱,柱温:室温;检测波长210nm.儿茶素和表儿茶素对照品[5]。

6色谱条件色谱柱为HypersilC18柱(250mm×4 6mm,10μm),测定儿茶素采用的流动相为乙腈-水-三乙胺(8:92:0 3,磷酸调pH4),检测波长206nm;测定表儿茶素采用的流动相为乙腈-水-三乙胺(11:89:0 3,磷酸调pH3),检测波长204nm[6]。

7 依利特C18柱( 200 mm×4.6mm, 5 μm) 为色谱柱, 以0. 04 mol・L- 1枸橼酸- N,N- 二甲基甲酰胺- 四氢呋喃(45∶8∶2)为流动相,检测波长为280 nm。儿茶素和表儿茶素为标准品[7]。

8色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(150mm×4.6mm,4.6μm)。乙腈 0.5%三乙胺溶液(10∶90)(磷酸调pH值至3.0)为流动相,流速:1ml/min,检测波长280nm。以儿茶素、表儿茶素为标准品[8]。

9用反相高效液相色谱法测定表儿茶素含量,色谱柱为diamonsilc-18柱(200mm×4.6mm,5um),流动相0.02mol/l,磷酸二氢钾(ph=3)-乙腈(83:17),检测波长273nm,流速1ml/min,柱温25 。标准品表儿茶[9]。

文献报道,儿茶素与表儿茶素稳定性差[10],为了确定其稳定性做小实验:

一实验仪器:

uv-2800紫外可见分光光度计,尤尼柯(上海)仪器有限公司

二实验标准品:

儿茶素,表儿茶素,购于中国药品生物制品检定所

三试剂

香草醛,盐酸,甲醇均为分析纯,北京化工厂出品

四试验方法:

用紫外法测标准品含量随时间变化曲线,比较二者稳定性,用香草醛盐酸显色,紫外扫描选定测定波长为500 nm。取1.2毫克表儿茶素标准品用甲醇配成25毫升标准液,儿茶素少量用甲醇配成标准液。

样品1:表儿茶素1毫升+6毫升香草醛5%水溶液+3毫升盐酸=10毫升

样品2:儿茶素1毫升+6毫升香草醛5%水溶液+3毫升盐酸=10毫升

用两因素方差分析得:

表儿茶素均值x 0. 239s0.003RSD%1.122

儿茶素均值x 0. 134s0.012RSD%8.047

结论:表儿茶素比儿茶素稳定性好,建议选一个作为标准品时用表儿茶素。

参考文献

[1]吴桂芳HPLC测定康复灵中儿茶素与原儿茶素的含量中国中药杂志第32卷第22期2007年11月

[2]贺光东,于海平,姬志强,HPLC法测定帽蕊木茎皮中儿茶素的质量分数精细化工第25卷第12期2008年12月1198-1191

[3]韩建伟,刘新国HPLC法测定三叶委陵菜药材中儿茶素含量研究湖北中医学院学报2008年9月第10卷第3期55-57

[4]曲银锋,李松武,刘乃强等 HPLC法测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素的含量食品与药品2009 年第11 卷第05 期39 39-41

[5]陈烨 ,周云鹏,徐利锋等 HPLC法同时测定甙原胶囊中儿茶素和表儿茶素的含量辽宁大学学报自然科学版第35卷第3期2008年267-270

[6]毛惠英,张丹,李鑫楠等RP-HPLC测定家兔血浆中的儿茶素和表儿茶素,

华西药学杂志2009,24(1):066~067

[7]雷玉萍, 殷帅RP-HPLC法同时测定溃疡灵片中儿茶素和表儿茶素的含量中医药导报第14 卷第6 期2008 年6 108-109

[8]刘刚,谭生建,姜韧等高效液相色谱法测定茶黄酊中儿茶素和表儿茶素的含量药学学报第24卷第4期363-366

[9]赵映兰,林彩,贺红军等 山楂药材中表儿茶素的提取及含量测定中国药业 药物研究2009年第18卷第12期34-35

[10]王钢力,于健东,田金改等. 儿茶药材化学成分分析――反相高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量[ J ] . 药物分析杂志. 1999,12(2):88-90.